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应用载体介导的RNAi技术及蛋白质组学方法对Id1基因在H460细胞中的功能及作用通路的初步研究

文献综述第1-31页
 1 细胞周期概述第9-17页
   ·细胞周期检验点及在细胞周期调控中的作用第9-14页
   ·细胞周期中主要调控因子第14-15页
   ·细胞周期与细胞癌变第15-17页
 2 ID 基因与细胞周期增殖调控第17-27页
   ·HLH 蛋白第17-19页
   ·Id 蛋白的结构第19-20页
   ·Id 蛋白与细胞分化第20-21页
   ·Id 蛋白和细胞周期第21-22页
   ·Id 蛋白和凋亡第22页
   ·Id 蛋白和肿瘤发生第22-24页
   ·Id 基因的作用方式和调控模型第24-27页
 3 RNAI 概述第27-31页
   ·RNAi 的发现第27页
   ·RNAi 的特征第27-28页
   ·RNAi 的分子机制第28-29页
   ·RNAi 技术的应用第29-30页
   ·展望第30-31页
前言第31-32页
材料方法第32-47页
 1 材料第32-35页
 2 方法第35-47页
   ·RNAi 体内转录表达载体的构建第35-39页
   ·稳定RNAi 克隆细胞株的获得第39-41页
   ·半定量RT-PCR 检测Id1 基因被沉默的细胞中四种Id 基因的mRNA 水平第41-43页
   ·细胞生长活性的测定第43-44页
   ·流式细胞光度术(FMC)第44页
   ·免疫荧光分析中心体的变化第44页
   ·Western Blotting 分析蛋白表达变化第44页
   ·双向电泳寻找差异表达蛋白第44-45页
   ·质谱分析第45-46页
   ·蛋白的鉴定第46-47页
结果第47-62页
 1 稳定沉默ID基因表达的细胞克隆株的建立:第47-53页
 2 半定量RT-PCR 检测ID1,ID2,ID3,ID4 基因的MRNA 水平第53页
 3 RNAI细胞生长和增殖能力的变化第53-55页
 4 RNAI细胞细胞周期的变化第55-56页
 5 RNAI细胞细胞周期相关因子表达量的变化第56页
 6 RNAI细胞中心体的变化第56-57页
 7 应用蛋白质组学方法寻找 RNAI干扰后差异表达蛋白第57-62页
讨 论第62-67页
结 论第67-68页
参考文献第68-72页
缩略语表第72-73页
致 谢第73-75页
附 录第75-81页

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