| 目录 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-16页 |
| ·TGF-β家族分子在心脏发育中的重要作用 | 第8-12页 |
| ·TGF-β分子促进心脏前体细胞的特化 | 第9页 |
| ·环状心的正常形成需要TGF-β分子参与 | 第9-10页 |
| ·TGF-β分子促进心内膜的表皮向间充质的转化和心脏瓣膜的形成 | 第10-11页 |
| ·TGF-β分子与先天性心脏疾病 | 第11-12页 |
| ·TGF-β信号通路的变化引起心脏的病理改变 | 第12-14页 |
| ·TGF-β可促使心肌肥厚以及其向心衰的转变 | 第12页 |
| ·TGF-β可以促进心脏的纤维化改变 | 第12-14页 |
| ·TGF-β与其他心脏病理 | 第14页 |
| ·研究的目的和意义 | 第14页 |
| ·研究的初步结果 | 第14-16页 |
| 第二章 心肌细胞特异性CRE转基因小鼠的建立 | 第16-23页 |
| ·材料和方法 | 第16-20页 |
| ·工具酶与试剂 | 第16页 |
| ·菌株和载体 | 第16-17页 |
| ·实验动物 | 第17页 |
| ·转基因载体α-MHC-Cre的构建及鉴定 | 第17页 |
| ·受精卵的显微注射 | 第17页 |
| ·小鼠基因组DNA的制备 | 第17页 |
| ·α-MHC-Cre转基因小鼠的基因型鉴定 | 第17-18页 |
| ·α-MHC-Cre转基因小鼠多种组织的总RNA的提取 | 第18页 |
| ·Northern杂交 | 第18-20页 |
| ·结果 | 第20-21页 |
| ·心脏特异性表达Cre重组酶转基因载体(α-MHC-Cre-hGH)载体的构建 | 第20页 |
| ·α-MHC-Cre转基因首建者小鼠的建立 | 第20-21页 |
| ·Cre重组酶在转基因小鼠心脏特异性表达 | 第21页 |
| ·讨论 | 第21-23页 |
| 第三章 CRE重组酶在心肌细胞特异性转基因小鼠中功能的检测 | 第23-31页 |
| ·材料与方法 | 第23-26页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·基因型鉴定 | 第23-24页 |
| ·LacZ染色检测Cre重组酶的功能 | 第24页 |
| ·石蜡包埋、切片及复染 | 第24-25页 |
| ·PCR及Southern杂交检测Cre重组酶的功能 | 第25页 |
| ·Southern杂交 | 第25-26页 |
| ·结果 | 第26-29页 |
| ·α-MHC-Cre和ROSA26双转基因小鼠的获得 | 第26-27页 |
| ·LacZ染色验证Cre重组酶在心脏中介导基因重组 | 第27-28页 |
| ·Cre重组酶的组织分布和功能的进一步验证 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第四章 心脏组织特异性SMAD4基因剔除小鼠的表型分析 | 第31-49页 |
| ·材料和方法 | 第31-36页 |
| ·心肌细胞特异性Smad4基因剔除小鼠的获得和基因型鉴定 | 第31-32页 |
| ·石蜡包埋和HE染色 | 第32页 |
| ·PAS染色 | 第32页 |
| ·Masson染色 | 第32-33页 |
| ·免疫组织化学 | 第33页 |
| ·小鼠心脏组织的透射电子显微镜观察 | 第33-34页 |
| ·成年小鼠心肌细胞的分离和测量 | 第34-35页 |
| ·小鼠心脏超声的检测 | 第35页 |
| ·小鼠颈动脉插管检测血流动力学 | 第35页 |
| ·组织蛋白质的提取 | 第35-36页 |
| ·BCA蛋白浓度测定 | 第36页 |
| ·Western杂交 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-45页 |
| ·基因剔除小鼠心肌组织中Smad4表达水平降低 | 第36-37页 |
| ·Smad4基因剔除小鼠心脏发育无明显异常 | 第37-38页 |
| ·Smad4基因剔除小鼠出现心肌肥厚 | 第38-39页 |
| ·心肌细胞特异性剔除Smad4基因导致心肌细胞尺寸增大 | 第39-40页 |
| ·Smad4基因剔除小鼠晚期出现纤维化改变 | 第40-41页 |
| ·Smad4基因剔除小鼠超微结构的改变 | 第41页 |
| ·Smad4基因剔除小鼠心脏收缩功能受损 | 第41-44页 |
| ·心肌细胞剔除Smad4基因后MEK1-ERK1／2信号通路功能增强 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-49页 |
| ·心肌细胞中剔除Smad4基因未影响心脏的发育过程 | 第45页 |
| ·Smad4基因介导的TGF-β信号与心肌纤维化 | 第45-46页 |
| ·Smad4基因剔除引发心脏猝死的机制 | 第46页 |
| ·Smad4基因剔除后引起心肌肥厚的可能机制 | 第46-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 研究论文英文稿 | 第56-73页 |
| 在读期间发表论著及会议论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
