| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1 弹性蛋白酶的性质 | 第10-11页 |
| ·弹性蛋白酶的物理性质 | 第10页 |
| ·弹性蛋白酶的化学性质 | 第10-11页 |
| 2 弹性蛋白酶降解弹性蛋白的机理 | 第11-12页 |
| ·弹性蛋白的结构 | 第11页 |
| ·作用机理 | 第11-12页 |
| 3 弹性蛋白酶的来源 | 第12-15页 |
| ·人源的弹性蛋白酶 | 第12页 |
| ·动物来源的弹性蛋白酶 | 第12-13页 |
| ·微生物来源的弹性蛋白酶 | 第13-14页 |
| ·弹性蛋白酶的基因工程 | 第14-15页 |
| ·弹性蛋白酶的蛋白质工程 | 第15页 |
| 4 微生物来源的弹性蛋白酶的纯化及性质鉴定 | 第15-16页 |
| ·弹性蛋白酶的纯化 | 第15页 |
| ·酶学性质 | 第15-16页 |
| 5 弹性蛋白酶的应用 | 第16-18页 |
| ·在食品工业上的应用 | 第16-17页 |
| ·在医药工业上的应用 | 第17页 |
| ·在日用化工方面的应用 | 第17页 |
| ·在环境保护方面的作用 | 第17-18页 |
| 6 问题及展望 | 第18页 |
| 7 研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 产弹性蛋白酶菌种的鉴定 | 第19-30页 |
| 1 材料与方法 | 第19-23页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·实验材料来源 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·主要药品与试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-23页 |
| ·细菌形态学观察 | 第20页 |
| ·菌种生理生化鉴定 | 第20页 |
| ·16S rDNA序列扩增 | 第20-21页 |
| ·目的片段与T载体的连接 | 第21页 |
| ·转化 | 第21-22页 |
| ·阳性克隆菌株的筛选及序列分析 | 第22页 |
| ·弹性蛋白酶酶活测定 | 第22-23页 |
| ·粗酶液制备 | 第23页 |
| 2 结果 | 第23-28页 |
| ·形态学鉴定 | 第23-24页 |
| ·生理生化培养特性 | 第24-26页 |
| ·16S rDNA序列分析 | 第26-27页 |
| ·酶活测定 | 第27-28页 |
| 3 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 弹性蛋白酶的分离纯化及酶学性质分析 | 第30-45页 |
| 1 材料 | 第30-31页 |
| ·菌株 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30页 |
| ·主要药品与试剂 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| 2 方法 | 第31-34页 |
| ·弹性蛋白酶的纯化 | 第31-33页 |
| ·粗酶液的制备 | 第31页 |
| ·硫酸铵分级沉淀饱和度的确定 | 第31页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第31-32页 |
| ·Q sepharose fast flow强阴离子交换层析 | 第32页 |
| ·Sephadex G-75分子筛层析 | 第32页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE | 第32-33页 |
| ·酶学性质分析 | 第33-34页 |
| ·最适反应温度的确定 | 第33页 |
| ·热稳定性的研究 | 第33页 |
| ·最适反应pH的确定 | 第33页 |
| ·酸碱稳定性的研究 | 第33页 |
| ·化学物质对酶活的影响 | 第33-34页 |
| ·纯化的弹性蛋白酶与木瓜蛋白酶对不同蛋白质水解力的比较 | 第34页 |
| ·弹性蛋白酶对弹性蛋白的吸附作用 | 第34页 |
| ·弹性蛋白酶对弹性蛋白的优先水解作用 | 第34页 |
| ·弹性蛋白酶与木瓜蛋白酶对不同蛋白质的水解作用 | 第34页 |
| 3 结果分析 | 第34-42页 |
| ·弹性蛋白酶的纯化 | 第34-37页 |
| ·硫酸铵分级沉淀最适饱和度的确定 | 第34-35页 |
| ·Q sepharose fast flow强阴离子交换层析 | 第35-36页 |
| ·Sephadex G-75分子筛层析 | 第36页 |
| ·SDS-PAGE | 第36-37页 |
| ·纯化效果评价 | 第37页 |
| ·酶学性质分析 | 第37-42页 |
| ·最适反应温度的测定 | 第37-38页 |
| ·热稳定性的测定 | 第38页 |
| ·最适反应pH的测定 | 第38-39页 |
| ·酸碱稳定性的测定 | 第39页 |
| ·不同化学物质对酶活的影响 | 第39-40页 |
| ·菌源性弹性蛋白酶对弹性蛋白的吸附作用 | 第40-41页 |
| ·菌源性弹性蛋白酶对弹性蛋白的优先水解 | 第41页 |
| ·菌源性弹性蛋白酶与木瓜蛋白酶对不同蛋白质的水解作用 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| ·蛋白质的分离纯化 | 第42-43页 |
| ·酶学性质 | 第43-44页 |
| ·弹性蛋白酶的蛋白降解力 | 第44-45页 |
| 第四章 结论与展望 | 第45-46页 |
| 1 主要结论 | 第45页 |
| 2 后续研究展望 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
