中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-16页 |
文献综述 | 第16-45页 |
第一章 MD的研究进展 | 第16-26页 |
·历史 | 第16页 |
·病原研究 | 第16-18页 |
·MDV的分类地位 | 第16-17页 |
·MDV的血清型 | 第17页 |
·3 MDV的形态结构 | 第17-18页 |
·理化特性 | 第18页 |
·流行病学 | 第18-19页 |
·易感动物 | 第18页 |
·传染源与传播途径 | 第18-19页 |
·MD的临床症状及病理变化 | 第19-20页 |
·临床症状 | 第19-20页 |
·剖检病变 | 第20页 |
·MD的发病机理 | 第20-21页 |
·生产性-限制性感染 | 第20-21页 |
·潜伏感染 | 第21页 |
·后期溶细胞性感染 | 第21页 |
·转化感染 | 第21页 |
·MD的诊断 | 第21-23页 |
·病毒分离 | 第21-22页 |
·病毒的鉴定 | 第22页 |
·血清学诊断 | 第22-23页 |
·分子生物学诊断技术 | 第23页 |
·MD的治疗和防制 | 第23-26页 |
·治疗 | 第23页 |
·预防 | 第23-26页 |
第二章 MDV分子生物学研究进展 | 第26-33页 |
·MDV的基因组 | 第26-27页 |
·MDV编码的蛋白 | 第27-30页 |
·病毒编码的酶类 | 第27-28页 |
·病毒编码的抗原 | 第28页 |
·病毒编码的其他蛋白 | 第28-30页 |
·MDV致肿瘤基因的研究 | 第30-33页 |
·meq基因 | 第31页 |
·132bp重复序列 | 第31-32页 |
·pp38基因 | 第32-33页 |
第三章 MD感染与肿瘤发生的免疫学研究 | 第33-40页 |
·MDV的感染 | 第33页 |
·MD淋巴瘤的发生 | 第33-36页 |
·MD淋巴瘤发生的靶细胞研究 | 第33-34页 |
·影响 MDV感染中细胞转化的因素 | 第34-36页 |
·MD肿瘤发生的研究 | 第36-37页 |
·免疫监视的逃避 | 第36页 |
·抗原特异性缺乏 | 第36页 |
·免疫抑制 | 第36-37页 |
·MDV致瘤机制的研究 | 第37-38页 |
·MD疫苗抗肿瘤作用的研究 | 第38-40页 |
第四章 马立克病肿瘤相关表面抗原的研究进展 | 第40-45页 |
·MATSA的分布 | 第40-41页 |
·MATSA的分离和纯化 | 第41-42页 |
·MATSA的理化特性 | 第42-43页 |
·MATSA的抗体 | 第43-45页 |
实验研究 | 第45-87页 |
第五章 MD肿瘤细胞表面 MATSA的提取与鉴定 | 第45-55页 |
·材料 | 第45-46页 |
·试验动物 | 第45页 |
·毒株 | 第45页 |
·MSB1细胞 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45-46页 |
·主要仪器设备 | 第46页 |
·方法 | 第46-49页 |
·CEF的制备 | 第46页 |
·MDV复壮 | 第46页 |
·雏鸡人工感染 | 第46页 |
·MD肿瘤组织的采取 | 第46页 |
·MATSA的提取 | 第46-47页 |
·Brodard微量法测定蛋白浓度 | 第47页 |
·抗MATSA 兔血清制备 | 第47-48页 |
·MATSA的鉴定 | 第48-49页 |
·结果 | 第49-53页 |
·MDV复壮 | 第49页 |
·雏鸡人工感染 | 第49-51页 |
·蛋白质浓度测定 | 第51-52页 |
·微量凝集试验结果 | 第52页 |
·悬浮细胞 ELISA结果 | 第52页 |
·MATSA的鉴定 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53页 |
·小结 | 第53-55页 |
第六章 MSB1细胞表面 MATSA的分离鉴定与纯化 | 第55-65页 |
·材料 | 第55-56页 |
