| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-27页 |
| 1 藻胆蛋白的结构与进化 | 第10-17页 |
| ·藻胆蛋白的结构 | 第10-15页 |
| ·藻胆蛋白的进化 | 第15-17页 |
| 2 藻胆蛋白的生物学活性 | 第17-21页 |
| ·抗肿瘤活性 | 第17-18页 |
| ·抗病毒活性 | 第18页 |
| ·血细胞增殖及免疫刺激活性 | 第18-19页 |
| ·抗氧化和抗炎活性 | 第19-20页 |
| ·光致细胞毒活性 | 第20-21页 |
| 3 藻胆蛋白的应用 | 第21-23页 |
| ·饲料 | 第21-22页 |
| ·天然色素 | 第22页 |
| ·荧光标记 | 第22-23页 |
| ·药物及保健品 | 第23页 |
| 4 藻胆蛋白基因工程 | 第23-27页 |
| ·重组脱辅基藻胆蛋白 | 第24-25页 |
| ·重组光学活性藻胆蛋白 | 第25-27页 |
| 第二章 光学活性重组别藻蓝蛋白相关基因在大肠杆菌中的表达 | 第27-39页 |
| 1 材料与方法 | 第27-34页 |
| ·基因、表达载体和菌株 | 第27页 |
| ·生化试剂 | 第27-28页 |
| ·常用溶液的配制 | 第28-29页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·抗生素和诱导剂 | 第28页 |
| ·十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳相关溶液 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-34页 |
| ·表达载体的构建 | 第30-33页 |
| ·apcA基因在大肠杆菌中的表达 | 第33-34页 |
| ·目的蛋白分析 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-37页 |
| ·表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·重组子酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·测序验证 | 第36页 |
| ·重组蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 4 本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 重组菌的发酵培养及重组蛋白的分离纯化 | 第39-55页 |
| 1 材料与方法 | 第39-45页 |
| ·质粒和菌株 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39-40页 |
| ·主要溶液的配制 | 第40-41页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| ·抗生素和诱导剂 | 第40页 |
| ·SDS-PAGE相关溶液 | 第40页 |
| ·柱层析缓冲液 | 第40-41页 |
| ·蛋白印记免疫分析试剂 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·菌种的平板保存 | 第41-42页 |
| ·试管及摇瓶培养 | 第42页 |
| ·发酵罐培养 | 第42页 |
| ·重组蛋白的分离 | 第42页 |
| ·金属螯合亲和层析 | 第42-43页 |
| ·纯化后蛋白样品保存 | 第43页 |
| ·检测方法 | 第43-45页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白表达水平分析 | 第44页 |
| ·重组蛋白抗原性分析—Western blotting分析 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白溶解性分析 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-52页 |
| ·摇瓶条件的确定 | 第45-48页 |
| ·培养基不同氮源对产物表达的影响 | 第46页 |
| ·IPTG诱导时机对产物表达的影响 | 第46-47页 |
| ·IPTG诱导浓度对产物表达的影响 | 第47-48页 |
| ·高密度发酵条件的确定 | 第48-50页 |
| ·补料时机及方式的选择 | 第48页 |
| ·诱导时机的选择 | 第48-50页 |
| ·金属螯合亲和层析 | 第50页 |
| ·重组蛋白表观特征与溶解性 | 第50-51页 |
| ·重组蛋白的Western blotting分析 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 4 本章小结 | 第53-55页 |
| 第四章 两种重组蛋白光谱性质的比较 | 第55-65页 |
| 1 材料与方法 | 第55-58页 |
| ·质粒和菌株 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55页 |
| ·主要配制溶液 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-58页 |
| ·自主连接重组表达载体的构建 | 第56-58页 |
| ·自主连接重组蛋白的摇瓶诱导培养 | 第58页 |
| ·自主连接重组蛋白的分离纯化 | 第58页 |
| ·两种重组蛋白的光谱分析 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-63页 |
| ·自主连接重组蛋白表达载体的构建 | 第58-61页 |
| ·重组子酶切鉴定 | 第58-60页 |
| ·测序验证 | 第60-61页 |
| ·自主连接重组蛋白的表达纯化 | 第61页 |
| ·两种重组蛋白光谱性质的比较 | 第61-63页 |
| ·可见光区吸收光谱性质 | 第61-62页 |
| ·荧光光谱性质 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-64页 |
| 4 本章小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-78页 |
| 仪器 | 第78-79页 |
| 在研期间发表和完成论文情况 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |