摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
·猪瘟病毒概述 | 第12页 |
·猪瘟病毒的致病机理和持续性感染机制 | 第12-13页 |
·MHC Ⅱ类反式激活因子及其结构 | 第13-15页 |
·人的CⅡTA及其结构 | 第13-15页 |
·猪的CⅡTA及其结构 | 第15页 |
·IFN-γ诱导CⅡTA基因表达以及随后的MHC Ⅱ基因表达的机制 | 第15-18页 |
·CⅡTA与细菌感染的相互关系 | 第18页 |
·CⅡTA与病毒感染之间的相互关系 | 第18-21页 |
·病毒阻断IFN-γ与细胞膜上的IFN-γ受体结合 | 第18页 |
·病毒干扰JAK-STAT信号传导途径 | 第18-19页 |
·病毒干扰CⅡTA对MHC Ⅱ类基因表达的反式激活作用 | 第19-20页 |
·CⅡTA分子与病毒复制的相互关系 | 第20-21页 |
·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 材料和方法 | 第22-42页 |
·实验材料 | 第22-26页 |
·主要仪器和设备 | 第22页 |
·猪血样品、所需载体、细胞、病毒和实验动物 | 第22页 |
·实验试剂 | 第22-26页 |
·实验方法 | 第26-42页 |
·技术路线 | 第26-27页 |
·本研究所用引物 | 第27页 |
·CⅡTA基因的克隆和序列分析 | 第27-30页 |
·PET-CⅡTA4-C原核表达载体的构建 | 第30-32页 |
·抗CⅡTA4蛋白多克隆抗体的制备 | 第32-37页 |
·PCDNA3.0-GFP-CⅡTA4真核表达载体的构建 | 第37-39页 |
·PCDNA3.0-GFP-CⅡTA4真核表达载体在PK-15细胞上的表达 | 第39-40页 |
·CⅡTA4蛋白的表达与猪瘟病毒感染的关系 | 第40-42页 |
第三章 实验结果 | 第42-65页 |
·猪CⅡTA基因的克隆和序列分析 | 第42-53页 |
·猪CⅡTA基因的克隆 | 第42-46页 |
·猪CⅡTA基因的序列分析 | 第46-53页 |
·猪CⅡTA基因原核表达载体的构建 | 第53-54页 |
·抗CⅡTA4蛋白多克隆抗体的制备 | 第54-59页 |
·PET-CⅡTA4-C原核表达载体在大肠杆菌BL-21中的表达 | 第54-55页 |
·重组蛋白CⅡTA4-C表达形式的鉴定 | 第55-56页 |
·重组蛋白CⅡTA4-C的Western-blot鉴定 | 第56-57页 |
·重组蛋白CⅡTA4-C的纯化 | 第57-58页 |
·抗CⅡTA4蛋白的多克隆抗体与重组蛋白CⅡTA4-C的反应 | 第58-59页 |
·猪CⅡA基因真核表达载体的构建 | 第59-60页 |
·PCDNA3.0-GFP-CⅡTA4真核表达载体在PK-15细胞上的表达 | 第60-61页 |
·抗CⅡTA蛋白的多克隆抗体与CⅡTA4蛋白的反应和抗体效价测定 | 第61-62页 |
·CⅡTA4蛋白的表达与猪瘟病毒感染的相互关系 | 第62-65页 |
第四章 讨论 | 第65-70页 |
·CⅡTA基因前体mRNA的选择性剪切 | 第65-66页 |
·PET-CⅡTA4-C原核表达载体的构建和CⅡTA4-C重组蛋白的表达、纯化和复性 | 第66-68页 |
·抗CⅡTA蛋白多克隆抗体反应性和抗体效价 | 第68页 |
·CⅡTA4蛋白的表达与猪瘟病毒感染的关系 | 第68-70页 |
第五章 结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
致谢 | 第76页 |