| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-27页 |
| ·cTnI的特性 | 第17页 |
| ·cTnI作为AMI病人检测的金指标 | 第17-18页 |
| ·cTnI在血液中的动力学 | 第18-21页 |
| ·心肌损伤后cTnI在血液中存在的形式 | 第18-19页 |
| ·心肌损伤后cTnI在血液中的降解 | 第19-20页 |
| ·cTnI释放入血的量与时间关系 | 第20页 |
| ·cTnI与TnC、cTnT的相互作用 | 第20-21页 |
| ·cTnI的监测方法 | 第21-22页 |
| ·cTnI抗原位点的发现及配对抗体的发现 | 第22-23页 |
| ·cTnI监测的标准化 | 第23-24页 |
| ·抗原的设计 | 第24-25页 |
| ·牛cTnI与人cTnI的氨基酸序列对比 | 第25页 |
| ·主要研究内容 | 第25-27页 |
| 第二章 多重复PET30A-ANTIGEN片断质粒的构建及表达 | 第27-45页 |
| ·pET30a-Antigen质粒构建思路 | 第27页 |
| ·pET30a-Antigen质粒载体构建过程 | 第27-42页 |
| ·AA基因扩增 | 第27-29页 |
| ·NB、BB、BE、EH、HX五段基因的扩增 | 第29-31页 |
| ·pET30a-NB质粒构建及验证 | 第31-34页 |
| ·pET30a-BB质粒构建及验证 | 第34-36页 |
| ·pET30a-BE质粒构建及验证 | 第36-38页 |
| ·pET30a-EH质粒构建及验证 | 第38-40页 |
| ·pET30a-HX质粒构建及验证 | 第40-42页 |
| ·Antigen多肽的诱导表达及纯化 | 第42-44页 |
| ·pET30a-Antigen在E.coli BL21(DE3)中诱导表达 | 第42-43页 |
| ·pET30a-Antigen在E.coli JM109(DE3)中诱导表达 | 第43页 |
| ·6His蛋白标签结构纯化Antigen抗原多肽 | 第43-44页 |
| ·本章小结: | 第44-45页 |
| 第三章 ANTIGEN抗原多肽的信号肽诱导表达及其转录验证 | 第45-61页 |
| ·pET28a-Antigen质粒的构建及诱导表达 | 第45-48页 |
| ·pET28a-Antigen质粒的构建 | 第45-47页 |
| ·pET28a-Antigen质粒的诱导表达 | 第47-48页 |
| ·Antigen抗原多肽的转录、翻译验证 | 第48-54页 |
| ·pET28a-Antigen-Daao质粒多顺返子结构的构建 | 第48-52页 |
| ·pET28a-Antigen-DAAO质粒多顺返子诱导表达 | 第52-53页 |
| ·6His蛋白标签结构纯化Antigen抗原多肽 | 第53-54页 |
| ·pBAD-Antigen表达载体的构建及其诱导表达 | 第54-60页 |
| ·pBAD-Antiegen质粒构建的思路 | 第56页 |
| ·pBAD-Antiegen质粒构建的过程 | 第56-59页 |
| ·pBAD-Antiegen质粒的诱导表达 | 第59-60页 |
| ·本章小结 | 第60-61页 |
| 第四章 ANTIGEN抗原多肽的融合表达 | 第61-84页 |
| ·pMAL-Antigen质粒的构建 | 第61-73页 |
| ·pMAL-Antigen质粒的构建思路 | 第61-62页 |
| ·pMAL-1质粒的构建 | 第62-65页 |
| ·pMAL-2质粒的构建 | 第65-67页 |
| ·pMAL-3质粒的构建 | 第67-69页 |
| ·pMAL-4质粒的构建 | 第69-70页 |
| ·pMAL-5质粒的构建 | 第70-73页 |
| ·pMAL-M质粒的构建 | 第73-76页 |
| ·pMAL-M质粒的构建 | 第73-76页 |
| ·pMAL-Antigen质粒的诱导表达 | 第76-77页 |
| ·pET30a-MBP-Antigen质粒的构建、诱导表达及纯化 | 第77-82页 |
| ·pET30a-Mbp-Antigen质粒的构建 | 第77-80页 |
| ·pET30a-Mbp-Antigen诱导表达 | 第80-82页 |
| ·MBP-Antigen融合蛋白的纯化 | 第82-83页 |
| ·本章小结 | 第83-84页 |
| 第五章 HCTNI特殊位点抗原的免疫及抗体的检测 | 第84-87页 |
| ·材料和方法 | 第84-85页 |
| ·材料 | 第84页 |
| ·动物免疫 | 第84页 |
| ·ELISA法检测抗体效价 | 第84-85页 |
| ·hcTnI和bcTnI氨基酸序列对比 | 第85页 |
| ·抗体效价测定 | 第85-86页 |
| ·本章小结 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-90页 |
| 附录 | 第90-119页 |
| 附录1 实验仪器及主要药品 | 第90-93页 |
| 附录2 菌种和质粒 | 第93-97页 |
| 附录3 聚合酶链式反应(PCR) | 第97-98页 |
| 附录4 琼脂糖DNA凝胶电泳 | 第98-99页 |
| 附录5 DNA限制性内切酶酶切操作 | 第99-100页 |
| 附录6 DNA连接反应 | 第100-101页 |
| 附录7 E.coli感受态细胞的制备及质粒转化 | 第101-102页 |
| 附录8 菌落PCR鉴定法筛选重组菌株 | 第102-103页 |
| 附录9 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第103-106页 |
| 附录10 MBP-Antigen纯化的一系列操作 | 第106-108页 |
| 附录11 考马斯亮兰法(Bradford法)测定蛋白质浓度 | 第108-110页 |
| 附录12 蛋白抗原包被的ELISA法溶液配制 | 第110-111页 |
| 附录13 培养基配方 | 第111-112页 |
| 附录14 抗生素、诱导剂 | 第112-113页 |
| 附录15 比色分析法测DAAO酶酶活 | 第113-114页 |
| 附录16 6His蛋白标签结构纯化蛋白 | 第114-115页 |
| 附录17 斑点法测DNA浓度 | 第115-116页 |
| 附录18 构建质粒测序结果 | 第116-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第120-121页 |
| 作者简介 | 第121-122页 |
| 附件 | 第122-123页 |
