| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1.前言 | 第12-22页 |
| ·课题的提出 | 第12-13页 |
| ·前人研究进展 | 第13-20页 |
| ·植物原生质体培养 | 第13页 |
| ·植物原生质体遗传转化研究概况 | 第13-18页 |
| ·PEG介导的原生质体转化 | 第14-15页 |
| ·电击穿孔转化 | 第15-16页 |
| ·农杆菌共培养转化 | 第16-17页 |
| ·脂质体介导转化 | 第17-18页 |
| ·其它 | 第18页 |
| ·GFP在遗传转化中的应用 | 第18-20页 |
| ·实验目的及意义 | 第20页 |
| ·研究内容 | 第20-22页 |
| 2.材料方法 | 第22-31页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌株、载体、酶和试剂 | 第22页 |
| ·质粒DNA抽提液配方 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-24页 |
| ·LB培养基 | 第22页 |
| ·无菌苗繁殖培养基 | 第22页 |
| ·原生质体培养各阶段培养基 | 第22-24页 |
| ·实验方法 | 第24-31页 |
| ·无菌苗的培养 | 第24页 |
| ·原生质体的制备 | 第24页 |
| ·原生质体活力检测 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌DH5α菌株感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·SK-gfp转化载体的构建 | 第25-27页 |
| ·质粒DNA的抽提与纯化 | 第27-28页 |
| ·碱裂解法大量制备质粒DNA | 第27-28页 |
| ·质粒DNA检测 | 第28页 |
| ·原生质体转化 | 第28-29页 |
| ·共孵育 | 第29页 |
| ·PEG介导转化 | 第29页 |
| ·电击转化 | 第29页 |
| ·转化后原生质体的培养 | 第29-30页 |
| ·转化子的鉴定 | 第30页 |
| ·实验结果统计方法 | 第30-31页 |
| 3.结果与分析 | 第31-40页 |
| ·SK-gfp质粒载体 | 第31-33页 |
| ·原生质体纯化 | 第33-34页 |
| ·转化后原生质体培养状况 | 第34-36页 |
| ·转化子中绿色荧光蛋白的表达 | 第34页 |
| ·各培养阶段的状态 | 第34-35页 |
| ·愈伤组织形成进程 | 第35-36页 |
| ·共孵育 | 第36-37页 |
| ·质粒DNA浓度对转化效率的影响 | 第36页 |
| ·pBIN m-gfp5-ER和SK-gfp转化效率的比较 | 第36-37页 |
| ·PEG介导的转化 | 第37-38页 |
| ·质粒DNA浓度对转化效率的影响 | 第37页 |
| ·pBIN m-gfp5-ER和SK-gfp转化效率比较 | 第37-38页 |
| ·PEG(12.5％,10min)与PEG(25％,5min)转化效率比较 | 第38页 |
| ·电击转化 | 第38-40页 |
| ·质粒DNA的量对转化效率的影响 | 第38-39页 |
| ·pBIN m-gfp5-ER和SK-gfp转化效率比较 | 第39-40页 |
| 4.讨论 | 第40-43页 |
| ·三种转化方法比较 | 第40页 |
| ·PEG介导的转化 | 第40页 |
| ·外源DNA浓度对转化效率的影响 | 第40-41页 |
| ·外源DNA大小对转化效率的影响 | 第41页 |
| ·原生质体转化后绿色荧光蛋白的表达 | 第41页 |
| ·本转化体系的有效性 | 第41页 |
| ·研究展望 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
