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鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分脂质体研制及抗肿瘤实验研究

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
前言第12-14页
第一部分 潍坊地区鲜无蹼壁虎指纹图谱研究及与蜥蜴凝胶电泳鉴别第14-22页
 一、试剂与仪器第14页
 二、方法与结果第14-20页
  1.鲜无蹼壁虎标本制作第14-15页
  2.鲜无蹼壁虎与蜥蜴的凝胶电泳鉴别第15-16页
   ·样品溶液制备第15页
   ·分离胶和浓缩胶的配制第15页
   ·电泳前的准备第15-16页
   ·电泳操作第16页
  3.特征鉴别结果第16页
   ·一般外部特征第16页
   ·疣鳞特征第16页
   ·足部特征第16页
   ·成体无蹼壁虎长度第16页
  4.凝胶电泳结果和图谱绘制第16-17页
  5.山东潍坊地区鲜无蹼壁虎的高效液相色谱指纹图谱第17-20页
   ·色谱条件第17页
   ·供试品的制备第17-18页
   ·HPLC 方法学考察第18页
     ·检测波长的确定第18页
     ·流动相及柱温的确定第18页
     ·稳定性考察第18页
     ·仪器精密度实验第18页
     ·重现性实验第18页
   ·鲜无蹼壁虎的HPLC 色谱图结果第18-20页
 三、讨论第20-22页
第二部分 鲜无蹼壁虎抗癌活性成分提取、分离纯化初步研究第22-26页
 一、仪器与试剂第22页
 二、方法与结果第22-25页
  1.抗癌活性成分提取第22-23页
   ·95%乙醇-酸性水浸渍工艺第22页
   ·95%乙醇-50%乙醇回流工第22页
   ·85%乙醇超声提取工艺第22页
   ·95%乙醇渗漉法提取工艺第22-23页
   ·95%乙醇浸泡提取工艺第23页
  2.鲜无蹼壁虎提取液配制第23页
  3.抑瘤活性测试方法第23页
  4.提取物分离纯化第23-24页
   ·反复冻融第23页
   ·脱蛋白质第23页
   ·脱脂肪第23页
   ·高效液相法分离纯化第23-24页
  5.最佳工艺的确定第24页
  6.不同提取方案的鲜无蹼壁虎提取液对 CT-26 肿瘤细胞生长的影响第24-25页
 三、讨论第25-26页
第三部分 鲜无蹼壁虎醇提物脂质体含量测定及包封率测定第26-34页
 一、仪器与材料第26页
 二、方法与结果第26-32页
  1.脂质体中药物的测定第26-29页
   ·检测波长的确定第26-27页
   ·标准曲线第27页
   ·精密度试验第27-28页
   ·方法回收率试验第28-29页
   ·加样回收率第29页
  2.包封率的测定第29-32页
   ·葡聚糖凝胶柱的制备第30页
   ·凝胶的选择第30页
   ·柱回收率第30-31页
   ·脂质体的洗脱曲线第31页
   ·包封率测定结果第31-32页
 三、讨论第32-34页
第四部分 鲜无蹼壁虎醇提物脂质体制备工艺和处方研究第34-43页
 一、材料和仪器第34页
 二、实验方法与结果第34-41页
  1.制备方法的选择第34-35页
   ·薄膜分散法第34页
   ·薄膜超声法第34页
   ·逆相蒸发法第34页
   ·薄膜分散-超声法第34-35页
  2.鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分脂质体制备工艺考察第35-41页
   ·影响包封率的因素第35-36页
     ·药-脂比对包封率的影响第35页
     ·胆固醇含量对包封率的影响第35页
     ·有机溶剂对包封率的影响第35页
     ·超声时间对包封率的影响第35页
     ·超声强度对包封率的影响第35-36页
     ·减小粒径方法对包封率的影响第36页
   ·结果第36-41页
     ·制备方法研究第36页
     ·药物卵磷脂比的影响结果第36-37页
     ·胆固醇含量的影响结果第37-38页
     ·有机溶剂的影响结果第38页
     ·有机相/水相体积比的影响第38-39页
     ·超声时间影响结果第39页
     ·本实验采用水浴式超声第39-40页
     ·旋转蒸发时包封率随着温度升高而变化不大第40页
     ·减小粒径方法的影响第40-41页
 三、讨论第41-43页
第五部分 鲜无蹼壁虎醇提物脂质体理化性质与稳定性研究第43-50页
 一、材料与仪器第43页
 二、方法与结第43-48页
  1.脂质体的质量评价第43-45页
   ·大小与形态观察第43-44页
     ·形态观察第43-44页
     ·粒径分布第44页
   ·脂质体主药含量和载药量测定第44-45页
     ·脂质体主药含量测定第44页
     ·载药量测定第44-45页
   ·包封率测定第45页
   ·脂质体pH 测定第45页
  2.鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分脂质体的稳定性研究第45-48页
   ·化学稳定性研究第45-47页
     ·V_E对脂质体稳定性的影响第45-46页
     ·两种灭菌方法对脂质体稳定性的影响第46-47页
       ·热压灭菌对脂质体的影响第46页
       ·辐射灭菌对脂质体的影响第46-47页
   ·物理稳定性研究第47-48页
     ·加热对脂质体的影响第47页
     ·贮存条件对脂质体的影响第47-48页
   ·血浆稳定性研究第48页
 三、讨论第48-50页
第六部分 鲜无蹼壁虎醇提物抗实验性恶性肿瘤的研究第50-56页
 一、材料与仪器第50页
  1.试剂、细胞株第50页
  2.仪器第50页
 二、方法与结果第50-55页
  1.鲜无蹼壁虎醇提物抗恶性肿瘤体外实验第50-52页
   ·细胞培养第50页
   ·溴化二甲噻唑二苯四氮唑(MTT)法检测活性第50-51页
   ·药物浓度对CT-26肿瘤细胞生长的影响第51页
   ·作用时间对CT-26肿瘤细胞生长的影响第51-52页
  2.鲜无蹼壁虎醇提物抗恶性肿瘤体内实验第52-55页
   ·动物造模第52页
   ·动物分组第52页
   ·给药剂量第52页
   ·统计学处理第52页
   ·体内抑瘤实验对肿瘤生长的影响第52-53页
   ·对荷瘤小鼠主要脏器指数的影响第53-54页
   ·细胞形态学变化第54页
   ·给药后肿瘤组织病理第54页
   ·鲜无蹼壁虎醇提物急性毒理实验结果第54-55页
 三、讨论第55-56页
第七部分 鲜无蹼壁虎醇提物脂质体抗肿瘤作用机制初步研究第56-66页
 一、材料与仪器第56页
 二、方法和结果第56-65页
  1.对小鼠血液TNF-α水平的影响第56页
  2.造模分组及其给药剂量第56页
  3.检测小鼠血清 TNFα水平第56-57页
  4.体外细胞增殖抑制试验第57-58页
  5.细胞凋亡的定量检测第58-65页
 三、讨论第65-66页
参考文献第66-71页
综述 无蹼壁虎研究进展第71-78页
读搏期间发表的论文和发明的专利第78-79页
致谢第79页

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