| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1. 脑多头蚴病的研究进展 | 第9-15页 |
| ·流行病学 | 第9页 |
| ·生物学 | 第9-10页 |
| ·多头带绦虫虫卵特性 | 第9-10页 |
| ·脑多头蚴细胞系研究 | 第10页 |
| ·脑多头蚴包囊特征及寄生部位 | 第10页 |
| ·病理作用与临床症状 | 第10-11页 |
| ·脑多头蚴诊断方法研究 | 第11-13页 |
| ·脑多头蚴保护疫苗研究 | 第13-14页 |
| ·脑多头蚴病的治疗 | 第14-15页 |
| 2. 寄生虫脂肪酸结合蛋白(FABP)研究进展 | 第15-16页 |
| ·脂肪酸结合蛋白 | 第15页 |
| ·脂肪酸结合蛋白与寄生虫 | 第15页 |
| ·脂肪酸结合蛋白在寄生虫上的应用 | 第15-16页 |
| 3. 寄生虫热休克蛋白(HSPs)研究进展 | 第16-21页 |
| ·热休克蛋白(HSPs) | 第16-17页 |
| ·寄生虫热休克蛋白 | 第17-18页 |
| ·热休克抗原在寄生虫上的应用 | 第18-21页 |
| 第二章 山羊脑多头蚴Tm-FABP基因的克隆、原核表达及免疫组化研究 | 第21-51页 |
| 1. 材料与方法 | 第21-36页 |
| ·试验材料 | 第21-24页 |
| ·试验样品 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·培养基和常用溶液的配制 | 第22-24页 |
| ·主要生物信息学数据库和计算机软件 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-36页 |
| ·脑多头蚴原头蚴总RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·引物设计及合成 | 第25页 |
| ·Tm-FABP基因的RT-PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·PCR产物的回收 | 第26-27页 |
| ·目的基因的连接和转化 | 第27页 |
| ·转化菌的PCR鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组质粒提取 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第29页 |
| ·pET-32a-Tm-FABP载体构建和鉴定 | 第29-31页 |
| ·表达引物的设计 | 第29页 |
| ·表达基因的克隆 | 第29页 |
| ·表达基因的T/A克隆 | 第29页 |
| ·表达基因TA克隆质粒的提取与酶切 | 第29-30页 |
| ·pET-32a(+)质粒的提取与酶切 | 第30页 |
| ·pET32a-Tm-FABP重组表达质粒的构建 | 第30页 |
| ·阳性克隆菌的PCR鉴定 | 第30页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第31页 |
| ·重组pET32-Tm-FABP质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第31-34页 |
| ·重组质粒转化E.coli BL21(DE3) | 第31页 |
| ·IPTG初步诱导表达 | 第31-32页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第32-33页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·目的蛋白的免疫印迹(Western-blot)检测 | 第34-35页 |
| ·兔Tm-FABP-IgG的制备 | 第35页 |
| ·Tm-FABP免疫组化步骤 | 第35-36页 |
| 2. 试验结果 | 第36-48页 |
| ·多带绦虫六钩蚴Tm-FABP基因的克隆 | 第36-40页 |
| ·原头蚴Tm-FABP基因的PCR扩增 | 第36页 |
| ·重组克隆质粒的PCR鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组克隆质粒的序列鉴定 | 第37页 |
| ·重组克隆质粒的序列分析 | 第37页 |
| ·Tm-FABP基因片断的蛋白质生物信息学分析 | 第37-40页 |
| ·Tm-FABP全基因的碱基组成分析 | 第37-38页 |
| ·氨基酸翻译和蛋白质组分分析 | 第38页 |
| ·重组Tm-FABP的信号肽位点预测 | 第38-39页 |
| ·氨基酸序列分析及结构预测及疏水性分析 | 第39-40页 |
| ·Tm-FABP基因的亚克隆 | 第40-41页 |
| ·加酶切位点引物的PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·重组质粒的PCR与酶切鉴定 | 第41页 |
| ·Tm-FABP基因重组表达质粒的构建与鉴定 | 第41-42页 |
| ·重组表达质粒的双酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·重组表达质粒的诱导表达 | 第42-43页 |
| ·重组质粒表达条件的优化 | 第43-45页 |
| ·IPTG浓度的优化 | 第43-44页 |
| ·诱导时间的优化 | 第44页 |
| ·诱导温度的优化 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第45页 |
| ·融合蛋白表达产物Western-Blotting检测 | 第45-46页 |
| ·Tm-FABP蛋白的特异性表达定位 | 第46-48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| 第三章 脑多头购HSP基因的克隆、原核表达及胶体金渗滤法（DIGFA)的建立 | 第51-67页 |
| 1. 材料与方法 | 第51-53页 |
| · | 第51页 |
| ·试验材料 | 第51页 |
| ·血清 | 第51页 |
| ·试验方法 | 第51-53页 |
| ·脑多头蚴总RNA的提取 | 第51页 |
| ·脑多头蚴HSP基因的RT-PCR扩增 | 第51-52页 |
| ·pET-32a-Tm-HSP重组质粒的构建及鉴定 | 第52页 |
| ·pET-32a-HSP重组质粒在大肠杆菌中的表达与鉴定 | 第52页 |
| ·免疫金标渗滤法(DIGFA)的建立 | 第52-53页 |
| 2. 试验结果 | 第53-65页 |
| ·多带绦虫原头蚴Tm-HSP基因的克隆 | 第53-58页 |
| ·原头蚴Tm-HSP基因的PCR扩增 | 第53页 |
| ·重组克隆质粒的PCR鉴定 | 第53-54页 |
| ·重组克隆质粒的序列鉴定 | 第54页 |
| ·重组克隆质粒的序列分析 | 第54-55页 |
| ·Tm-HSP基因片断的蛋白质生物信息学分析 | 第55-58页 |
| ·Tm-HSP全基因的碱基组成分析 | 第55页 |
| ·氨基酸翻译和蛋白质组分分析 | 第55-56页 |
| ·重组Tm-HSP的信号肽位点预测 | 第56页 |
| ·氨基酸序列分析及结构预测及疏水性分析 | 第56-58页 |
| ·Tm-HSP基因的亚克隆 | 第58-59页 |
| ·加酶切位点引物的PCR扩增 | 第58页 |
| ·重组质粒的PCR与酶切鉴定 | 第58-59页 |
| ·Tm-HSP基因重组表达质粒的构建与鉴定 | 第59-60页 |
| ·重组表达质粒的双酶切鉴定 | 第59-60页 |
| ·重组表达质粒的诱导表达 | 第60-61页 |
| ·重组质粒表达条件的优化 | 第61-63页 |
| ·IPTG浓度的优化 | 第61-62页 |
| ·诱导时间的优化 | 第62页 |
| ·诱导温度的优化 | 第62-63页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第63页 |
| ·融合蛋白表达产物Western-Blotting检测 | 第63-64页 |
| ·免疫胶体金渗滤结果(DIGFA) | 第64-65页 |
| ·DIGFA与ELISA比较检测 | 第65页 |
| 3 讨论 | 第65-67页 |
| 第四章 结论和创新点 | 第67-68页 |
| 1. 结论 | 第67页 |
| 2. 创新点 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第76页 |
