摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-26页 |
1. 钙调素结合蛋白 | 第10-20页 |
·钙调素结合蛋白的结构特征 | 第10-14页 |
·植物钙调素结合蛋白的功能 | 第14-20页 |
·参与植物生长发育 | 第14-15页 |
·参与生物逆境应答 | 第15-16页 |
·参与非生物逆境应答 | 第16-20页 |
2. 脯氨酰寡肽酶家族 | 第20-25页 |
·POP(PROLYL OLIGOPEPTIDASE)家族 | 第20-21页 |
·POP家族的结构特征 | 第21-25页 |
·B-推进器 | 第21-22页 |
·a/β水解酶结构域 | 第22-24页 |
·脯氨酰寡肽酶家族结构特征 | 第24-25页 |
3. 本研究的目的与意义 | 第25-26页 |
第二章 OSCAMBP互作蛋白的筛选 | 第26-34页 |
1. 材料与方法 | 第26-31页 |
·菌株与质粒 | 第26-27页 |
·cDNA文库 | 第27页 |
·主要培养基 | 第27页 |
·主要试剂和仪器 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-31页 |
·pGBKT7::OsCaMBP诱饵质粒的构建 | 第28-30页 |
·酵母双杂交筛选 | 第30-31页 |
2 结果与分析 | 第31-34页 |
·PGBKT7::OSCAMBP诱饵质粒的构建 | 第31-32页 |
·PGBKT7::OSCAMBP转录活性检测和毒性检测 | 第32页 |
·酵母双杂交筛选OSCAMBP的互作蛋白 | 第32-33页 |
·基因测序与分析 | 第33-34页 |
第三章 OSPOP5基因的克隆及功能研究 | 第34-48页 |
1. 材料与方法 | 第34-43页 |
·植物材料、菌株与质粒 | 第34页 |
·主要试剂和仪器 | 第34-35页 |
·主要培养基 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-43页 |
·材料处理 | 第35-36页 |
·水稻总RNA提取及纯化 | 第36-37页 |
·逆转录cDNA | 第37页 |
·OsPOP5基因的克隆 | 第37-41页 |
·半定量RT-PCR | 第41-42页 |
·融合蛋白表达 | 第42-43页 |
2 结果与分析 | 第43-48页 |
·OSPOP5的克隆和生物信息学分析 | 第43-45页 |
·目的基因的扩增 | 第43页 |
·OsPOP5核酸序列分析 | 第43-44页 |
·OsPOP5氨基酸序列分析 | 第44页 |
·OsPOP5在不同时期水稻器官表达分析 | 第44-45页 |
·OSPOP5表达分析 | 第45-47页 |
·融合蛋白的表达 | 第47-48页 |
第四章 OSPOP5转基因载体的构建及转化 | 第48-64页 |
1. 材料与方法 | 第48-58页 |
·植物材料、菌株和载体 | 第48-49页 |
·主要试剂和仪器 | 第49-50页 |
·主要培养基 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-58页 |
·pCAMBIA 1301:;OsPOP5超表达载体及反义载体的构建 | 第50-53页 |
·pCAMBIA1300::OsPOP5-GFP载体的构建 | 第53-54页 |
·构建好的转基因载体转化农杆菌 | 第54-55页 |
·水稻成熟胚愈伤组织的诱导和继代 | 第55页 |
·浸染菌液准备 | 第55-56页 |
·农杆菌浸染 | 第56页 |
·分化与生根 | 第56页 |
·转基因水稻的阳性检测 | 第56-58页 |
2. 结果与分析 | 第58-64页 |
·PCAMBIA 1301::OSPOP5超表达载体及反义载体的构建 | 第58-59页 |
·PCAMBIA1300::OsPOP5-GFP载体的构建 | 第59-60页 |
·转基因植株的获得 | 第60-61页 |
·转基因水稻的检测 | 第61-64页 |
·快速检测转基因水稻的潮霉素抗性 | 第61-62页 |
·PCR法检测转基因水稻的潮霉素抗性 | 第62-63页 |
·PCR法检测转基因水稻阳性植株 | 第63-64页 |
第五章 总结和讨论 | 第64-67页 |
1. OSCAMBP概述 | 第64页 |
2. OSPOP5功能的初步分析 | 第64-66页 |
3. 展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
致谢 | 第75页 |