| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| 1 食管鳞癌的研究进展 | 第11-15页 |
| ·食管癌流行病学 | 第11-12页 |
| ·食管癌组织病理学 | 第12页 |
| ·ESCC 分子生物学研究进展 | 第12-15页 |
| ·病毒发病机制 | 第12页 |
| ·肿瘤相关基因的异常表达 | 第12-14页 |
| ·癌基因 | 第13页 |
| ·抑癌基因 | 第13-14页 |
| ·细胞凋亡相关基因 | 第14页 |
| ·表观遗传学 | 第14-15页 |
| 2 转录因子FOXM1 的研究进展 | 第15-19页 |
| ·FOXM1 转录因子的结构 | 第15-16页 |
| ·FOXM1 转录因子活性的调节 | 第16-17页 |
| ·FOXM1 转录因子的生物学功能 | 第17-19页 |
| ·FOXM1 参与器官的形成 | 第17-18页 |
| ·FOXMl 与肿瘤的发生 | 第18-19页 |
| 3 本课题研究目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-34页 |
| 1 材料、试剂和仪器 | 第21-24页 |
| ·细胞株 | 第21页 |
| ·菌株和质粒 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·分子克隆相关试剂 | 第21-22页 |
| ·细胞培养相关试剂 | 第22页 |
| ·Western blot 相关试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·主要试剂配制 | 第23-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-34页 |
| ·免疫印迹(Western blot) | 第24页 |
| ·细胞蛋白质样品的制备 | 第24页 |
| ·免疫印迹实验 | 第24页 |
| ·RT-PCR | 第24-25页 |
| ·细胞内总RNA 的提取 | 第24-25页 |
| ·RT-PCR | 第25页 |
| ·表达载体的构建 | 第25-32页 |
| ·pLKO.1-FOXM1 shRNA 干扰载体的构建 | 第25-28页 |
| ·shRNA 序列的设计 | 第25-26页 |
| ·TOP10 感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·寡核苷酸片断的退火 | 第26-27页 |
| ·pLKO.1 TRC 克隆载体的双酶切、连接 | 第27-28页 |
| ·转化 | 第28页 |
| ·阳性重组子的筛选与鉴定 | 第28页 |
| ·iduet 011a-FOXM1 表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·FOXM1 PCR 引物设计 | 第28页 |
| ·PCR 扩增FOXM1 cDNA 片段 | 第28-29页 |
| ·酶切、连接、转化 | 第29-30页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第30页 |
| ·iduet 011a-N-TAP-FOXM1 表达载体的构建 | 第30-32页 |
| ·引物设计及目的片段的扩增 | 第30-31页 |
| ·酶切、连接、转化 | 第31页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第31-32页 |
| ·细胞培养 | 第32页 |
| ·病毒包装及侵染 | 第32-33页 |
| ·病毒的包装 | 第32页 |
| ·病毒的侵染及稳定株的筛选 | 第32-33页 |
| ·Giemsa 染色观察细胞的形态 | 第33页 |
| ·MTT 检测细胞的增殖能力 | 第33页 |
| ·划痕实验检测细胞的迁移能力 | 第33-34页 |
| 第三章 实验结果 | 第34-44页 |
| 1 表达载体的构建及稳定株的筛选 | 第34-39页 |
| ·FOXM1 干扰载体及其表达载体的构建 | 第34-38页 |
| ·pLKO.1-FOXM1 shRNA 干扰载体的构建和鉴定 | 第34-35页 |
| ·iduet011a-FOXM1 表达载体的构建及鉴定 | 第35-37页 |
| ·RT-PCR 扩增FOXM1 cDNA | 第35-36页 |
| ·iduet011a-FOXM1 重组载体的构建 | 第36-37页 |
| ·iduet011a-N-TAP-FOXM1 重组载体的构建 | 第37-38页 |
| ·FOXM1 表达载体在HEK293T 细胞中的表达 | 第38页 |
| ·pLKO.1-FOXM1 shRNA 干扰TE-1 细胞稳定株的筛选 | 第38-39页 |
| 2 FOXM1 对食管鳞癌细胞增殖和迁移能力的影响 | 第39-44页 |
| ·光学显微镜观察TE-1 细胞形态 | 第39-41页 |
| ·FOXM1 表达量下调抑制TE-1 细胞的增殖 | 第41页 |
| ·FOXM1 表达量下调抑制TE-1 细胞的迁移 | 第41-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 结论与展望 | 第46-47页 |
| 1 结论 | 第46页 |
| 2 展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 发表论文情况 | 第55页 |
