摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
一、 文献综述 | 第9-29页 |
1 植物基因工程的发展 | 第9-16页 |
·植物基因工程的发展概况 | 第9页 |
·植物基因转化受体系统的建立 | 第9-10页 |
·植物转基因的主要方法及原理 | 第10-13页 |
·二十一世纪植物基因工程的研究热点 | 第13-16页 |
2 植物抗逆基因工程的发展 | 第16-22页 |
·第1类胁迫诱导基因在植物抗逆基因工程中的应用 | 第16-19页 |
·第2类胁迫诱导基因在植物抗逆基因工程中的应用 | 第19-22页 |
3 植物抗逆基因工程存在的主要问题与解决方法 | 第22页 |
4 植物基因工程中选择标记基因的安全性问题及应对策略 | 第22-28页 |
·植物基因工程中选择标记基因的安全性问题 | 第22-23页 |
·植物基因工程中选择标记基因的安全性策略 | 第23-28页 |
5 本论文的研究目的和意义 | 第28-29页 |
二、 材料与方法 | 第29-41页 |
1 实验材料 | 第29-31页 |
·植物材料 | 第29页 |
·细菌、质粒和引物 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29页 |
·主要仪器 | 第29页 |
·培养基 | 第29-31页 |
·抗生素和激素 | 第31页 |
2 实验方法 | 第31-41页 |
·E.coli感受态细胞制备和转化 | 第31-32页 |
·双T-DNA植物表达载体的构建 | 第32-35页 |
·玉米幼胚的组织培养 | 第35页 |
·农杆菌工程菌的准备 | 第35-36页 |
·农杆菌介导法转化玉米胚性愈伤组织 | 第36-37页 |
·植物表达载体在玉米胚性愈伤组织中的瞬时表达 | 第37-39页 |
·转基因植株的获得及其分子鉴定 | 第39-41页 |
三、 结果与分析 | 第41-53页 |
1 植物表达载体的构建与转化 | 第41-42页 |
·pBW34-DREB的构建 | 第41页 |
·pBWD-Tnos的构建 | 第41页 |
·pCDMAR-pWDT-Hyg的构建 | 第41页 |
·pCDMARUSOD-Hyg的构建 | 第41页 |
·双T-DAN植物表达载体转化农杆菌 | 第41-42页 |
2 转基因受体系统的建立 | 第42页 |
·胚性愈伤组织的诱导 | 第42页 |
·胚性愈伤组织的继代繁殖 | 第42页 |
3 农杆菌介导法转化玉米胚性愈伤组织 | 第42-45页 |
·植物表达载体在玉米胚性愈伤组织中的稳定表达 | 第42-43页 |
·植物表达载体在玉米胚性愈伤组织中的瞬时表达 | 第43-45页 |
4 转DREB基因再生植株的PCR检测 | 第45-53页 |
四、 讨论 | 第53-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
附录 | 第63-67页 |