中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
前言 | 第11-13页 |
论文 | 第13-50页 |
第一章 DS610序列的生物信息学分析 | 第13-26页 |
1. 方法 | 第13-14页 |
1.1 序列相似性比对 | 第13页 |
1.2 序列读框分析 | 第13页 |
1.3 蛋白质性质分析 | 第13页 |
1.4 蛋白质结构分析 | 第13-14页 |
1.4.1 蛋白质低复杂度分析 | 第13-14页 |
1.4.2 蛋白质保守结构域分析(RPS-BLAST) | 第14页 |
1.4.3 BLOCKs分析 | 第14页 |
1.4.4 蛋白质跨膜结构域分析 | 第14页 |
1.4.5 蛋白质信号肽和细胞定位分析 | 第14页 |
1.4.6 PORSITE分析 | 第14页 |
1.4.7 蛋白质卷曲螺旋分析 | 第14页 |
1.5 蛋白质二级结构预测 | 第14页 |
1.6 盐藻DSG10序列的进化地位分析 | 第14页 |
2. 结果与讨论 | 第14-24页 |
2.1 序列相似性比对 | 第14-16页 |
2.1.1 BLASTn | 第14-15页 |
2.1.2 BLASTx | 第15-16页 |
2.2 序列读框分析 | 第16-17页 |
2.3 最长读框蛋白质性质分析 | 第17-18页 |
2.3.1 蛋白质亲水性分析 | 第17-18页 |
2.3.2 蛋白质极性分析 | 第18页 |
2.4 蛋白质结构分析 | 第18-22页 |
2.4.1 蛋白质低复杂度分析 | 第18页 |
2.4.2 蛋白质保守结构域分析(RPS-BLAST) | 第18-19页 |
2.4.3 BLOCKs分析 | 第19-20页 |
2.4.4 蛋白质跨膜结构域分析 | 第20页 |
2.4.5 蛋白质信号肽和细胞定位分析 | 第20-21页 |
2.4.6 PROSITE分析 | 第21-22页 |
2.4.7 蛋白质卷曲螺旋分析 | 第22页 |
2.5 蛋白质二级结构预测 | 第22-23页 |
2.6 盐藻DSG10序列的进化地位分析 | 第23-24页 |
3. 小结 | 第24-26页 |
第二章 盐藻DSG10表达载体构建及其根癌农杆菌转化 | 第26-32页 |
1. 材料与方法 | 第26-29页 |
1.1 材料 | 第26-27页 |
1.1.1 菌株和质粒 | 第26页 |
1.1.2 酶与试剂盒 | 第26页 |
1.1.3 引物及测序 | 第26-27页 |
1.1.4 试剂 | 第27页 |
1.2 方法 | 第27-29页 |
1.2.1 载体pCAMBIA2301G的构建 | 第27页 |
1.2.2 载体pCAMBIA2301G-DSG10的构建 | 第27-28页 |
1.2.3 大肠杆菌CaCl_2法感受态细胞的制备及转化 | 第28页 |
1.2.4 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第28页 |
1.2.5 用PCR方法检测连接子 | 第28-29页 |
2.结果与分析 | 第29-31页 |
2.1 载体pCAMBIA2301G的构建 | 第29-30页 |
2.2 载体pCAMBIA2301G-DSG10的构建 | 第30页 |
2.3 根癌农杆菌的转化 | 第30-31页 |
3. 讨论 | 第31-32页 |
第三章 DSG10转化烟草及植株再生 | 第32-38页 |
1. 材料和方法 | 第32-34页 |
1.1 材料 | 第32页 |
1.1.1 根癌农杆菌菌株 | 第32页 |
1.1.2 植物材料 | 第32页 |
1.1.3 培养基 | 第32页 |
1.2 方法 | 第32-34页 |
1.2.1 农杆菌的培养 | 第32-33页 |
1.2.2 叶盘法转化烟草(无菌操作) | 第33页 |
1.2.3 诱导丛生芽 | 第33-34页 |
1.2.4 诱导生根 | 第34页 |
1.2.5 无菌苗的继代培养 | 第34页 |
1.2.6 再生植株的移栽 | 第34页 |
2. 结果 | 第34-35页 |
2.1 叶盘法转化烟草 | 第34-35页 |
2.2 诱导丛生芽 | 第35页 |
2.3 诱导生根 | 第35页 |
2.4 移栽 | 第35页 |
3. 讨论 | 第35-38页 |
3.1 农杆菌的培养 | 第35-36页 |
3.2 叶盘法转化烟草 | 第36页 |
3.3 诱导丛生芽 | 第36-37页 |
3.4 诱导生根 | 第37页 |
3.5 移栽 | 第37-38页 |
第四章 转基因烟草分子生物学鉴定 | 第38-49页 |
1. 材料与方法 | 第38-43页 |
1.1 材料 | 第38-39页 |
1.1.1 植物材料 | 第38页 |
1.1.2 酶与试剂盒 | 第38页 |
1.1.3 试剂 | 第38-39页 |
1.2 方法 | 第39-43页 |
1.2.1 CTAB法小量抽提植物总DNA(用于PCR检测) | 第39-40页 |
1.2.2 CTAB法大量抽提植物总DNA(用于Southern杂交) | 第40页 |
1.2.3 转基因烟草的PCR检测 | 第40-41页 |
1.2.4 Southern杂交 | 第41-43页 |
2. 结果 | 第43-46页 |
2.1 PCR检测 | 第43-44页 |
2.2 Southern杂交 | 第44-46页 |
2.2.1 总DNA的质量 | 第44页 |
2.2.2 总DNA酶切、电泳及浓缩 | 第44-45页 |
2.2.3 探针标记 | 第45-46页 |
2.2.4 Southern杂交结果 | 第46页 |
3. 讨论 | 第46-49页 |
3.1 PCR检测 | 第47页 |
3.2 Southern杂交 | 第47-49页 |
3.2.1 DNA样品的制备 | 第47页 |
3.2.2 电泳、转膜和固定 | 第47-48页 |
3.2.3 预杂交和杂交 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
综述 | 第51-68页 |
植物耐盐性研究现状与展望 | 第51-68页 |
一、 植物对盐胁迫的适应机制 | 第51-62页 |
1. 盐胁迫诱导的信号传导途径 | 第52-57页 |
1) 依赖于植物激素ABA(abscisic acid)的信号传导途径 | 第52-54页 |
2) DREB途径 | 第54-56页 |
3) SOS途径 | 第56页 |
4) 蛋白激酶途径 | 第56-57页 |
2. 盐胁迫下植物的生理反应 | 第57-62页 |
1) 离子平衡 | 第57-60页 |
2) 渗透压平衡 | 第60-61页 |
3) 氧化还原状态的平衡 | 第61-62页 |
4) 水分平衡 | 第62页 |
二、 植物耐盐性研究方法 | 第62-66页 |
1. 耐盐性研究的模式生物 | 第62-64页 |
1) 酵母 | 第62-63页 |
2) 拟南芥 | 第63页 |
3) 烟草 | 第63页 |
4) 水稻 | 第63页 |
5) 其它耐盐模式生物 | 第63-64页 |
2. 耐盐植物研究的方法 | 第64-66页 |
1) 基因工程方法 | 第64页 |
2) 基因组学方法 | 第64-66页 |
三、 展望 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
图版 | 第73-74页 |
图版说明 | 第74页 |