摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-30页 |
·多能性基因概述 | 第13-20页 |
·多能性与多能性基因 | 第13-14页 |
·多能性基因与多能性调控 | 第14-17页 |
·多能性基因与细胞重编程 | 第17-20页 |
·猪诱导多能性干细胞研究进展 | 第20-25页 |
·关键多能性基因的作用 | 第25-29页 |
·Nanog基因与多能性 | 第25-26页 |
·Nr5a2基因与多能性 | 第26-27页 |
·Tcll与多能性 | 第27-28页 |
·Eras与多能性 | 第28-29页 |
·本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-51页 |
·实验材料 | 第30-35页 |
·实验动物 | 第30页 |
·主要仪器与设备 | 第30-31页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第31页 |
·常用试剂及配制 | 第31-35页 |
·主要的生物信息学网站及分析软件 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-51页 |
·组织与胚胎样本收集和保存 | 第35-36页 |
·RNA提取 | 第36-40页 |
·基因克隆 | 第40-46页 |
·感受态细胞的制备与转化 | 第46-47页 |
·质粒提取 | 第47-48页 |
·逆转录病毒表达载体构建 | 第48页 |
·猪胎儿成纤维细胞培养、感染 | 第48-50页 |
·免疫荧光鉴定 | 第50页 |
·生长曲线测定 | 第50页 |
·Realtime-PCR检测过表达Oct4后相关基因表达 | 第50-51页 |
3 结果与分析 | 第51-93页 |
·猪源多能基因的克隆与分析鉴定 | 第51-84页 |
·猪Oct4基因的克隆与生物信息学分析 | 第51-55页 |
·猪Sox2基因的克隆与生物信息学分析 | 第55-60页 |
·猪Klf4基因的克隆与生物信息学分析 | 第60-65页 |
·猪c-Myc基因的克隆与生物信息学分析 | 第65-70页 |
·猪Nanog基因的克隆与生物信息学分析 | 第70-75页 |
·猪Nr5a2基因的克隆与生物信息学分析 | 第75-80页 |
·猪Tcll基因的克隆与生物信息学分析 | 第80-82页 |
·猪Eras基因的克隆与生物信息学分析 | 第82-84页 |
·猪Oct4基因重编程功能的研究 | 第84-93页 |
4 讨论 | 第93-99页 |
·克隆猪多能性基因模板的选择 | 第93页 |
·猪Nr5a2基因的克隆及表达分析 | 第93-94页 |
·猪多能基因结构分析 | 第94页 |
·猪Oct4基因的克隆及序列分析 | 第94页 |
·猪Oct4基因过表达逆转录病毒载体过表达水平鉴定 | 第94-95页 |
·猪Oct4基因激活多能基因的表达分析 | 第95页 |
·猪Oct4基因主要通过缩短G1和G2期来提高细胞增殖能力 | 第95-96页 |
·猪Oct4基因对表观遗传修饰基因的影响 | 第96-97页 |
·猪Oct4基因对细胞连接的影响 | 第97-99页 |
5 结论 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
参考文献 | 第101-106页 |
攻读博士期间已发表的论文 | 第106页 |