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花生白藜芦醇合酶基因表达载体构建及黄瓜遗传转化体系的初步研究

内容提要第1-4页
Abstract第4-6页
目录第6-10页
第一章 引言第10-28页
   ·芪合酶基因第10-17页
     ·银松素合酶基因第10-13页
     ·白藜芦醇合酶基因第13-17页
       ·花生RS基因第14-16页
       ·葡萄白藜芦醇合酶基因第16-17页
       ·其它植物芪合酶基因的研究第17页
   ·芪合酶基因启动子第17-20页
     ·银松素合酶基因的启动子第17-18页
     ·白藜芦醇合酶基因启动子第18-20页
   ·芪合酶基因的诱导表达第20-25页
     ·银松素合酶基因的诱导第20-21页
     ·花生白藜芦醇合酶基因的诱导第21-22页
     ·葡萄白藜芦醇合酶基因的诱导第22-25页
   ·芪合酶基因的转基因植物表达第25-27页
     ·花生白藜芦醇合酶基因的转基因植物研究第25-26页
     ·葡萄芪合酶基因的转基因植物研究第26-27页
   ·本研究的目的与意义第27-28页
第二章 花生白藜芦醇合酶基因转化双子叶植物表达载体的构建第28-50页
   ·以pBI为表达载体的花生白藜芦醇合酶基因重组质粒的构建第28-39页
     ·实验材料第28页
     ·实验方法第28-35页
       ·DUCRSH1质粒第28-29页
       ·pBI表达载体第29页
       ·表达载体的构建第29-30页
       ·pUCRSH1与pBI质粒提取第30-31页
       ·pUCRSH1与pBI质粒酶切第31-33页
       ·pUCRSH1与pBI质粒酶切片段的纯化第33-34页
       ·pBI载体片段与pUCRSH1目的片段连接第34页
       ·JM109感受态细胞的制备第34-35页
       ·连接产物转化JM109感受态细胞第35页
       ·重组质粒菌液保存第35页
     ·结果与分析第35-39页
       ·pUCRSH1与pBI质粒质粒酶切第35-37页
       ·pBI载体片段与pUCRSH1目的片段纯化第37页
       ·pUCRSH1目的片段与pBI载体片段纯化后电泳第37-38页
       ·pBI-RS重组质粒的检测第38-39页
   ·以pBI121为表达载体的重组质粒构建第39-47页
     ·实验材料第39页
     ·实验方法第39-43页
       ·质粒pUCRSH2第39-40页
       ·表达载体pBI121第40页
       ·表达载体的构建第40-41页
       ·pUCRSH2与pBI121质粒提取第41页
       ·pUCRSH2与pBI121质粒酶切第41-42页
       ·pUCRSH2与pBI121质粒酶切片段的纯化第42页
       ·pBI121载体片段与pUCRSH2目的片段连接第42页
       ·JM109感受态细胞的制备第42页
       ·连接产物转化JM109感受态细胞第42-43页
       ·保存菌液第43页
     ·结果与分析第43-47页
       ·pUCRSH2与pBI121质粒酶切第43-44页
       ·pUCRSH2与pBI121质粒酶切片段纯化第44-45页
       ·pUCRSH2与pBI121质粒酶切片段纯化后电泳第45页
       ·重组质粒的检测第45-47页
   ·讨论第47-50页
     ·限制性内切酶的选择第47-48页
     ·克隆菌株的选择第48-49页
     ·重组质粒的检测第49-50页
第三章 花生白藜芦醇合酶重组质粒转化农杆菌第50-54页
   ·实验材料第50页
   ·实验方法第50-51页
     ·农杆菌LBA4404感受态细胞制备第50页
     ·重组质粒转化农杆菌第50-51页
     ·转化农杆菌双元载体中Mini-Ti质粒的提取第51页
   ·结果与分析第51-53页
   ·讨论第53-54页
第四章 黄瓜离体子叶不定芽高频再生体系建立及其遗传转化初步研究第54-64页
   ·黄瓜离体子叶不定芽高频再生体系研究第54-61页
     ·实验材料第54页
     ·实验方法第54-56页
       ·黄瓜种子表面消毒第54-55页
       ·外植体选择第55页
       ·不同消毒方法比较第55页
       ·不同生长调节剂对不定芽分化的影响第55页
       ·不同外植体对不定芽分化的影响第55页
       ·不同苗龄对不定芽分化能力的影响第55页
       ·卡那霉素选择压的测定第55-56页
     ·结果与分析第56-61页
       ·不同消毒方法比较第56-57页
       ·不同生长调节剂对不定芽分化的影响第57-58页
       ·苗龄对子叶不定芽分化的影响第58页
       ·子叶不同部位对不定芽分化的影响第58-60页
       ·卡那霉素对子叶不定芽分化的影响第60-61页
   ·农杆菌介导白藜芦醇合酶基因转化黄瓜第61-62页
     ·实验材料第61页
     ·实验方法第61页
       ·摇菌第61页
       ·外植体转化第61页
     ·结果与分析第61-62页
   ·讨论第62-64页
     ·冷藏农杆菌的摇菌第62-63页
     ·种子的消毒方式对出芽率的影响第63页
     ·外植体的不同部位对不定芽分化的影响第63页
     ·抗性苗的继代培养第63-64页
参考文献第64-72页
中文摘要第72-74页

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