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PCV2 ORF2基因真核表达质粒的构建及与猪IL-15联合免疫效果研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-18页
   ·猪圆环病毒感染第11-14页
     ·病原第11-12页
     ·流行病学第12-13页
     ·临诊症状及病理变化第13-14页
   ·PCV2 疫苗的研究进展第14-15页
     ·PCV2 传统疫苗第14页
     ·PCV2 新型疫苗第14-15页
   ·IL-15 的研究进展第15-17页
     ·IL-15 简介第16页
     ·IL-15 对 T 细胞的影响第16页
     ·IL-15 对 NK 细胞的影响第16页
     ·IL-15 对 B 细胞的影响第16页
     ·IL-15 在疫苗研究中的作用第16-17页
   ·研究目的与意义第17-18页
2 材料和方法第18-30页
   ·实验材料第18-19页
     ·质粒、菌株、毒株与细胞第18页
     ·实验动物第18页
     ·主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒第18页
     ·主要生化试剂第18-19页
     ·主要仪器设备第19页
   ·实验方法第19-30页
     ·PCV2 ORF2 基因原核与真核表达质粒的构建第19-22页
     ·重组蛋白的诱导表达以及抗原性质鉴定第22-23页
     ·PCV2 多克隆抗体的制备第23-25页
     ·pVAX1-PCV2-ORF2 和 pVAX1-pIL-15 体外表达检测第25页
     ·质粒免疫及免疫效果检测第25-29页
     ·数据处理第29-30页
3 实验结果第30-45页
   ·PCV2 多克隆抗体制备第30-34页
     ·PCV2 ORF2 基因编码 Cap 蛋白的原核表达第30-31页
     ·表达蛋白的纯化第31-32页
     ·多克隆抗体的检测第32-34页
   ·PCV2 ORF2 基因真核表达质粒的构建第34页
   ·真核表达质粒 pVAX1-PCV2-ORF2 与 pVAX1-pIL-15 体外表达检测第34-35页
   ·体液免疫应答检测第35-37页
     ·PCV2 抗体检测第35-36页
     ·中和抗体检测第36-37页
   ·细胞免疫应答检测第37-40页
     ·淋巴细胞增殖实验第37页
     ·CD4~+、CD8~+T 淋巴细胞亚群含量变化第37-39页
     ·IFN-γ和 IL-4 含量变化第39-40页
   ·疫苗保护效果检测第40-45页
     ·体重变化第40-41页
     ·PCV2 含量的变化第41-42页
     ·病理变化第42页
     ·生殖系统变化第42-45页
4.讨论第45-48页
   ·可溶性蛋白的纯化第45页
   ·实验设计第45页
     ·ORF2 基因的选择第45页
     ·动物模型的选择第45页
     ·攻毒剂量和攻毒方式的确定第45页
   ·疫苗免疫效果的评价第45-47页
     ·体液免疫应答第45-46页
     ·细胞免疫应答第46页
     ·疫苗保护效果第46-47页
   ·与其他PCV2新型疫苗免疫效果比较第47-48页
5.结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-61页
附件第61-63页
攻读硕士期间发表的学术论文第63页

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