| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-63页 |
| 第一节 卵母细胞体外成熟的研究进展 | 第15-36页 |
| 1 哺乳动物卵母细胞体外成熟的研究概况 | 第15-16页 |
| 2 哺乳动物卵母细胞发生、发育和成熟规律及调控机理 | 第16-27页 |
| ·哺乳动物卵泡卵母细胞的发生 | 第16-17页 |
| ·哺乳动物卵泡卵母细胞发育及成熟的一般过程 | 第17-19页 |
| ·减数分裂启动及核网阻滞期 | 第18页 |
| ·卵母细胞生长期 | 第18-19页 |
| ·减数分裂恢复期 | 第19页 |
| ·卵母细胞在MЦ期的停滞 | 第19页 |
| ·哺乳动物卵母细胞体外成熟培养超微结构变化 | 第19-20页 |
| ·哺乳动物卵母细胞生长和成熟过程的分子调控机理 | 第20-27页 |
| ·成熟分裂阻滞 | 第20-22页 |
| ·卵母细胞生长的调控 | 第22-23页 |
| ·成熟分裂恢复 | 第23-27页 |
| 3 卵母细胞体外成熟培养的影响因素 | 第27-36页 |
| ·成熟培养液对卵母细胞的影响 | 第27-29页 |
| ·激素对卵母细胞体外成熟培养的影响 | 第29-30页 |
| ·生长激素和生长因子的作用 | 第30-31页 |
| ·卵泡液和颗粒细胞对卵母细胞体外成熟培养的影响 | 第31-32页 |
| ·卵泡大小和卵丘细胞对卵母细胞体外成熟的影响 | 第32-34页 |
| ·其他添加物对卵母细胞体外成熟培养的影响 | 第34-35页 |
| ·延迟成熟培养 | 第35页 |
| ·其它条件对卵母细胞成熟的影响 | 第35-36页 |
| 第二节 哺乳动物体外受精和早期胚胎体外培养的研究进展 | 第36-52页 |
| 1 精子获能 | 第37-40页 |
| ·精子获能的概念及特点 | 第37-38页 |
| ·精子获能后的变化 | 第38页 |
| ·影响精子获能的因素 | 第38-40页 |
| ·环境因素 | 第38-39页 |
| ·获能液和获能方法 | 第39页 |
| ·影响精子获能的物质 | 第39-40页 |
| 2 体外受精 | 第40-42页 |
| ·体外受精过程 | 第40-41页 |
| ·影响体外受精的因素 | 第41-42页 |
| 3 胚胎培养体系 | 第42-52页 |
| ·体内胚胎和体外胚胎发育的对比 | 第42页 |
| ·胞质的不完全成熟是胚胎早期发育阻滞的主要原因 | 第42-43页 |
| ·能量物质和蛋白质等有机物对胚胎发育的影响 | 第43-48页 |
| ·能量物质对胚胎发育的影响 | 第43-45页 |
| ·蛋白质及生长因子对胚胎发育的影响 | 第45-47页 |
| ·氨基酸及粘多糖对胚胎发育的影响 | 第47-48页 |
| ·抗氧化作用 | 第48-49页 |
| ·培养液及共培养体系对胚胎发育的影响 | 第49-50页 |
| ·培养液对胚胎发育的影响 | 第49页 |
| ·共培养体系对胚胎发育的影响 | 第49-50页 |
| ·物理因素对胚胎发育的影响 | 第50-52页 |
| ·氧气浓度和无机离子及渗透压对胚胎发育的影响 | 第50-51页 |
| ·其它方面的影响 | 第51-52页 |
| 第三节 哺乳动物胚胎干细胞的研究进展及应用前景 | 第52-63页 |
| 1 胚胎干细胞的生物学特性 | 第52-53页 |
| 2 各种动物ES 细胞的研究进展 | 第53-56页 |
| ·小鼠ES 细胞的研究进展 | 第53-54页 |
| ·仓鼠ES 细胞的研究进展 | 第54页 |
| ·牛ES 细胞的研究进展 | 第54-55页 |
| ·猪ES 细胞的研究进展 | 第55-56页 |
| ·羊鼠ES 细胞的研究进展 | 第56页 |
| ·兔ES 细胞的研究进展 | 第56页 |
| ·猴ES 细胞的研究进展 | 第56页 |
| 3 胚胎干细胞的建系方法 | 第56-59页 |
| ·早期胚胎来源及适宜分离培养的时间 | 第56-57页 |
| ·胚胎干细胞分离培养方法 | 第57页 |
| ·全胚胎培养法 | 第57页 |
| ·ICM 培养法 | 第57页 |
| ·克隆法 | 第57页 |
| ·胚胎干细胞鉴定方法 | 第57-58页 |
| ·形态学鉴定 | 第57页 |
| ·免疫学鉴定 | 第57-58页 |
| ·核型分析 | 第58页 |
| ·体内分化试验 | 第58页 |
| ·体外分化试验 | 第58页 |
| ·嵌合体实验 | 第58页 |
| ·胚胎干细胞的冻存及解冻 | 第58-59页 |
| 4 胚胎干细胞的应用前景 | 第59-63页 |
| ·生产克隆动物 | 第59页 |
| ·ES 细胞是基因修饰的高效载体 | 第59-60页 |
| ·生产用于人类器官移植的动物器官 | 第60-61页 |
| ·建立人类遗传病研究的动物模型 | 第61页 |
| ·研究胚胎发育的基因调控 | 第61-63页 |
| 第二章 山羊卵母细胞体外成熟培养 | 第63-73页 |
| 1 材料和方法 | 第63-65页 |
| ·液体 | 第63页 |
| ·操作液 | 第63页 |
| ·成熟培养液 | 第63页 |
| ·山羊卵丘–卵母细胞复合体的收集与培养 | 第63-64页 |
| ·COC 复合体的分级 | 第64页 |
| ·卵母细胞成熟的判定 | 第64-65页 |
| ·受精处理及胚胎培养 | 第65页 |
| ·数据处理 | 第65页 |
| 2 结果 | 第65-69页 |
| ·不同分级卵母细胞的成熟比较 | 第65-67页 |
| ·不同成熟时间对山羊卵母细胞成熟的影响 | 第67页 |
| ·成熟液中添加不同浓度雌激素对山羊卵母细胞成熟的影响 | 第67-68页 |
| ·HT 和β–ME 对卵母细胞成熟的影响 | 第68-69页 |
| ·不同成熟激素对山羊卵母细胞成熟的影响 | 第69页 |
| 3 讨论 | 第69-72页 |
| ·不同分级卵母细胞的成熟分析 | 第69-70页 |
| ·不同成熟时间对山羊卵母细胞成熟的影响 | 第70页 |
| ·成熟液中添加不同浓度雌激素对山羊卵母细胞成熟的影响 | 第70-71页 |
| ·HT 和β–ME 对卵母细胞成熟的影响 | 第71-72页 |
| ·不同成熟激素对山羊卵母细胞成熟的影响 | 第72页 |
| 4 结论 | 第72-73页 |
| 第三章 山羊卵母细胞体外受精方法的研究 | 第73-79页 |
| 1 材料与方法 | 第73-74页 |
| ·卵母细胞采集和成熟 | 第73页 |
| ·体外受精 | 第73-74页 |
| ·受精液 | 第73页 |
| ·精子的准备 | 第73-74页 |
| ·精子获能 | 第74页 |
| ·体外受精 | 第74页 |
| ·受精率的观察 | 第74页 |
| ·胚胎培养 | 第74页 |
| ·胚胎细胞计数 | 第74页 |
| ·数据处理 | 第74页 |
| 2 结果 | 第74-77页 |
| ·肝素、咖啡因和钙离子载体对受精和胚胎发育的影响 | 第74-76页 |
| ·精子的不同处理方法对卵裂率和囊胚率的影响 | 第76-77页 |
| 3 讨论 | 第77-78页 |
| ·肝素、咖啡因和钙离子载体对对山羊精子获能、受精和胚胎发育的影响 | 第77-78页 |
| ·精子的不同处理方法对卵裂率和囊胚率的影响 | 第78页 |
| 4 结论 | 第78-79页 |
| 第四章 山羊胚胎体外培养 | 第79-87页 |
| 1 材料和方法 | 第79-81页 |
| ·山羊卵母细胞体外成熟和受精 | 第79页 |
| ·胚胎培养 | 第79-80页 |
| ·颗粒细胞制备 | 第79-80页 |
| ·输卵管上皮制备 | 第80页 |
| ·胚胎培养 | 第80页 |
| ·囊胚细胞计数 | 第80-81页 |
| 2 结果 | 第81-84页 |
| ·不同共培养系统对受精后胚胎发育的影响 | 第81-82页 |
| ·胚胎培养液中添加BSA、FCS 和不同换液程序对胚胎发育的影响 | 第82-83页 |
| ·不同培养液在共培养系统的支持下对胚胎发育的影响 | 第83-84页 |
| 3 讨论 | 第84-85页 |
| ·不同共培养系统对受精后胚胎发育的影响 | 第84页 |
| ·培养液中添加BSA、FCS 和不同换液程序对胚胎发育的影响 | 第84-85页 |
| ·不同培养液在共培养系统的支持下对胚胎发育的影响 | 第85页 |
| 4 结论 | 第85-87页 |
| 第五章 山羊体外胚胎和体内胚胎的超微结构比较 | 第87-95页 |
| 1 材料和方法 | 第87-88页 |
| ·体内胚胎的生产 | 第87页 |
| ·体外胚胎的生产 | 第87-88页 |
| ·卵母细胞成熟 | 第87页 |
| ·精子体外获能和受精 | 第87-88页 |
| ·试验设计 | 第88页 |
| ·受精卵分组 | 第88页 |
| ·观察内容 | 第88页 |
| ·电镜切片制备 | 第88页 |
| ·电镜切片制作 | 第88页 |
| ·线粒体的观察 | 第88页 |
| 2 结果 | 第88-92页 |
| 3 讨论 | 第92-94页 |
| 4 结论 | 第94-95页 |
| 第六章 山羊胚胎干细胞的分离培养 | 第95-113页 |
| 1 材料 | 第95-96页 |
| ·实验动物 | 第95页 |
| ·主要试剂 | 第95-96页 |
| ·主要设备 | 第96页 |
| 2 方法 | 第96-101页 |
| ·主要溶液配制 | 第96-97页 |
| ·无钙、镁DPBS 缓冲液的配制 | 第96页 |
| ·消化液的配制 | 第96-97页 |
| ·1mol/Lβ—巯基乙酸的配制 | 第97页 |
| ·DMEM 培养液的配制 | 第97页 |
| ·丝裂素—C 溶液的配制 | 第97页 |
| ·0.196明胶溶液的配制 | 第97页 |
| ·LIF 的分装 | 第97页 |
| ·AKP 染色液的配制 | 第97页 |
| ·山羊ES 细胞培养液 | 第97-98页 |
| ·小鼠及山羊胎儿成纤维细胞饲养层的制备 | 第98-100页 |
| ·小鼠胎儿成纤维(MEF)的分离与培养 | 第98页 |
| ·山羊胎儿成纤维(GEF)的分离与培养 | 第98页 |
| ·MET 和GEF 的继代培养 | 第98页 |
| ·MET 和GEF 饲养层的制备 | 第98-100页 |
| ·胚胎的制备 | 第100页 |
| ·体内受精囊胚 | 第100页 |
| ·体外受精囊胚 | 第100页 |
| ·孤雌激活胚 | 第100页 |
| ·山羊ES 细胞的分离与培养 | 第100-101页 |
| ·ICM 的初次代代培养 | 第100页 |
| ·山羊ES 细胞的继代培养 | 第100-101页 |
| ·ES 细胞的鉴定 | 第101页 |
| ·形态学鉴定 | 第101页 |
| ·AKP 染色 | 第101页 |
| ·核型分析 | 第101页 |
| ·体外分化 | 第101页 |
| 3 结果 | 第101-110页 |
| ·山羊ICM 的生长行为 | 第101-103页 |
| ·不同来源的胚胎对山羊ES 细胞分离培养的影响 | 第103页 |
| ·不同饲养层对山羊ES 细胞分离培养的影响 | 第103-105页 |
| ·不同种类血清对山羊ES 细胞分离培养的影响 | 第105-106页 |
| ·不同培养液对山羊ES 细胞分离培养的影响 | 第106页 |
| ·山羊ES 细胞的鉴定 | 第106-110页 |
| ·形态学鉴定 | 第107页 |
| ·AKP 染色 | 第107-108页 |
| ·核型分析 | 第108页 |
| ·体外分化 | 第108-110页 |
| 4 讨论 | 第110-112页 |
| ·胚胎来源及质量对山羊ES 细胞分离培养的影响 | 第110页 |
| ·饲养层对山羊ES 细胞分离培养的影响 | 第110-111页 |
| ·血清对山羊ES 细胞分离培养的影响 | 第111页 |
| ·细胞因子对山羊ES 细胞分离培养的影响 | 第111-112页 |
| ·山羊ES 细胞的鉴定 | 第112页 |
| 5 结论 | 第112-113页 |
| 结论 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-130页 |
| 英文摘要 | 第130-131页 |
