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番茄果实特异启动子在柑橘中的活性分析及柑橘果实差异表达基因的分离

缩略语表(Abbreviations)第1-9页
摘要第9-11页
第一章 文献综述第11-22页
 1.组织特异启动子的研究现状第11-13页
   ·研究意义和必要性第11页
   ·组织特异启动子的研究现状第11-12页
   ·组织特异启动子在不同植物间的保守性第12页
   ·组织特异启动子在柑橘上的应用第12-13页
 2.差异基因分离的主要方法第13-17页
   ·mRNA差异显示第13-14页
   ·消减杂交第14页
   ·基因表达系列分析第14页
   ·抑制性消减杂交第14页
   ·cDNA-AFLP第14-16页
   ·cDNA芯片第16页
   ·几种差异基因分离方法的比较第16-17页
   ·柑橘差异基因的分离第17页
 3.基因表达定量分析技术第17-19页
   ·Northern杂交第17页
   ·半定量RT-PCR技术第17-18页
   ·实时定量RT-PCR技术第18页
   ·基因表达定量分析技术比较第18-19页
   ·柑橘基因表达分析的应用技术第19页
 4.启动子特异性功能的鉴定技术第19-21页
   ·转基因技术第19-20页
   ·瞬时表达第20页
   ·两种研究方法比较第20-21页
 5.主要研究内容第21-22页
第二章 番茄果实特异启动子2A11的克隆及其在金柑中的瞬时表达第22-38页
 1 材料与方法第23-29页
   ·材料第23-24页
   ·方法第24-29页
 2.结果与分析第29-35页
   ·感受态细胞制备和转化条件优化第29-30页
   ·启动子的克隆鉴定第30页
   ·瞬时表达载体pLZ13的鉴定第30-32页
   ·表达载体质粒纯化第32页
   ·植物表达载体pLZ13中iGUS基因的瞬时表达特性功能鉴定第32-34页
   ·含2A11启动子的植物表达载体pLZ14的鉴定第34页
   ·含2A11启动子的植物表达载体pLZ14瞬时表达结果第34-35页
 3.讨论第35-38页
   ·瞬时表达载体的构建第35-36页
   ·2A11启动子调控GUS基因的瞬时表达研究第36-38页
第三章 应用转基因手段研究番茄2A11启动子在金柑中的活性第38-52页
 1 材料与方法第39-44页
   ·材料第39-40页
   ·方法第40-44页
 2 结果与分析第44-50页
   ·植物表达载体pLZ15及pLZ16构建第44-48页
   ·pLZ15和pLZ16转化金柑第48-50页
 3.讨论第50-52页
   ·适于启动子强度检测的表达载体构建第50页
   ·农杆菌介导的金柑转基因第50-51页
   ·转基因植株检测第51-52页
第四章 利用cDNA-AFLP技术分离脐橙成熟果实特异表达基因第52-71页
 1.材料与方法第53-60页
   ·材料第53-55页
   ·RNA提取第55-56页
   ·mRNA分离第56页
   ·mRNA荧光定量第56-57页
   ·双链cDNA的合成第57-58页
   ·cDNA-AFLP操作流程第58-60页
 2.结果与分析第60-68页
   ·脐橙果实果皮果肉组织RNA的提取第60-61页
   ·cDNA-AFLP技术体系的建立第61-63页
   ·特异片段回收,克隆及测序结果第63-64页
   ·利用荧光实时定量PCR验证cDNA-AFLP分离的差异TDFs第64页
   ·候选特异表达基因在不同发育时期果皮果肉和非果实组织中的表达第64-68页
 3.讨论第68-71页
   ·琼脂糖凝胶电泳第68页
   ·选择性引物组合及其碱基的确定第68-69页
   ·特异片段的分离及序列分析第69-70页
   ·单引物扩增情况第70页
   ·特异表达基因的鉴定第70-71页
结语第71-72页
参考文献第72-78页
ABSTRACT第78-80页
附录 博士学习阶段参加研究课题及发表论文第80-81页
致谢第81页

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