| 第1章 引言 | 第1-43页 |
| ·微生物合成的非水溶性脂肪族聚酯——聚羟基脂肪酸酯PHA | 第12-14页 |
| ·PHA 的生物合成途径及其与中心代谢途径的耦联 | 第14-17页 |
| ·PHA 代谢途径中的酶和蛋白质 | 第17-28页 |
| ·PHA 代谢相关基因的克隆方案 | 第18-21页 |
| ·PHA 代谢相关基因的组织形式 | 第21页 |
| ·PHA 合成的关键酶——PHA 聚合酶 | 第21-25页 |
| ·PHA 聚合酶的分类 | 第21-24页 |
| ·对 PHA 聚合酶催化机制的推测 | 第24-25页 |
| ·决定PHA 分子量和组成的因素 | 第25页 |
| ·PHA 生物合成途径中提供前体的酶 | 第25-27页 |
| ·β-酮基硫解酶 | 第25-26页 |
| ·乙酰乙酰辅酶A 还原酶 | 第26页 |
| ·(R)-烯酰辅酶A 水合酶 | 第26页 |
| ·(R)-3-羟基酰基载体蛋白-辅酶A 转酰基酶 | 第26-27页 |
| ·PHA 的工业化生产和基因工程 | 第27-28页 |
| ·PHA 的物化性质 | 第28-30页 |
| ·PHA 的应用 | 第30-35页 |
| ·天然 PHA 的生物学功能 | 第30-31页 |
| ·PHA 作为生物可降解材料的应用 | 第31-32页 |
| ·PHA 在医用材料方面的应用 | 第32-35页 |
| ·组织工程学的研究内容和现状 | 第32-34页 |
| ·PHA 作为组织工程材料的应用 | 第34-35页 |
| ·PHA 单体的研究情况 | 第35-40页 |
| ·PHA 单体的研究历史 | 第36-37页 |
| ·化学降解法获得PHA 单体 | 第37页 |
| ·生物降解法获得PHA 单体 | 第37页 |
| ·PHA 单体的合成 | 第37-38页 |
| ·PHA 单体的应用 | 第38-40页 |
| ·昂贵化合物合成的手性起始原料 | 第39-40页 |
| ·二噁烷 | 第40页 |
| ·内酯、环状寡聚物和接枝聚合物 | 第40页 |
| ·PHA 研究的展望 | 第40-41页 |
| ·论文的目的及意义 | 第41-43页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第43-66页 |
| ·PHB/PHBHHx共混体系表面物化性质分析方法 | 第43-45页 |
| ·PHB/PHBHHx 共混体系膜的制备 | 第43页 |
| ·差示扫描量热法分析PHB/PHBHHx共混体系膜的热性质 | 第43页 |
| ·广角 X-射线衍射法分析PHB/PHBHHx共混体系膜的结晶度 | 第43-44页 |
| ·X-射线光电子能谱分析PHB/PHBHHx共混体系膜的表面化学状态 | 第44页 |
| ·PHB/PHBHHx共混体系膜接触角测量和表面自由能的计算 | 第44-45页 |
| ·PHB/PHBHHx共混体系膜生物相容性分析 | 第45-53页 |
| ·药品及试剂 | 第45-47页 |
| ·常用溶液 | 第47-49页 |
| ·兔关节软骨细胞的分离和培养 | 第49-50页 |
| ·血清总蛋白吸附量的测量 | 第50页 |
| ·细胞粘附量的测量 | 第50-51页 |
| ·细胞形态和胞外基质分析 | 第51-53页 |
| ·苏木精-曙红染色 | 第51-52页 |
| ·DAPI 染色 | 第52页 |
| ·胞外基质中胶原蛋白的免疫荧光检测 | 第52-53页 |
| ·胞外基质中糖胺聚糖的 Alcian Blue 染色 | 第53页 |
| ·PHA 合成代谢途径的分子生物学研究方法 | 第53-62页 |
| ·常用实验材料 | 第53-55页 |
| ·常用酶 | 第53-54页 |
| ·常用缓冲液 | 第54页 |
| ·常用试剂盒 | 第54页 |
| ·常用 DNA 分子量标准 | 第54-55页 |
| ·常用实验方法 | 第55-62页 |
| ·常用培养基 | 第55-57页 |
| ·常规分子生物学操作 | 第57页 |
| ·大肠埃希氏菌的电穿孔转化法 | 第57-58页 |
| ·大肠埃希氏菌的化学转化法 | 第58-59页 |
| ·大肠埃希氏菌S17-1 介导的结合转化法 | 第59页 |
| ·大肠埃希氏菌RNA 的提取 | 第59-60页 |
| ·Wautersia eutropha 的电穿孔转化法 | 第60-61页 |
| ·假单胞菌的电穿孔转化法 | 第61页 |
| ·气相色谱和气相色谱-质谱联用检测 | 第61-62页 |
| ·统计学分析 | 第62页 |
| ·本文使用的菌种和质粒 | 第62-66页 |
