| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-29页 |
| ·谷氨酰胺转胺酶的概述 | 第9-16页 |
| ·谷氨酰胺转胺酶的结构、作用及性质 | 第9-12页 |
| ·谷氨酰胺转胺酶的分类及应用 | 第12-14页 |
| ·谷氨酰胺转胺酶的研究进展 | 第14-16页 |
| ·MTG 的原核表达 | 第16-21页 |
| ·微生物来源谷氨酰胺转胺酶酶原基因的克隆 | 第17-18页 |
| ·表达载体的的选择 | 第18-19页 |
| ·国内外MTG 原核表达的研究进展 | 第19-21页 |
| ·目的蛋白的包涵体形式表达研究 | 第21-27页 |
| ·包涵体的概述 | 第21-22页 |
| ·包涵体的形成机制 | 第22页 |
| ·包涵体蛋白的特点 | 第22-23页 |
| ·包涵体蛋白的研究方法 | 第23-26页 |
| ·包涵体表达形式的优越性 | 第26-27页 |
| ·重组酶的研究策略 | 第27页 |
| ·本文构想 | 第27-29页 |
| 第二章 重组谷氨酰胺转胺酶基因表达载体构建 | 第29-40页 |
| ·前言 | 第29-31页 |
| ·MTG 的发酵生产 | 第29页 |
| ·选择合适的表达载体 | 第29-31页 |
| ·实验部分 | 第31-39页 |
| ·材料与方法 | 第31-32页 |
| ·实验步骤 | 第32-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 原核表达条件优化 | 第40-44页 |
| ·前言 | 第40页 |
| ·材料与方法 | 第40-42页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第40页 |
| ·实验步骤 | 第40-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 第四章 重组包涵体蛋白的纯化与体外复性 | 第44-55页 |
| ·引言 | 第44-45页 |
| ·材料与方法 | 第45-50页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45-46页 |
| ·主要溶液 | 第46-47页 |
| ·实验步骤 | 第47-50页 |
| ·诱导重组菌体表达目的蛋白 | 第47页 |
| ·包涵体蛋白的提取 | 第47-48页 |
| ·包涵体蛋白的洗涤与溶解 | 第48页 |
| ·包涵体的纯化 | 第48页 |
| ·包涵体蛋白的复性 | 第48-49页 |
| ·根据考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 | 第49页 |
| ·MTG 酶活测定 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-54页 |
| ·重组MTG 的表达分布 | 第50页 |
| ·镍柱纯化重组 MTG 的 SDS-DAGE 结果 | 第50-51页 |
| ·柱上复性重组 MTG 的 SDS-PAGE 结果 | 第51-52页 |
| ·透析复性重组 MTG 的 SDS-PAGE 结果 | 第52页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第52-53页 |
| ·酶活的测定 | 第53-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 第五章 探索重组 MTG 的可溶性表达 | 第55-60页 |
| ·前言 | 第55页 |
| ·材料与方法 | 第55-57页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第56页 |
| ·实验步骤 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-59页 |
| ·乳糖浓度的确定 | 第57-58页 |
| ·乳糖诱导时间的确定 | 第58页 |
| ·低温诱导 | 第58-59页 |
| ·本章小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 附录 A | 第67-68页 |
| 附录 B | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第70页 |
