| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·PTHrP基因的研究进展 | 第10-14页 |
| ·概述 | 第10页 |
| ·PTHrP受体 | 第10-11页 |
| ·生物学作用 | 第11-14页 |
| ·RNA干扰的研究进展 | 第14-18页 |
| ·RNAi的发现 | 第14-15页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第15页 |
| ·RNAi的特点 | 第15-17页 |
| ·siRNA序列的设计 | 第17-18页 |
| ·腺病毒载体的研究进展 | 第18-21页 |
| ·腺病毒结构 | 第18-19页 |
| ·腺病毒载体分类 | 第19-20页 |
| ·腺病毒载体的优缺点 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 山羊PTHrP基因干扰重组腺病毒载体的构建 | 第22-34页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·主要材料及试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·主要试剂配方 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-29页 |
| ·靶向PTHrP基因的shRNA干扰序列的设计与合成 | 第23-24页 |
| ·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA载体的构建 | 第24-26页 |
| ·有效shRNA 序列的筛选 | 第26-28页 |
| ·pAD/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA重组腺病毒载体的构建 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-31页 |
| ·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA载体的构建 | 第29-30页 |
| ·有效shRNA 序列的筛选 | 第30-31页 |
| ·pAD/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA重组腺病毒载体的构建 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| ·Block-iT腺病毒RNA干扰系统 | 第31-32页 |
| ·shRNA序列的设计 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第三章 山羊PTHrP基因shRNA干扰腺病毒的制备与效率检测 | 第34-44页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·主要材料及试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| ·主要试剂配方 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-39页 |
| ·腺病毒的包装与扩增 | 第35-36页 |
| ·腺病毒感染山羊乳腺上皮细胞 | 第36页 |
| ·实时定量PCR检测PTHrP基因mRNA表达 | 第36-39页 |
| ·Western blotting检测PTHrP蛋白表达 | 第39页 |
| ·实验结果 | 第39-42页 |
| ·腺病毒的包装、扩增及滴度测定 | 第39页 |
| ·最佳MOI值确定 | 第39页 |
| ·荧光定量PCR检测PTHrP基因mRNA表达 | 第39-41页 |
| ·Western blotting检测PTHrP蛋白表达 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·腺病毒的包装、扩增和滴度测定 | 第42页 |
| ·干扰效率检测 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |
