集胞藻PCC6803 RNA结合蛋白基因rbp3在寒冷适应中的作用
缩略语表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-35页 |
1 集胞藻PCC6803分子遗传学研究进展 | 第11-19页 |
·集胞藻PCC6803概述 | 第11-12页 |
·集胞藻PCC6803的遗传操作 | 第12-15页 |
·集胞藻PCC6803的转化和接合转移 | 第12-14页 |
·集胞藻PCC6803的诱变及突变株的分离 | 第14-15页 |
·报告基因 | 第15页 |
·集胞藻PCC6803的功能基因组学研究 | 第15-19页 |
·集胞藻PCC6803的转录组学研究 | 第15-17页 |
·集胞藻PCC6803的蛋白质组学研究 | 第17-19页 |
2 蓝藻抗寒机理 | 第19-33页 |
·生物膜 | 第19-24页 |
·低温对脂肪酸组成的影响 | 第19-21页 |
·膜流动性和低温适应能力 | 第21-22页 |
·脂肪酸脱饱和酶基因的表达 | 第22-24页 |
·营养因子 | 第24-25页 |
·光损伤 | 第25-27页 |
·低温诱导表达的蛋白 | 第27-30页 |
·RNA结合蛋白 | 第27-29页 |
·RNA解旋酶 | 第29-30页 |
·低温感受及信号传导 | 第30-33页 |
·细胞膜 | 第31页 |
·二元信号传导系统 | 第31-33页 |
·蓝藻低温强化现象 | 第33页 |
3 本研究的目的和总体设计 | 第33-35页 |
第二章 低温对集胞藻PCC6803转录谱的影响 | 第35-52页 |
1 材料与方法 | 第35-41页 |
·藻株、培养条件及样品的收集 | 第35-36页 |
·总RNA的提取 | 第36页 |
·转录谱分析 | 第36-38页 |
·基因芯片 | 第36-37页 |
·探针标记 | 第37页 |
·杂交 | 第37页 |
·洗涤 | 第37-38页 |
·扫描及数据处理 | 第38页 |
·Northern blot | 第38-41页 |
·探针标记 | 第39页 |
·甲醛变性凝胶电泳分离RNA | 第39页 |
·转膜 | 第39-40页 |
·交联 | 第40页 |
·杂交及显色 | 第40-41页 |
2 结果 | 第41-52页 |
·RNA检测 | 第41页 |
·基因芯片扫描结果 | 第41-44页 |
·Northern blot 结果 | 第44-48页 |
·对分析结果的讨论 | 第48-52页 |
第三章 rbp3在低温适应中的作用 | 第52-71页 |
1 材料与方法 | 第52-61页 |
·藻株、培养条件和转化 | 第52-53页 |
·蓝藻总DNA的提取 | 第53页 |
·PCR反应 | 第53-54页 |
·质粒的构建 | 第54页 |
·定向插入失活质粒的构建 | 第54页 |
·互补突变株的质粒构建 | 第54页 |
·rbp3突变株、互补株的生长实验 | 第54-58页 |
·rbp3突变株、互补株的抗寒力测试 | 第58页 |
·脂肪酸含量测定 | 第58-59页 |
·Northern blot检测基因的表达 | 第59页 |
·Western blot检测基因的表达 | 第59-61页 |
·抗血清的制备 | 第59-60页 |
·免疫印迹 | 第60-61页 |
2 结果 | 第61-68页 |
·rbp3突变株、互补株的PCR检测 | 第61-62页 |
·rbp3突变株、互补株的生长情况 | 第62页 |
·rbp3突变株、互补株的抗寒力测试 | 第62页 |
·rbp3突变株在不同温度下脂肪酸的含量 | 第62-63页 |
·rbp3突变株在不同温度下的转录情况 | 第63-66页 |
·Rbp3的原核表达 | 第66页 |
·Rbp3在集胞藻PCC6803中的表达 | 第66-67页 |
·EF-Ts在rbp3突变株的表达 | 第67-68页 |
3 讨论 | 第68-71页 |
参考文献 | 第71-90页 |
主要仪器和试剂 | 第90-92页 |
致谢 | 第92页 |