缩略词表 | 第1-4页 |
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
前言 | 第8-11页 |
第1章 HBV受体BP及AnnexinV基因的克隆与表达载体的构建 | 第11-23页 |
1.材料 | 第13-15页 |
·菌株和载体 | 第13页 |
·生化与分子生物学试剂 | 第13-15页 |
·主要仪器 | 第15页 |
2.方法 | 第15-23页 |
·质粒提取 | 第15-17页 |
·扩增和鉴定BP和AnnexinV基因用PCR引物的合成与基因测序 | 第17-18页 |
·琼脂糖凝胶电泳分离PCR产物的回收与纯化 | 第18-19页 |
·显微注射用转基因载体的构建 | 第19-23页 |
第2章 表达AnnexinV和BP易感小鼠模型的建立 | 第23-45页 |
1.材料 | 第24-27页 |
·表达基因载体质粒 | 第24页 |
·限制性内切酶等相关试剂 | 第24-25页 |
·主要溶液 | 第25-26页 |
·实验动物 | 第26-27页 |
·实验用仪器 | 第27页 |
2.方法 | 第27-41页 |
·制作显微注射片断 | 第27-30页 |
·显微注射转基因小鼠 | 第30-33页 |
·小鼠鼠尾基因组DNA的制备 | 第33-34页 |
·转基因小鼠的各种鉴定 | 第34页 |
·PCAGGS-AnnexinV+BP转基因小鼠的Southern杂交分析 | 第34-37页 |
·小鼠组织总RNA的提取 | 第37页 |
·RNA中微量DNA的去除 | 第37-38页 |
·RT—PCR检测转基因小鼠体内AnnexinV和BP的转录 | 第38-39页 |
·在蛋白水平上检测AnnexinV和BP转基因小鼠肝组织中的表达 | 第39-41页 |
3.结果 | 第41-44页 |
·转基因载体注射片断的准备 | 第41页 |
·转基因载体的显微注射 | 第41-42页 |
·转基因小鼠的基因型鉴定 | 第42-43页 |
·RT—PCR检测转录情况 | 第43-44页 |
4.总结 | 第44-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
攻读硕士学位期间研究成果 | 第51-52页 |