| 第一章 前言 | 第1-24页 |
| ·植酸酶的种类、来源 | 第8-9页 |
| ·植酸酶的种类 | 第8-9页 |
| ·植酸酶的来源 | 第9页 |
| ·植酸酶活性的测定 | 第9-10页 |
| ·植酸酶的活力单位 | 第9页 |
| ·植酸酶活性的测定方法 | 第9-10页 |
| ·植酸酶的作用机理 | 第10-11页 |
| ·植酸酶的研究历史与现状 | 第11-13页 |
| ·植酸酶性质研究的现状 | 第13-17页 |
| ·植酸酶的生化性质的研究 | 第13-14页 |
| ·糖基化的研究 | 第14-15页 |
| ·酶的改造和晶体结构的研究 | 第15-17页 |
| ·巴斯德毕赤酵母(P. pastoris)表达系统简介 | 第17-22页 |
| ·Pichia pastoris 的生物学特性 | 第17-18页 |
| ·毕赤酵母表达外源蛋白的优点 | 第18-19页 |
| ·受体菌株 | 第19-20页 |
| ·分泌表达 | 第20-21页 |
| ·应用前景 | 第21页 |
| ·表达载体 | 第21-22页 |
| ·植酸酶的热稳定性 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-36页 |
| ·实验材料 | 第24-28页 |
| ·菌株与质粒 | 第24页 |
| ·药品,酶与试剂盒 | 第24页 |
| ·培养基与贮备液 | 第24-27页 |
| ·试剂与仪器 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-36页 |
| ·植酸酶(phyA)基因的克隆 | 第28-30页 |
| ·毕赤酵母细胞的转化 | 第30-33页 |
| ·植酸酶基因在毕赤酵母GS115 中的诱导表达 | 第33-34页 |
| ·重组植酸酶(phyA)的纯化 | 第34-35页 |
| ·重组酵母植酸酶性质的研究 | 第35-36页 |
| 第三章 结果 | 第36-49页 |
| ·植酸酶(phyA)基因的克隆 | 第36-38页 |
| ·植酸酶基因的PCR 扩增 | 第36页 |
| ·重组转移载体质粒的构建 | 第36-38页 |
| ·重组酵母的转化,筛选和鉴定 | 第38-41页 |
| ·重组转移载体质粒线性化 | 第38-39页 |
| ·重组酵母的筛选 | 第39-41页 |
| ·重组植酸酶的诱导表达和SDS 鉴定 | 第41-43页 |
| ·重组植酸酶的诱导表达 | 第41-42页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组植酸酶(phyA)的纯化 | 第43-45页 |
| ·重组植酸酶(phyA)的离子交换层析 | 第43-45页 |
| ·酶学性质的测定结果 | 第45-49页 |
| ·酶活性的最适pH | 第45页 |
| ·酶活性的最适温度 | 第45-46页 |
| ·重组植酸酶的热稳定性 | 第46-47页 |
| ·重组植酸酶的动力学参数 | 第47-49页 |
| 第四章 讨论 | 第49-53页 |
| ·p hyA 基因的克隆 | 第49-50页 |
| ·表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·植酸酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第51页 |
| ·重组植酸酶的纯化 | 第51-52页 |
| ·重组植酸酶的性质 | 第52-53页 |
| 第五章 总结 | 第53-57页 |
| 摘 要 | 第57-59页 |
| Abstract | 第59-62页 |
| 致 谢 | 第62-63页 |
| 导师及作者简历 | 第63页 |
| 硕士期间研究成果 | 第63页 |