·MSB1细胞 | 第55页 |
·主要试验 | 第55页 |
·主要仪器设备 | 第55-56页 |
·方法 | 第56-60页 |
·MSB1细胞的培养 | 第56页 |
·MATSA的提取 | 第56页 |
·MATSA的鉴定 | 第56页 |
·MATSA蛋白浓度测定 | 第56页 |
·MATSA的纯化 | 第56-57页 |
·收集峰的蛋白质 SDS-PAGE分析 | 第57-60页 |
·结果 | 第60-63页 |
·MSB1的培养 | 第60页 |
·MATSA的鉴定 | 第60-61页 |
·粗提的 MATSA蛋白浓度测定 | 第61页 |
·MATSA的纯化 | 第61-62页 |
·收集峰蛋白质的 SDS-PAGE分析 | 第62-63页 |
·讨论 | 第63-64页 |
·小结 | 第64-65页 |
第七章 MATSA抗体间接 ELISA检测方法条件的筛选 | 第65-76页 |
·材料 | 第65-68页 |
·主要试剂 | 第65-67页 |
·主要器材 | 第67页 |
·实验动物 | 第67-68页 |
·方法 | 第68-69页 |
·抗原准备 | 第68页 |
·抗体准备 | 第68页 |
·间接 ELISA条件的筛选 | 第68-69页 |
·MATSA间接 ELISA操作步骤 | 第69页 |
·结果 | 第69-73页 |
·包被条件的确定 | 第69-70页 |
·封闭条件的确定 | 第70页 |
·抗原最佳包被浓度的确定 | 第70-71页 |
·抗原包被酶标板保存期 | 第71页 |
·血清稀释度的确定 | 第71页 |
·酶标二抗作用时间的确定 | 第71-72页 |
·酶标二抗稀释度的确定 | 第72页 |
·底物作用时间的确定 | 第72-73页 |
·终止液浓度的确定 | 第73页 |
·洗涤方式的确定 | 第73页 |
·讨论 | 第73-75页 |
·固相载体 | 第73页 |
·包被 | 第73-74页 |
·封闭 | 第74页 |
·抗原包被浓度 | 第74页 |
·血清稀释度 | 第74页 |
·酶标抗体的稀释度 | 第74-75页 |
·洗涤 | 第75页 |
·小结 | 第75-76页 |
第八章 MATSA单克隆抗体的研制 | 第76-87页 |
·材料 | 第76-77页 |
·主要试剂 | 第76页 |
·培养基及主要溶液 | 第76页 |
·骨髓瘤细胞 | 第76-77页 |
·试验动物 | 第77页 |
·主要器材 | 第77页 |
·方法 | 第77-80页 |
·小鼠免疫 | 第77页 |
·饲养细胞的制备 | 第77页 |
·骨髓瘤细胞的制备 | 第77页 |
·脾细胞制备 | 第77-78页 |
·细胞融合及培养观察 | 第78页 |
·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第78页 |
·阳性孔杂交瘤细胞克隆化 | 第78-79页 |
·克隆化阳性孔的单克隆培养 | 第79页 |
·细胞的冻存 | 第79-80页 |
·抗体分泌稳定性检测 | 第80页 |
·腹水的制备 | 第80页 |
·单克隆抗体效价测定 | 第80页 |
·单克隆抗体相对亲和力测定 | 第80页 |
·结果与分析 | 第80-85页 |
·免疫小鼠的抗体测定结果 | 第80-81页 |
·细胞融合及培养观察 | 第81-82页 |
·阳性杂交瘤细胞的筛选、克隆 | 第82-83页 |
·杂交瘤细胞抗体分泌稳定性检测结果 | 第83页 |
·MATSA单克隆抗体效价测定结果 | 第83-84页 |
·单克隆抗体相对亲和力测定 | 第84-85页 |
·讨论 | 第85-86页 |
·单克隆抗体的优点 | 第85页 |
·抗原性质对单克隆抗体制备的影响 | 第85页 |
·免疫程序对单克隆抗体制备的影响 | 第85页 |
·关于单克隆抗体制备中的检测方法 | 第85-86页 |
·单克隆抗体的亲和力测定 | 第86页 |
·小结 | 第86-87页 |
结论 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-101页 |
作者简介 | 第101页 |