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盐藻耐盐相关序列DSG10的功能预测及其转基因烟草鉴定

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
前言第11-13页
论文第13-50页
 第一章 DS610序列的生物信息学分析第13-26页
  1. 方法第13-14页
   1.1 序列相似性比对第13页
   1.2 序列读框分析第13页
   1.3 蛋白质性质分析第13页
   1.4 蛋白质结构分析第13-14页
    1.4.1 蛋白质低复杂度分析第13-14页
    1.4.2 蛋白质保守结构域分析(RPS-BLAST)第14页
    1.4.3 BLOCKs分析第14页
    1.4.4 蛋白质跨膜结构域分析第14页
    1.4.5 蛋白质信号肽和细胞定位分析第14页
    1.4.6 PORSITE分析第14页
    1.4.7 蛋白质卷曲螺旋分析第14页
   1.5 蛋白质二级结构预测第14页
   1.6 盐藻DSG10序列的进化地位分析第14页
  2. 结果与讨论第14-24页
   2.1 序列相似性比对第14-16页
    2.1.1 BLASTn第14-15页
    2.1.2 BLASTx第15-16页
   2.2 序列读框分析第16-17页
   2.3 最长读框蛋白质性质分析第17-18页
    2.3.1 蛋白质亲水性分析第17-18页
    2.3.2 蛋白质极性分析第18页
   2.4 蛋白质结构分析第18-22页
    2.4.1 蛋白质低复杂度分析第18页
    2.4.2 蛋白质保守结构域分析(RPS-BLAST)第18-19页
    2.4.3 BLOCKs分析第19-20页
    2.4.4 蛋白质跨膜结构域分析第20页
    2.4.5 蛋白质信号肽和细胞定位分析第20-21页
    2.4.6 PROSITE分析第21-22页
    2.4.7 蛋白质卷曲螺旋分析第22页
   2.5 蛋白质二级结构预测第22-23页
   2.6 盐藻DSG10序列的进化地位分析第23-24页
  3. 小结第24-26页
 第二章 盐藻DSG10表达载体构建及其根癌农杆菌转化第26-32页
  1. 材料与方法第26-29页
   1.1 材料第26-27页
    1.1.1 菌株和质粒第26页
    1.1.2 酶与试剂盒第26页
    1.1.3 引物及测序第26-27页
    1.1.4 试剂第27页
   1.2 方法第27-29页
    1.2.1 载体pCAMBIA2301G的构建第27页
    1.2.2 载体pCAMBIA2301G-DSG10的构建第27-28页
    1.2.3 大肠杆菌CaCl_2法感受态细胞的制备及转化第28页
    1.2.4 农杆菌感受态细胞的制备和转化第28页
    1.2.5 用PCR方法检测连接子第28-29页
  2.结果与分析第29-31页
   2.1 载体pCAMBIA2301G的构建第29-30页
   2.2 载体pCAMBIA2301G-DSG10的构建第30页
   2.3 根癌农杆菌的转化第30-31页
  3. 讨论第31-32页
 第三章 DSG10转化烟草及植株再生第32-38页
  1. 材料和方法第32-34页
   1.1 材料第32页
    1.1.1 根癌农杆菌菌株第32页
    1.1.2 植物材料第32页
    1.1.3 培养基第32页
   1.2 方法第32-34页
    1.2.1 农杆菌的培养第32-33页
    1.2.2 叶盘法转化烟草(无菌操作)第33页
    1.2.3 诱导丛生芽第33-34页
    1.2.4 诱导生根第34页
    1.2.5 无菌苗的继代培养第34页
    1.2.6 再生植株的移栽第34页
  2. 结果第34-35页
   2.1 叶盘法转化烟草第34-35页
   2.2 诱导丛生芽第35页
   2.3 诱导生根第35页
   2.4 移栽第35页
  3. 讨论第35-38页
   3.1 农杆菌的培养第35-36页
   3.2 叶盘法转化烟草第36页
   3.3 诱导丛生芽第36-37页
   3.4 诱导生根第37页
   3.5 移栽第37-38页
 第四章 转基因烟草分子生物学鉴定第38-49页
  1. 材料与方法第38-43页
   1.1 材料第38-39页
    1.1.1 植物材料第38页
    1.1.2 酶与试剂盒第38页
    1.1.3 试剂第38-39页
   1.2 方法第39-43页
    1.2.1 CTAB法小量抽提植物总DNA(用于PCR检测)第39-40页
    1.2.2 CTAB法大量抽提植物总DNA(用于Southern杂交)第40页
    1.2.3 转基因烟草的PCR检测第40-41页
    1.2.4 Southern杂交第41-43页
  2. 结果第43-46页
   2.1 PCR检测第43-44页
   2.2 Southern杂交第44-46页
    2.2.1 总DNA的质量第44页
    2.2.2 总DNA酶切、电泳及浓缩第44-45页
    2.2.3 探针标记第45-46页
    2.2.4 Southern杂交结果第46页
  3. 讨论第46-49页
   3.1 PCR检测第47页
   3.2 Southern杂交第47-49页
    3.2.1 DNA样品的制备第47页
    3.2.2 电泳、转膜和固定第47-48页
    3.2.3 预杂交和杂交第48-49页
 结论第49-50页
致谢第50-51页
综述第51-68页
 植物耐盐性研究现状与展望第51-68页
  一、 植物对盐胁迫的适应机制第51-62页
   1. 盐胁迫诱导的信号传导途径第52-57页
    1) 依赖于植物激素ABA(abscisic acid)的信号传导途径第52-54页
    2) DREB途径第54-56页
    3) SOS途径第56页
    4) 蛋白激酶途径第56-57页
   2. 盐胁迫下植物的生理反应第57-62页
    1) 离子平衡第57-60页
    2) 渗透压平衡第60-61页
    3) 氧化还原状态的平衡第61-62页
    4) 水分平衡第62页
  二、 植物耐盐性研究方法第62-66页
   1. 耐盐性研究的模式生物第62-64页
    1) 酵母第62-63页
    2) 拟南芥第63页
    3) 烟草第63页
    4) 水稻第63页
    5) 其它耐盐模式生物第63-64页
   2. 耐盐植物研究的方法第64-66页
    1) 基因工程方法第64页
    2) 基因组学方法第64-66页
  三、 展望第66-68页
参考文献第68-73页
图版第73-74页
图版说明第74页

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