摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-19页 |
·艾滋病及其病原的概述 | 第12-13页 |
·抗 HIV-1中和性抗体 | 第13-15页 |
·针对 gp41 的单克隆抗体 | 第13页 |
·针对 gp120的单克隆抗体 | 第13-15页 |
·表达系统 | 第15-17页 |
·大肠杆菌表达系统 | 第15页 |
·酵母表达系统 | 第15页 |
·植物表达系统 | 第15-16页 |
·杆状病毒/昆虫细胞表达系统 | 第16-17页 |
·哺乳动物细胞表达系统 | 第17页 |
·本论文研究的目的及意义 | 第17-19页 |
第二章 HIV-1中和性抗体 B12和 VRC01全长基因的合成与克隆 | 第19-38页 |
·材料 | 第19页 |
·载体与菌株 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19页 |
·方法 | 第19-33页 |
·引物设计 | 第19-21页 |
·抗体 B12和 VRC01轻链(B12L 和 VRC01L)基因的合成与克隆 | 第21-27页 |
·抗体 B12重链(B12H)基因的合成与克隆 | 第27-32页 |
·抗体 VRC01重链(VRC01H)基因的合成与克隆 | 第32-33页 |
·结果与分析 | 第33-37页 |
·B12L 基因的 PCR 扩增结果 | 第33页 |
·VRC01L 基因的 PCR 扩增结果 | 第33-34页 |
·B12H 基因的 PCR 扩增结果 | 第34页 |
·VRC01H 基因的 PCR 扩增结果 | 第34-35页 |
·重组质粒 B12L-pTriEx1.1和 VRC01L-pTriEx1.1的双酶切鉴定结果 | 第35页 |
·重组质粒 HC-pTriEx1.1的双酶切鉴定结果 | 第35-36页 |
·重组质粒 B12H-pTriEx1.1和 VRC01H-pTriEx1.1的双酶切鉴定结果 | 第36-37页 |
·小结 | 第37-38页 |
第三章 抗体 B12和 VRC01在杆状病毒/昆虫细胞表达系统中表达 | 第38-47页 |
·材料 | 第38-40页 |
·载体、病毒和细胞系 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38-40页 |
·主要仪器 | 第40页 |
·方法 | 第40-42页 |
·Sf9昆虫细胞的复苏与培养 | 第40页 |
·重组质粒与 Bacmid 共转染 | 第40页 |
·重组病毒的收获 | 第40页 |
·轻、重链重组杆状病毒共同感染 Sf9昆虫细胞 | 第40页 |
·真核表达的全抗体的收获 | 第40-41页 |
·Western blot 检测真核表达产物 | 第41-42页 |
·ELISA 检测真核表达的全抗体 B12和 VRC01 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-46页 |
·抗体轻链重组病毒(rAc-VRC01L/rAc-B12L) 感染 Sf9细胞表达产物的 Western blot 检测 | 第42-43页 |
·抗体重链重组病毒(rAc-VRC01H)感染 Sf9细胞的表达产物的 Western blot 检测 | 第43-44页 |
·重组轻链病毒和重组重链病毒混合感染 Sf9细胞的表达产物的 Western blot 检测 | 第44-45页 |
·ELISA 检测真核表达的全抗体 B12和 VRC01 | 第45-46页 |
·小结 | 第46-47页 |
第四章 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
附录 | 第53-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |