前言 | 第1-16页 |
第一部分 研究背景 | 第16-45页 |
1 细胞间缝隙连接细胞通讯与肿瘤关系的研究进展 | 第16-22页 |
·GJIC的结构及物质基础 | 第16-17页 |
·GJIC的生理功能及GJIC功能的调控 | 第17-20页 |
·GJIC与肿瘤 | 第20-22页 |
·恢复GJIC功能与肿瘤的治疗 | 第22页 |
2. 肿瘤自杀基因治疗的现状与研究发展趋势 | 第22-28页 |
·肿瘤自杀基因疗法概述 | 第23-24页 |
·自杀基因疗法的作用机制 | 第24-27页 |
·肿瘤自杀基因疗法的增效方法 | 第27-28页 |
3. 促进缝隙连接细胞间通讯(GJIC)的中药及其有效成分的研究 | 第28-30页 |
4. 调节GJ的中药及其有效成分对肿瘤自杀基因增效作用的研究 | 第30-31页 |
5. 虎杖中白藜芦醇成分药理作用研究进展 | 第31-36页 |
·白藜芦醇的药理作用 | 第32-33页 |
·白藜芦醇抗肿瘤研究概况 | 第33-36页 |
6. 姜黄中姜黄素成分药理作用研究进展 | 第36-39页 |
·姜黄素的药理作用研究 | 第36-37页 |
·姜黄素抗肿瘤研究概况 | 第37-39页 |
7. 荧光蛋白在分子生物学研究中的应用概况及其在基因治疗中的应用意义 | 第39-45页 |
·GFP的分子结构与发光机制 | 第40-41页 |
·绿色荧光蛋白的修饰 | 第41页 |
·GFP在分子生物学研究中的应用 | 第41-45页 |
第二部分 实验研究 | 第45-96页 |
实验一 白藜芦醇与芹黄素对大鼠肝癌细胞及HSV-tk/GCV系统旁观者效应的影响 | 第45-66页 |
1 材料 | 第45-46页 |
2 方法 | 第46-50页 |
3. 结果 | 第50-63页 |
·大鼠肝癌细胞CBRH7919/tk~-和CBRH7919/tk~+对GCV敏感性 | 第50页 |
·CBRH7919和CBRH7919-tk~+不同混合比例对tk/GCV系统旁观者效应的影响 | 第50-51页 |
·芹黄素(API)对 CBRH7919细胞的作用 | 第51-52页 |
·芹黄素(API)联合tk/GCV系统对大鼠肝癌细胞CBRH7919的杀伤作用 | 第52-53页 |
·白藜芦醇(RES)对CBRH7919细胞的作用 | 第53-54页 |
·白藜芦醇(RES)联合tk/GCV系统对肝癌细胞的杀伤作用 | 第54-58页 |
·白藜芦醇对CBRH7919(10%tk~+/GCV)细胞系统作用的流式细胞仪分析 | 第58-59页 |
·白藜芦醇对大鼠肝癌细胞GJIC的影响 | 第59-63页 |
·GJIC抑制剂对白藜芦醇联合tk/GCV系统对CBRH7919杀伤作用的影响 | 第59-61页 |
·白藜芦醇对大鼠肝癌细胞间荧光染料传输功能的影响 | 第61页 |
·白藜芦醇对CBRH7919细胞Cx43表达的影响(FITC间接免疫荧光法) | 第61-63页 |
4. 讨论 | 第63-66页 |
实验二、姜黄素对肝癌细胞及HSV1-tk/GCV系统旁观者效应的影响 | 第66-79页 |
1. 材料 | 第66页 |
2 方法 | 第66-67页 |
3. 结果 | 第67-77页 |
·姜黄素对CBRH7919细胞的作用 | 第67-68页 |
·姜黄素对tk/GCV系统旁观者效应的影响 | 第68-71页 |
·姜黄素对CBRH7919(10%tk~+/GCV)细胞系统作用的流式细胞仪分析 | 第71-73页 |
·姜黄素对大鼠肝癌细胞GJIC的影响 | 第73-77页 |
·GJIC抑制剂对姜黄素联合tk/GCV系统对CBRH7919杀伤作用的影响 | 第73-75页 |
·姜黄素对肿瘤细胞间荧光染料传输功能的影响 | 第75页 |
·姜黄素对CBRH7919细胞对Cx43表达的影响(FITC间接免疫荧光法) | 第75-77页 |
4. 讨论 | 第77-79页 |
实验三 HSV-tk绿色荧光蛋白融合基因表达载体的构建及表达 | 第79-96页 |
1. 材料 | 第79-81页 |
2 方法 | 第81-86页 |
3. 结果 | 第86-93页 |
·pLXSN-tk与pEGFP-N1质粒的酶切鉴定结果 | 第86-87页 |
·pLXSN-tk经EcoR I/Bam H I双酶切后回收的目的片段经XmaI酶切的电泳结果 | 第87-88页 |
·重组质粒pTKGFP的酶切鉴定 | 第88页 |
·重组质粒pTKGFP的序列测定结果 | 第88页 |
·细胞的转染和基因的表达观察 | 第88-92页 |
·GCV细胞毒实验验证酶活性 | 第92-93页 |
4. 讨论 | 第93-96页 |
第三部分 结语与展望 | 第96-100页 |
参考文献 | 第100-112页 |
附录 | 第112-117页 |
附图1: pTKGFP测序序列图 | 第112-115页 |
附件Ⅰ 本论文中使用的缩略语 | 第115-116页 |
附件Ⅱ 已在学术期刊发表的相关论文 | 第116-117页 |
致谢 | 第117页 |