| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 有机磷降解酶及其基因的研究进展 | 第12-23页 |
| ·有机磷农药简介 | 第12页 |
| ·有机磷降解酶简介及其空间结构和催化机制的研究 | 第12-16页 |
| ·有机磷降解酶简介 | 第12-13页 |
| ·有机磷降解酶空间结构的研究 | 第13-15页 |
| ·有机磷降解酶催化机制的研究 | 第15-16页 |
| ·有机磷降解酶基因的起源 | 第16-18页 |
| ·目前发表的有机磷降解酶基因以及它们的区别和联系 | 第18-21页 |
| ·问题与展望 | 第21页 |
| ·研究意义和目的 | 第21-23页 |
| 第二章 甲基对硫磷降解菌的筛选以及甲基对硫磷水解酶基因的克隆与异源表达 | 第23-43页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·实验仪器、工具酶和试剂 | 第23页 |
| ·培养基及培养条件和相关溶液的配制 | 第23-25页 |
| ·实验方法 | 第25-33页 |
| ·菌株的分离和筛选 | 第25页 |
| ·甲基对硫磷水解酶的酶活力测量方法 | 第25页 |
| ·细菌基因组的提取 | 第25-26页 |
| ·甲基对硫磷降解菌的鉴定 | 第26-28页 |
| ·甲基对硫磷水解酶基因中间片段的克隆 | 第28-29页 |
| ·甲基对硫磷水解酶基因全长的克隆 | 第29页 |
| ·原核表达重组子的构建 | 第29-31页 |
| ·甲基对硫磷水解酶基因在大肠杆菌中的诱导表达以及检测 | 第31-32页 |
| ·酵母表达重组质粒的构建 | 第32页 |
| ·重组酵母菌株的获得 | 第32-33页 |
| ·实验结果与分析 | 第33-41页 |
| ·高效甲基对磷降解菌的筛选 | 第33-34页 |
| ·高效甲基对硫磷降解菌菌种的鉴定 | 第34页 |
| ·甲基对硫磷水解酶编码基因部分序列的克隆 | 第34页 |
| ·甲基对硫磷水解酶编码基因的克隆 | 第34-36页 |
| ·mphxw 基因原核重组质粒的构建 | 第36页 |
| ·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第36页 |
| ·mphxw 基因在大肠杆菌中的表达 | 第36-38页 |
| ·mphxw 基因在毕赤酵母中的表达 | 第38-41页 |
| 讨论 | 第41-42页 |
| 本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 甲基对硫磷水解酶蛋白纯化及其酶学性质分析 | 第43-60页 |
| ·实验材料 | 第43-46页 |
| ·菌株与质粒 | 第43页 |
| ·实验仪器 | 第43页 |
| ·工具酶 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43-44页 |
| ·培养基及培养条件和相关溶液的配制 | 第44-46页 |
| ·实验方法 | 第46-49页 |
| ·甲基对硫磷水解酶原菌粗酶液的提取 | 第46页 |
| ·甲基对硫磷水解酶原菌蛋白的分离和纯化 | 第46页 |
| ·甲基对硫磷水解酶氨基酸序列检测 | 第46页 |
| ·甲基对硫磷水解酶原核重组蛋白的分离和纯化 | 第46-47页 |
| ·甲基对硫磷水解酶的酶学性质分析 | 第47-48页 |
| ·甲基对硫磷水解酶降解甲基对硫磷的动力学分析 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-57页 |
| ·甲基对硫磷水解酶（MPHXW）原菌蛋白的分离和纯化 | 第49-50页 |
| ·甲基对硫磷水解酶（MPHXW）氨基酸序列分析 | 第50-51页 |
| ·甲基对硫磷水解酶（MPHXW）原核重组蛋白的分离和纯化 | 第51页 |
| ·甲基对硫磷水解酶原菌蛋白和原核重组蛋白酶学性质的研究 | 第51-56页 |
| ·甲基对硫磷水解酶原菌蛋白和原核重组蛋白动力学分析 | 第56-57页 |
| 讨论 | 第57-59页 |
| 本章小结 | 第59-60页 |
| 第四章 全文结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简历 | 第67页 |
