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耦合法分析玉米叶绿体Trx调节靶蛋白氧化还原态及其活性

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
文献综述第9-15页
1 引言第15-17页
   ·研究目的与意义第15页
   ·研究内容第15-17页
2 材料与方法第17-24页
   ·材料第17-18页
     ·菌株、质粒和自交系第17页
     ·试剂第17页
     ·仪器与设备第17页
     ·本研究所用溶液的配制第17-18页
     ·本研究中设计的引物第18页
   ·方法第18-24页
     ·玉米和拟南芥幼叶总RNA的提取第18页
     ·玉米和拟南芥cDNA的扩增第18页
     ·玉米FNR2、CHLI基因和拟南芥NTR基因的扩增第18-19页
     ·原核表达载体的构建第19-20页
     ·重组蛋白的表达与纯化第20-21页
     ·玉米FNR2蛋白的活性分析第21页
     ·拟南芥NTR蛋白的活性分析第21-22页
     ·玉米CHLI蛋白的活性分析第22页
     ·氧化还原系统调节靶蛋白的氧化还原态标记分析第22-24页
3 结果与分析第24-36页
   ·玉米及拟南芥幼叶总RNA的提取第24页
   ·本研究相关蛋白编码基因的克隆第24-26页
     ·重组玉米FNR2蛋白编码基因的克隆第24-25页
     ·重组拟南芥NTR蛋白编码基因的克隆第25页
     ·重组玉米CHLI蛋白编码基因的克隆第25-26页
   ·原核表达载体的构建第26-28页
     ·玉米FNR2原核表达载体的构建第26页
     ·拟南芥NTR原核表达载体的构建第26-27页
     ·玉米CHLI原核表达载体的构建第27-28页
   ·重组玉米FNR2蛋白的原核表达、纯化及活性分析第28-31页
     ·带有N端组氨酸标签的玉米FNR2蛋白的原核表达第28-29页
     ·带有SUMO标签的玉米FNR2蛋白的原核表达和纯化第29-30页
     ·带有C端组氨酸标签的玉米FNR2蛋白的原核表达和纯化第30-31页
     ·重组玉米FNR2蛋白的酶活分析及标签对酶活性的影响第31页
   ·重组拟南芥NTR蛋白的原核表达、纯化及活性分析第31-33页
     ·重组拟南芥NTR蛋白的原核表达、纯化第31-32页
     ·重组拟南芥NTR蛋白的酶活分析第32-33页
   ·重组玉米CHLI蛋白的原核表达、纯化及活性分析第33-35页
     ·重组玉米CHLI蛋白的原核表达和纯化第33页
     ·受氧化还原系统调节的玉米SUMO-CHLI氧化还原态分析第33-34页
     ·受氧化还原系统调节的玉米CHLI的酶活分析第34-35页
   ·叶绿体氧化还原系统对玉米GSAT的调节效应分析第35-36页
4 讨论第36-38页
   ·利用组氨酸标签便于分离氧化还原系统组分蛋白和靶蛋白第36页
   ·对照系统中使用拟南芥NTR调节玉米Trx第36页
   ·Trx介导的氧化还原系统调节的靶蛋白研究第36-38页
5 结论第38-39页
参考文献第39-44页
致谢第44-45页
附录第45-46页
个人简介第46页

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