缩略词表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
前言 | 第11-17页 |
第一部分 MAST技术和16S rRNA靶点的筛选 | 第17-26页 |
摘要 | 第17-18页 |
1 实验材料 | 第18-20页 |
2 实验方法 | 第20-22页 |
·16S rRNA基因的获得及确认 | 第20页 |
·体外转录生成生物素标16S rRNA | 第20页 |
·寡核苷酸文库的设计与合成 | 第20页 |
·rRNA的固定 | 第20-21页 |
·分子杂交获得与16S rRNA结合的寡核苷酸序列 | 第21页 |
·靶点的阐明 | 第21-22页 |
3 实验结果 | 第22-24页 |
4 讨论 | 第24-25页 |
5 总结 | 第25-26页 |
第二部分 靶点有效性的体外验证 | 第26-31页 |
摘要 | 第26页 |
1 实验材料 | 第26-27页 |
2 实验方法 | 第27-28页 |
·反义寡核苷酸和DNAenzyme的设计和合成 | 第27页 |
·采用反义寡核苷酸依赖RNase H体外切割活性分析 | 第27-28页 |
·采用DNAenzyme体外切割活性分析 | 第28页 |
3 实验结果 | 第28-29页 |
4 讨论 | 第29-30页 |
5 总结 | 第30-31页 |
第三部分 靶点有效性的细胞内验证 | 第31-44页 |
摘要 | 第31页 |
1 实验材料 | 第31-32页 |
2 实验方法 | 第32-37页 |
·pET-28a(+)载体的改建 | 第32-34页 |
·16SdRz和16SsRZ序列的设计和目的片段的获得 | 第34-36页 |
·pET-28a(+)-EcoRI-16SdRz和pET-28a(+)-EcoRI-16SsRz重组质粒的获得 | 第36-37页 |
·16SdRz和16SsRz对大肠杆菌生长的抑制 | 第37页 |
3 实验结果 | 第37-42页 |
4 讨论 | 第42-43页 |
5 总结 | 第43-44页 |
第四部分 反义寡核苷酸对细菌生长的抑制 | 第44-48页 |
摘要 | 第44页 |
1 材料和方法 | 第44-45页 |
·材料 | 第44页 |
·方法 | 第44-45页 |
·硫代反义寡核苷酸的设计与合成 | 第44页 |
·大肠杆菌SM101的纯化 | 第44-45页 |
·硫代反义寡核苷酸对大肠杆菌SM101生长抑制的检测 | 第45页 |
2 实验结果 | 第45-46页 |
3 讨论 | 第46-47页 |
4 总结 | 第47-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
文献综述 | 第53-60页 |
附录 | 第60-64页 |
1 生成随机反义寡核苷酸序列的SAS程序和结果 | 第60页 |
2 在读期间发表的论文和综述目录 | 第60-61页 |
3 在读期间发表的论文全文 | 第61-64页 |