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天然产物Terrequinone A生物合成酶系的异源表达与固定化初步研究

致谢第1-5页
摘要第5-6页
Abstract第6-8页
目次第8-11页
第一章 绪论第11-28页
   ·合成生物学在天然产物生物合成中的应用第11-18页
     ·天然产物合成路径的异源重组第12-14页
     ·修饰酶底物特异性的评定第14-15页
     ·异源表达和宿主细胞中的途径调节第15-17页
     ·展望第17-18页
     ·体外多酶系统在生物催化的应用第18-23页
     ·多酶催化体系的“代谢区间”第18-19页
     ·溶液中的体外多酶生物催化第19-20页
     ·多酶系统的共价固定化第20-22页
     ·结论第22-23页
     ·Terrequinone A生物合成机制的研究进展第23-27页
     ·双吲哚醌类的生物合成第24-26页
     ·L-色氨酸:双吲哚类生物合成的前体第26页
     ·展望第26-27页
   ·选题背景、目的及主要内容第27-28页
第二章 Terrequinone A合成酶系基因的克隆第28-48页
   ·前言第28页
   ·材料与方法第28-43页
     ·菌种与质粒第28-29页
     ·试剂与器材第29-30页
     ·实验方法第30-43页
   ·结果与分析第43-46页
     ·RNA的提取第43-44页
     ·目的基因的克隆第44-45页
     ·目的基因连接克隆载体第45-46页
   ·本章小结第46-48页
第三章 Terrequinone A合成酶系蛋白的诱导、表达与纯化第48-67页
   ·引言第48-51页
   ·材料与方法第51-56页
     ·菌株与质粒第51页
     ·试剂与仪器第51-52页
     ·实验方法第52-56页
   ·结果与分析第56-65页
     ·重组表达菌株的构建第56-59页
     ·蛋白的诱导表达第59-60页
     ·固相金属亲和层析纯化目的蛋白第60-64页
     ·蛋白浓度定量分析第64-65页
   ·本章小结第65-67页
第四章 Terrequinone A的酶促合成与酶固定化初步研究第67-83页
   ·前言第67-68页
   ·材料与方法第68-72页
     ·试剂与仪器第68-69页
     ·实验方法第69-72页
   ·结果与分析第72-82页
     ·TdiD催化L-色氨酸生成IPA第72-75页
     ·TdiA催化合成Didemethylasterriquinone D第75-78页
     ·终产物Terriquinone A的酶催化催化合成第78-79页
     ·固定化酶催化合成IPA第79-82页
   ·本章小结第82-83页
第五章 结论与展望第83-85页
参考文献第85-92页
附录1 作者简历及在学期间所发表论文第92-94页
附录2 攻读硕士学位期间主要科研成果第94页

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