摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
引言 | 第12-22页 |
1.研究的目的和意义 | 第12页 |
2.我国水产病原菌菌种保藏研究现状 | 第12-17页 |
3 嗜水气单胞菌的毒力因子特性的研究进展 | 第17-21页 |
4.本论文的主要内容 | 第21-22页 |
第一章 嗜水气单胞菌的毒力因子分布与致病性相关性分析 | 第22-42页 |
第一节 嗜水气单胞菌的鉴定 | 第22-32页 |
1 材料与方法 | 第23-26页 |
·材料 | 第23-25页 |
·实验菌株 | 第23-24页 |
·实验试剂 | 第24页 |
·培养基 | 第24页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-26页 |
·生化鉴定 | 第25页 |
·分子生物学鉴定 | 第25-26页 |
·药敏试验 | 第26页 |
2 结果 | 第26-30页 |
·生化特性 | 第26-27页 |
·16S rDNA 鉴定结果 | 第27-30页 |
·PCR 扩增16S rDNA | 第27页 |
·测序结果及同源性分析 | 第27页 |
·亲缘关系分析 | 第27-30页 |
·抗生素敏感性 | 第30页 |
3 讨论 | 第30-32页 |
第二节 嗜水气单胞菌毒力相关基因的扩增及其分布与致病性的关系 | 第32-42页 |
1 材料与方法 | 第32-38页 |
·材料 | 第32-35页 |
·实验菌株 | 第32页 |
·实验鱼 | 第32页 |
·实验试剂 | 第32-33页 |
·培养基 | 第33-35页 |
·主要仪器设备 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-38页 |
·引物设计 | 第35页 |
·PCR 反应扩增 | 第35-37页 |
·产物测序 | 第37-38页 |
·急性毒性试验 | 第38页 |
2 结果 | 第38-40页 |
·五种毒力基因PCR 扩增结果电泳分析 | 第38-39页 |
·五种毒力基因的序列测定 | 第39-40页 |
·LD50 测定 | 第40页 |
3 讨论 | 第40-42页 |
第二章 嗜水气单胞菌毒力基因在传代过程中的稳定性研究 | 第42-48页 |
1 材料与方法 | 第42-43页 |
·材料 | 第42-43页 |
·实验菌株 | 第42页 |
·实验鱼 | 第42页 |
·实验试剂 | 第42页 |
·培养基 | 第42-43页 |
·主要仪器设备 | 第43页 |
·实验方法 | 第43页 |
·培养 | 第43页 |
·传代 | 第43页 |
·DNA 的提取及纯化 | 第43页 |
·毒力基因的检测 | 第43页 |
·传代过程中菌株LD50 的测定 | 第43页 |
2 结果 | 第43-46页 |
·传代过程中5 种毒力基因分布的变异结果 | 第43-46页 |
·10 株嗜水气单胞菌在传代过程中5 种毒力基因的PCR 扩增结果 | 第43-45页 |
·10 株嗜水气单胞菌在传代过程中五种毒力基因的遗传稳定性 | 第45-46页 |
·传代过程中菌株LD50 的变化结果 | 第46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
第三章 嗜水气单胞菌毒力基因在保藏过程中的稳定性研究 | 第48-56页 |
1.材料和方法 | 第48-50页 |
·材料 | 第48-49页 |
·实验菌株 | 第48页 |
·实验鱼 | 第48页 |
·实验试剂 | 第48页 |
·培养基 | 第48页 |
·主要仪器设备 | 第48-49页 |
·实验方法 | 第49-50页 |
·培养 | 第49页 |
·菌株的保藏 | 第49页 |
·DNA 的提取及纯化 | 第49页 |
·毒力基因的检测 | 第49页 |
·保藏过程中菌株LD50 的测定 | 第49-50页 |
2.结果 | 第50-54页 |
·嗜水气单胞菌在不同保藏时间段内毒力基因的分布及LD50 值 | 第50-53页 |
·不同菌株在斜面保藏过程中毒力基因的分布及LD50 值 | 第50-51页 |
·不同菌株在斜面保藏过程中LD50 值的变化及其与毒力基因分布的关系 | 第51-53页 |
·嗜水气单胞菌在不同的保藏方法保藏过程中毒力基因的分布及LD50 值 | 第53-54页 |
·同一株嗜水气单胞菌在不同保藏过程中毒力基因的分布及LD50 值 | 第53-54页 |
·不同保藏过程中LD50 值的变化趋势及其与毒力基因分布的关系 | 第54页 |
3.讨论 | 第54-56页 |
第四章 保存温度和培养基对嗜水气单胞菌毒力基因稳定性影响 | 第56-61页 |
1.材料和方法 | 第56-57页 |
·材料 | 第56-57页 |
·实验菌株 | 第56页 |
·实验试剂 | 第56页 |
·培养基 | 第56-57页 |
·主要仪器设备 | 第57页 |
·实验方法 | 第57页 |
·培养 | 第57页 |
·菌株的保藏方法 | 第57页 |
·DNA 的提取及纯化 | 第57页 |
·毒力基因的检测 | 第57页 |
2.结果 | 第57-59页 |
3.讨论 | 第59-61页 |
小结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
附录 | 第68-70页 |
致谢 | 第70-71页 |