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猪MHC Ⅱ类反式激活因子CIITA基因2个突变体的鉴定及其多克隆抗体的制备

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-22页
   ·猪瘟病毒概述第12页
   ·猪瘟病毒的致病机理和持续性感染机制第12-13页
   ·MHC Ⅱ类反式激活因子及其结构第13-15页
     ·人的CⅡTA及其结构第13-15页
     ·猪的CⅡTA及其结构第15页
   ·IFN-γ诱导CⅡTA基因表达以及随后的MHC Ⅱ基因表达的机制第15-18页
   ·CⅡTA与细菌感染的相互关系第18页
   ·CⅡTA与病毒感染之间的相互关系第18-21页
     ·病毒阻断IFN-γ与细胞膜上的IFN-γ受体结合第18页
     ·病毒干扰JAK-STAT信号传导途径第18-19页
     ·病毒干扰CⅡTA对MHC Ⅱ类基因表达的反式激活作用第19-20页
     ·CⅡTA分子与病毒复制的相互关系第20-21页
   ·本研究的目的和意义第21-22页
第二章 材料和方法第22-42页
   ·实验材料第22-26页
     ·主要仪器和设备第22页
     ·猪血样品、所需载体、细胞、病毒和实验动物第22页
     ·实验试剂第22-26页
   ·实验方法第26-42页
     ·技术路线第26-27页
     ·本研究所用引物第27页
     ·CⅡTA基因的克隆和序列分析第27-30页
     ·PET-CⅡTA4-C原核表达载体的构建第30-32页
     ·抗CⅡTA4蛋白多克隆抗体的制备第32-37页
     ·PCDNA3.0-GFP-CⅡTA4真核表达载体的构建第37-39页
     ·PCDNA3.0-GFP-CⅡTA4真核表达载体在PK-15细胞上的表达第39-40页
     ·CⅡTA4蛋白的表达与猪瘟病毒感染的关系第40-42页
第三章 实验结果第42-65页
   ·猪CⅡTA基因的克隆和序列分析第42-53页
     ·猪CⅡTA基因的克隆第42-46页
     ·猪CⅡTA基因的序列分析第46-53页
   ·猪CⅡTA基因原核表达载体的构建第53-54页
   ·抗CⅡTA4蛋白多克隆抗体的制备第54-59页
     ·PET-CⅡTA4-C原核表达载体在大肠杆菌BL-21中的表达第54-55页
     ·重组蛋白CⅡTA4-C表达形式的鉴定第55-56页
     ·重组蛋白CⅡTA4-C的Western-blot鉴定第56-57页
     ·重组蛋白CⅡTA4-C的纯化第57-58页
     ·抗CⅡTA4蛋白的多克隆抗体与重组蛋白CⅡTA4-C的反应第58-59页
   ·猪CⅡA基因真核表达载体的构建第59-60页
   ·PCDNA3.0-GFP-CⅡTA4真核表达载体在PK-15细胞上的表达第60-61页
   ·抗CⅡTA蛋白的多克隆抗体与CⅡTA4蛋白的反应和抗体效价测定第61-62页
   ·CⅡTA4蛋白的表达与猪瘟病毒感染的相互关系第62-65页
第四章 讨论第65-70页
   ·CⅡTA基因前体mRNA的选择性剪切第65-66页
   ·PET-CⅡTA4-C原核表达载体的构建和CⅡTA4-C重组蛋白的表达、纯化和复性第66-68页
   ·抗CⅡTA蛋白多克隆抗体反应性和抗体效价第68页
   ·CⅡTA4蛋白的表达与猪瘟病毒感染的关系第68-70页
第五章 结论第70-71页
参考文献第71-76页
致谢第76页

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