首页--农业科学论文--畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂论文--动物医学(兽医学)论文--兽医基础科学论文--家畜免疫学论文

鸡TLR7基因片段的克隆及在鸡IBDV感染下的半定量RT-PCR检测

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
前言第11-14页
第一章 鸡Toll样受体7基因序列的克隆第14-32页
 1.材料和方法第14-23页
   ·材料第14-17页
     ·主要仪器第14页
     ·实验用动物和饲料第14-15页
     ·菌株、载体第15页
     ·分子生物学试剂和试剂盒第15页
     ·培养基第15-16页
     ·引物第16页
     ·鸡脾脏(法氏囊)淋巴细胞分离用材料第16页
     ·总RNA抽提用材料第16页
     ·CaCl_2法转化用材料第16页
     ·琼脂糖凝胶电泳材料第16-17页
   ·方法第17-23页
     ·鸡脾脏(法氏囊)淋巴细胞的分离第17页
     ·鸡脾脏(法氏囊)淋巴细胞总RNA的抽提第17-18页
     ·RT-PCR扩增ChTLR7基因片段第18-19页
     ·RT-PCR产物的回收纯化第19-20页
     ·chTLR7RT-PCR产物与pGEM-T-easy的连接第20页
     ·连接产物(chTLR7)转化入E.coliDH5α(CaCl_2法)第20-21页
     ·转化克隆的PCR鉴定第21-22页
     ·chTLR7 PCR阳性克隆的序列测定及分析第22-23页
 2.结果第23-29页
   ·chTLR7的RT-PCR扩增结果第23页
   ·转化菌落的PCR鉴定第23-24页
   ·chTLR7基因序列分析第24-29页
 3.讨论第29-30页
 参考文献第30-32页
第二章 半定量RT-PCR检测chTLR7mRNA表达水平第32-53页
 1.材料和方法第32-38页
   ·材料第32-33页
     ·主要仪器第32页
     ·实验用动物及饲料第32页
     ·法贝灵第32页
     ·常用分子生物学试剂和试剂盒第32页
     ·培养基及配制第32页
     ·chβ-actin引物第32页
     ·鸡脾脏和法氏囊淋巴细胞分离用材料第32页
     ·总RNA抽提用材料第32页
     ·CaCl_2法转化用材料第32-33页
     ·琼脂糖凝胶电泳材料第33页
   ·方法第33-38页
     ·动物分组第33页
     ·动物模型的制备第33页
     ·鸡脾脏和法氏囊淋巴细胞的分离第33页
     ·鸡脾脏和法氏囊淋巴细胞总RNA的抽提第33页
     ·RT-PCR扩增chβ-actin基因第33-35页
     ·RT-PCR产物的回收纯化第35页
     ·RT-PCR产物与pUCm-T载体的连接第35-36页
     ·连接产物(chβ-actin)转化E.coli5α(CaCl_2法)第36页
     ·chβ-actin转化克隆的PCR鉴定第36-37页
     ·chβ-actin阳性克隆的序列测定及分析第37页
     ·实验鸡脾脏和法氏囊组织淋巴细胞chTLR7 mRNA表达水平的第37页
     ·统计学处理第37-38页
 2.结果第38-50页
   ·chβ-actin的RT-PCR扩增结果第38-39页
   ·chβ-actin基因序列分析第39页
   ·循环数对PCR产物灰度的影响第39-40页
   ·脾脏、法氏囊组织中chTLR7 mRNA表达水平的PCR鉴定第40-47页
   ·脾脏、法氏囊组织中chTLR7mRNA表达水平的变化第47-50页
 3.讨论第50-53页
参考文献第53-54页
小结第54-55页
文献综述第55-69页
 参考文献第66-69页
附录第69-79页
 附录1:缩写词表及英汉对照第69-70页
 附录2:GenBank登陆的ChTLR7基因的序列第70-73页
 附录3:GenBank登陆的chβ-actin基因序列第73-75页
 附录4:质粒pGEM-T-easy图谱第75-76页
 附录5:质粒pUCm-T载体图谱第76-77页
 附录6:chTLR7基因克隆入pPGEM-easy载体的测序结果chβ-actin基因克隆入pUCm-T载体的测序结果第77-79页
致谢第79-81页

论文共81页,点击 下载论文
上一篇:石化企业关键装置安全评价及其管理系统应用研究
下一篇:人力资源管理系统中数据挖掘的研究与应用