| 第3章 PHBHHx 对PHB 表面物化性质的影响 | 第66-79页 |
| ·PHB/PHBHHx 共混体系的热分析 | 第67-69页 |
| ·PHB/PHBHHx 共混体系的结晶度分析 | 第69-71页 |
| ·PHB/PHBHHx 共混体系膜的表面化学状态分析 | 第71-74页 |
| ·PHB/PHBHHx 共混体系膜的表面自由能分析 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| 第4章 PHBHHx 对 PHB 生物相容性的影响 | 第79-93页 |
| ·PHB/PHBHHx 共混体系膜的蛋白质吸附能力 | 第80-81页 |
| ·PHB/PHBHHx 共混体系膜上软骨细胞的粘附与增殖 | 第81-83页 |
| ·PHB/PHBHHx 共混体系膜上软骨细胞的形态与功能 | 第83-84页 |
| ·讨论 | 第84-91页 |
| ·小结 | 第91-93页 |
| 第5章 (R)-3-羟基酰基载体蛋白-辅酶A 转酰基酶基因的克隆 | 第93-109页 |
| ·实验菌株的选择 | 第94-96页 |
| ·(R)-3-羟基酰基载体蛋白-辅酶 A 转酰基酶基因的克隆 | 第96-99页 |
| ·克隆所得DNA 片段的同源性分析 | 第99页 |
| ·新克隆 DNA 片段的功能验证 | 第99-106页 |
| ·表达载体pLZZH13 的构建 | 第99-100页 |
| ·表达载体pLZZH13 表达功能的验证 | 第100-104页 |
| ·新克隆 DNA 片段的功能验证 | 第104-106页 |
| ·讨论 | 第106-107页 |
| ·小结 | 第107-109页 |
| 第6章 利用PhaG 实现从碳水化合物直接合成3-羟基癸酸 | 第109-121页 |
| ·含有phaG 基因表达质粒pLZZGPp 的构建 | 第109-111页 |
| ·在 E. coli HB101 中异源表达 P. putida phaG 基因生产3-羟基癸酸 | 第111-115页 |
| ·E. coli HB101 (pLZZGPp)以不同碳水化合物作为碳源的生长情况 | 第111-112页 |
| ·E. coli HB101 (pLZZGPp)利用不同碳水化合物生产3-羟基癸酸 | 第112-113页 |
| ·E. coli HB101 (pLZZGPp)生长曲线的测量 | 第113页 |
| ·各种培养基条件对3-羟基癸酸合成的综合影响 | 第113-115页 |
| ·讨论 | 第115-120页 |
| ·小结 | 第120-121页 |
| 第7章 硫酯酶II 在PhaG 介导的细菌利用碳水化合物合成PHA/3HA过程中的作用 | 第121-146页 |
| ·硫酯酶 II 在 PhaG 介导的重组 E. coli 生物合成3HD 过程中的作用 | 第122-135页 |
| ·硫酯酶II 基因缺陷型菌株E. coli CH01 的获得 | 第122-127页 |
| ·硫酯酶II 对PhaG 介导E. coli 合成3HD 的影响 | 第127-129页 |
| ·异源表达phaG 基因对重组E. coli 硫酯酶II 活性的影响 | 第129-131页 |
| ·异源表达phaG 基因对重组E. coli tesB 基因转录的影响 | 第131-132页 |
| ·讨论 | 第132-135页 |
| ·在P. putida GPp104 中异源表达tesB 基因造成的影响 | 第135-142页 |
| ·异源表达tesB 基因诱导重组P. putida GPp104 合成3-羟基癸酸 | 第135-136页 |
| ·异源表达tesB 基因对P. putida phaG 基因转录的影响 | 第136-139页 |
| ·培养基中碳氮比对重组P. putida GPp104 (pLZZH09)生产3-羟基癸酸的影响 | 第139-141页 |
| ·讨论 | 第141-142页 |
| ·在硫酯酶II 缺陷型菌株E. coli CH01 中生物合成中长链PHA | 第142-144页 |
| ·小结 | 第144-146页 |
| 第8章 结论 | 第146-151页 |
| ·研究总结 | 第146-149页 |
| ·需要进一步开展的工作 | 第149-151页 |
| 参考文献 | 第151-168页 |
| 致谢与声明 | 第168-169页 |
| 附录 A 论文部分缩略词表 | 第169-171页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第171-174页 |
