| 摘 要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 縮写词表 | 第8-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-28页 |
| ·低温胁迫和植物的适应性调节 | 第15-20页 |
| ·植物对低温的生理响应 | 第15-17页 |
| ·低温胁迫对植物膜系统的影响 | 第15-16页 |
| ·低温胁迫对植物抗氧化酶系统的影响 | 第16页 |
| ·低温胁迫对植物细胞中渗透调节物质含量的影响 | 第16-17页 |
| ·植物响应低温胁迫的信号传导 | 第17-19页 |
| ·植物响应低温胁迫的转录因子和效应基因表达的调控 | 第19-20页 |
| ·转录后调节在植物响应低温胁迫中发挥重要功能 | 第20页 |
| ·蛋白质组学及其研究方法 | 第20-24页 |
| ·蛋白质组学在植物低温胁迫应答研究中的应用 | 第24-25页 |
| ·高山离子芥研究进展 | 第25-26页 |
| ·立题依据 | 第26-28页 |
| 第二章 高山离子芥低温诱导蛋白的鉴定 | 第28-40页 |
| ·材料与方法 | 第28-30页 |
| ·高山离子芥再生植株的培养 | 第28页 |
| ·高山离子芥低温处理 | 第28页 |
| ·高山离子芥冷适应叶片蛋白的提取及2-D电泳样品的处理 | 第28页 |
| ·2-D电泳 | 第28-29页 |
| ·等点聚焦 | 第28页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第28-29页 |
| ·考马斯亮兰染色 | 第29页 |
| ·2-D胶的表达分析 | 第29页 |
| ·目的蛋白点的挖取和处理 | 第29页 |
| ·MALDI-TOF MS样品处理 | 第29页 |
| ·MALDI-TOF MS和数据查询 | 第29-30页 |
| ·氨基酸序列比对和进化分析 | 第30页 |
| 用DNAstar软件的MegAlign模块进行 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-37页 |
| ·低温处理和对照植株的生长状态 | 第30页 |
| ·2-D电泳图谱和分析 | 第30-33页 |
| ·MALDI-TOF-MS和搜库 | 第33-37页 |
| ·讨论 | 第37-40页 |
| 第三章 高山离子芥富含甘氨酸RNA结合蛋白的基因克隆和功能研究 | 第40-57页 |
| ·材料和方法 | 第40-44页 |
| ·高山离子芥叶片的处理和总RNA的提取 | 第40页 |
| ·高山离子芥冷诱导cDNA文库的建立 | 第40页 |
| ·CbGRP基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·CbGRP基因3'--末端的克隆 | 第40页 |
| ·CbGRP基因5'-末端的克隆 | 第40-41页 |
| ·CbGRP基因全长序列的获得 | 第41页 |
| ·Real-time RT-PCR | 第41页 |
| ·CbGRP蛋白的原核表达及CbGRP蛋白多克隆抗体的制备 | 第41-42页 |
| ·CbGRP蛋白的RNA结合特性的测定 | 第42页 |
| ·CbGRP蛋白表达的组织特异性 | 第42页 |
| ·蛋白质的Western-blot | 第42页 |
| ·CbGRP转基因烟草植株的构建 | 第42-43页 |
| ·pBI121-CbGRP重组质粒的构建 | 第42页 |
| ·pBI121-CbGRP重组质粒转化LBA4404农杆菌 | 第42-43页 |
| ·转化pBI121-CbGRP重组质粒的LBA4404农杆菌转染烟草叶 | 第43页 |
| ·转基因再生植株的鉴定 | 第43页 |
| ·转基因植株基因组PCR鉴定 | 第43页 |
| ·转基因植株表达CbGRP蛋白的Western-blot鉴定 | 第43页 |
| ·转基因烟草植株报告基因的表达分析 | 第43页 |
| ·转基因植株的抗冷冻实验 | 第43页 |
| ·叶片面积的测定 | 第43-44页 |
| ·叶片细胞离子渗漏测定 | 第44页 |
| ·脯氨酸含量的测定 | 第44页 |
| ·丙二醛含量的测定 | 第44页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第44页 |
| ·核苷酸序列和氨基酸序列的分析 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-54页 |
| ·CbGRP full-length cDNA的克隆和序列分析 | 第44-46页 |
| ·CbGRP与其它植物GRP的序列比对和进化分析 | 第46-47页 |
| ·CbGRP在各种非生物胁迫下的转录水平 | 第47-48页 |
| ·CbGRP表达的组织特异性 | 第48页 |
| ·CbGRP的RNA结合活性 | 第48-49页 |
| ·CbGRP-pBI121重组质粒的鉴定 | 第49页 |
| ·CbGRP-pBI121质粒转化LBA4404的PCR鉴定 | 第49-50页 |
| ·转基因烟草植株的再生 | 第50页 |
| ·转基因烟草阳性植株的检测 | 第50-52页 |
| ·PCR检测 | 第50-51页 |
| ·GUS组织染色 | 第51-52页 |
| ·CbGRP转基因烟草的抗冻实验 | 第52页 |
| ·低温下转基因和野生型烟草的电导率 | 第52-53页 |
| ·低温下转基因和野生烟草的脯氨酸含量 | 第53页 |
| ·低温下转基因和野生烟草丙二醛含量 | 第53-54页 |
| ·低温下野生型和GRP转基因型烟草叶片过氧化物酶活性 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| 第四章 高山离子芥钙网质蛋白(Calreticulin)的基因克隆和转录分析 | 第57-66页 |
| ·材料和方法 | 第57-58页 |
| ·植物材料和生长条件 | 第57页 |
| ·CbCRT cDNA 3'末端的克隆(3'-RACE) | 第57页 |
| ·CbCRT cDNA 5'末端的克隆(5'-RACE) | 第57页 |
| ·CbCRT full-length cDNA的克隆 | 第57页 |
| ·CbCRT蛋白的原核表达及CbCRT蛋白多克隆抗体的制备 | 第57-58页 |
| ·Real-time RT-PCR | 第58页 |
| ·CRT的系统发育分析 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-63页 |
| ·CbCRT full-length cDNA的克隆和分析 | 第58-60页 |
| ·CbCRT氨基酸序列同源性分析 | 第60-61页 |
| ·CbCRT与其它CRT蛋白的系统发育分析 | 第61-62页 |
| ·低温胁迫下CbCRT在不同组织的表达 | 第62-63页 |
| ·CbCRT基因在各种非生物胁迫下的转录水平 | 第63页 |
| ·讨论 | 第63-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-78页 |
| 在学期间研究成果 | 第78-79页 |
| 一.发表论文和专利 | 第78页 |
| 二、参与课题 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 基金支持 | 第80页 |
| 基金支持 | 第80页 |
