人/猴免疫缺陷病毒p27蛋白单克隆抗体的制备
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-22页 |
| ·研究的目的和意义 | 第9-10页 |
| ·艾滋病及其流行现状 | 第10页 |
| ·HIV 的研究概况 | 第10-13页 |
| ·HIV 病毒粒子结构 | 第10-11页 |
| ·HIV 基因组结构与功能 | 第11-12页 |
| ·HIV 的生活周期 | 第12-13页 |
| ·SHIV 简介 | 第13-18页 |
| ·SHIV 的由来 | 第13-14页 |
| ·SHIV 的构建及特性 | 第14-15页 |
| ·SHIV 在AIDS 疫苗研究中的应用 | 第15-18页 |
| ·SHIV 的检测 | 第18-19页 |
| ·常用SHIV 检测方法 | 第18-19页 |
| ·SHIV 检测中的重要抗原p27 及其特征 | 第19页 |
| ·单克隆抗体技术 | 第19-22页 |
| ·单克隆抗体的特点 | 第20-21页 |
| ·单克隆抗体技术的应用 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-37页 |
| ·实验材料 | 第22-26页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·细胞、菌株与质粒 | 第22-23页 |
| ·引物合成与测序 | 第23页 |
| ·主要酶类及生化试剂 | 第23-24页 |
| ·主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-37页 |
| ·目的基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·p27 基因的鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第28-29页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第29-31页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第32-34页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第34页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的克隆 | 第34页 |
| ·杂交瘤细胞株的冻存与复苏 | 第34-35页 |
| ·单抗腹水的生产 | 第35页 |
| ·杂交瘤细胞及单抗的鉴定 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-48页 |
| ·目的基因的获得 | 第37页 |
| ·P27 基因的鉴定 | 第37页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第37-39页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第39-40页 |
| ·融合蛋白的纯化及定量 | 第40-41页 |
| ·免疫小鼠血清效价测定 | 第41-42页 |
| ·筛选方法的建立 | 第42页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第42页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第42页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的克隆 | 第42页 |
| ·杂交瘤细胞及单抗的鉴定 | 第42-48页 |
| ·杂交瘤细胞的稳定性试验 | 第42-43页 |
| ·杂交瘤细胞染色体分析 | 第43-44页 |
| ·单克隆抗体亚类分析 | 第44页 |
| ·单克隆抗体腹水效价测定 | 第44-45页 |
| ·单克隆抗体特异性测定 | 第45-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| ·融合表达载体的选择 | 第48页 |
| ·表达条件的常规优化 | 第48-49页 |
| ·抗原制备 | 第49页 |
| ·细胞融合与筛选 | 第49-50页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆 | 第50页 |
| ·单克隆抗体特异性的鉴定 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第63页 |
