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水稻多逆境诱导基因OsMsr12、OsPP2Cl、OsTMP14的克隆及OsTMP14基因功能分析

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 文献综述第11-21页
   ·逆境对植物影响及抗逆分子机制研究进展第11-17页
     ·非生物逆境对植物的影响第12-13页
     ·植物体内非生物逆境胁迫信号转导第13-16页
     ·植物基因工程提高植物的抗逆性第16-17页
   ·OsMsr12蛋白及其与植物耐逆性的关系第17-18页
   ·PP2C蛋白及其与植物耐逆性的关系第18-19页
   ·光合系统Ⅰ核心蛋白及其与植物耐逆性的关系第19-21页
     ·光合系统Ⅰ核心蛋白及作用第19页
     ·PSI与植物耐逆性的关系第19-20页
     ·植物中TMP14蛋白的研究第20-21页
   ·本研究的意义第21页
第二章 材料与方法第21-36页
   ·材料第21-25页
     ·植物材料第21页
     ·菌株与质粒载体第21-23页
     ·培养基第23-24页
     ·常用试剂第24-25页
     ·主要实验仪器第25页
   ·实验方法第25-30页
     ·基因芯片分析第25-26页
     ·定量实时PCR分析第26页
     ·培矮64s的总RNA反转录第26-27页
     ·PCR体外扩增目的基因的cDNA第27页
     ·目的基因片段的琼脂糖凝胶电泳分离、回收与纯化第27-28页
     ·连接酶连接目的基因片段与克隆载体的连接反应第28页
     ·大肠杆菌TOP10感受态细胞制备(CaCl_2法)及连接产物转化第28-29页
     ·阳性克隆的筛选及鉴定第29-30页
   ·基因序列分析及可能的启动子区域顺式作用元件分析第30页
   ·pCAMBIA1300-OsTMP14和OsMsr12植物表达载体构建第30-32页
     ·pCAMBIA1300-OsTMP14和OsMsr12中间载体构建第30-31页
     ·pCAMBIA1300-OsTMP14和OsMsr12表达载体构建第31-32页
   ·pCAMBIA1300-OsTMP14和OsMsr12表达载体转化农杆菌EHA105第32-33页
     ·农杆菌EHA105感受态细胞制备及转化(CaCl_2法)第32-33页
     ·EHA105转化子鉴定第33页
   ·水稻93-11的遗传转化第33-36页
     ·水稻93-11成熟种子愈伤组织诱导第33-34页
     ·愈伤组织继代培养第34页
     ·农杆菌EHA105介导的愈伤组织转化第34-35页
     ·分化培养第35页
     ·生根培养第35页
     ·炼苗与移栽第35页
     ·转基因植株鉴定第35-36页
第三章 结果与分析第36-61页
   ·OsMsr12基因cDNA的克隆和序列分析第36-43页
     ·OsMsr12在逆境下的表达水平分沂第36-37页
     ·OsMsr12基因cDNA的克隆第37-38页
     ·O.sMsr12基因表达载体构建及重组子转化第38-39页
     ·OsMsr12基因DNA序列分析第39-40页
     ·OsMsr12结构分析第40-43页
   ·OsPP2Cl基因的表达、克隆及功能分析第43-52页
     ·逆境条件下OsPP2Cl的表达水平第43-44页
     ·OsPP2Cl基因的克隆及结构分析第44-47页
     ·OsPP2Cl基因启动子区域顺式作用元件预测第47-48页
     ·PP2C蛋白在水稻和其他物种中的进化分析第48-52页
   ·OsTMP14基因的表达、克隆及功能分析第52-61页
     ·OsTMP14基因在逆境下的表达分析第52-54页
     ·OsTMP14基因的结构及功能预测第54-57页
     ·重组质粒阳性克隆鉴定第57-58页
     ·测序结果比对第58-59页
     ·籼稻93-11转基因体系的建立第59页
     ·水稻总DNA提取第59-60页
     ·PCR鉴定阳性植株第60页
     ·转基因水稻表型观察第60-61页
第四章 讨论和结论第61-66页
   ·OsMsr12基因功能的讨论第61-62页
   ·OsPP2Cl基因功能的讨论第62-63页
   ·OsTMP14基因功能的讨论第63-64页
   ·主要结论第64-66页
参考文献第66-78页
致谢第78-79页
攻读学位期间发表的学术论文目录第79-80页
作者简介第80页

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