摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
第二章 异育银鲫 GDF9 与 BMP15 基因的克隆及其序列分析 | 第19-35页 |
1 材料与方法 | 第19-24页 |
·试验材料 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19-20页 |
·相关引物 | 第20页 |
·总 RNA 的提取 | 第20-21页 |
·基因组 DNA 的提取 | 第21页 |
·RT–PCR 扩增 GDF9 与 BMP15 基因的部分片段 | 第21-22页 |
·cDNA 末端快速克隆(RACE 反应) | 第22-23页 |
·PCR 产物的克隆及鉴定 | 第23-24页 |
2 结果与分析 | 第24-33页 |
·异育银鲫 GDF9 基因组全长 DNA 的克隆及生物信息学分析 | 第24-29页 |
·异育银鲫 BMP15 基因全长 cDNA 的克隆及生物信息学分析 | 第29页 |
·异育银鲫 GDF9 与 BMP15 氨基酸同源性分析与系统进化树的构建 | 第29-33页 |
3 讨论 | 第33-35页 |
第三章 异育银鲫 GDF9 与 BMP15 基因的表达模式及其功能初探 | 第35-45页 |
1 材料与方法 | 第35-38页 |
·试验材料 | 第35页 |
·主要试剂 | 第35-36页 |
·主要仪器 | 第36页 |
·相关引物 | 第36页 |
·总 RNA 的提取 | 第36页 |
·实时荧光定量 PCR 法检测 GDF9 与 BMP15 mRNA 时空表达模式 | 第36-37页 |
·免疫组织化学定位 GDF9 与 BMP15 蛋白 | 第37页 |
·卵细胞的分离、培养与固定 | 第37-38页 |
·卵母细胞与滤泡细胞的分离 | 第38页 |
·数据的统计处理 | 第38页 |
2 结果与分析 | 第38-42页 |
·GDF9 与 BMP15 在异育银鲫中的时空表达模式 | 第38-41页 |
·GDF9 与 BMP15 蛋白在异育银鲫卵细胞中的定位 | 第41页 |
·hCG 对 GDF9 与 BMP15 基因表达的影响 | 第41-42页 |
3 讨论 | 第42-45页 |
第四章 异育银鲫 GDF9 与 BMP15Ⅰ型与Ⅱ型受体基因的克隆及其表达模式 | 第45-57页 |
1 材料与方法 | 第45-48页 |
·试验材料 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45页 |
·相关引物 | 第45-46页 |
·总 RNA 的提取 | 第46页 |
·RT–PCR 扩增 GDF9 与 BMP15Ⅰ型与Ⅱ型受体基因的部分片段 | 第46页 |
·PCR 产物的克隆及鉴定 | 第46页 |
·半定量 RT–PCR 法测定 GDF9 与 BMP15Ⅰ型与Ⅱ型受体基因在各组织中的表达模式 | 第46-47页 |
·Real–Time 实时荧光定量 PCR 法检测 GDF9 与 BMP15Ⅰ型与Ⅱ型受体基因在各期卵细胞中的表达模式 | 第47-48页 |
2 结果与分析 | 第48-55页 |
·异育银鲫 GDF9 与 BMP15Ⅰ型与Ⅱ型受体基因的克隆及其序列分析 | 第48-52页 |
·异育银鲫 GDF9 与 BMP15Ⅰ型与Ⅱ型受体基因的时空表达模式 | 第52-55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
小结 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
附:攻读硕士学位期间发表或在投论文情况 | 第65页 |