甘蔗抗黑穗病性检测SCAR标记的建立
中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
1 前言 | 第9-16页 |
·甘蔗黑穗病的研究现状 | 第9-10页 |
·甘蔗黑穗病菌生理小种研究 | 第9页 |
·甘蔗抗黑穗病性鉴定技术与抗性评价方法 | 第9-10页 |
·甘蔗抗黑穗病性遗传的特点 | 第10页 |
·分子标记技术及标记辅助选择 | 第10-16页 |
·RFLP | 第11页 |
·RAPD | 第11-12页 |
·AFLP | 第12页 |
·SSR | 第12-13页 |
·SCAR标记的特点及其应用 | 第13-14页 |
·目标性状连锁群体的构建方法 | 第14页 |
·甘蔗目标性状连锁标记研究 | 第14-16页 |
2 材料与方法 | 第16-23页 |
·材料 | 第16-17页 |
·供试植物材料 | 第16-17页 |
·实验试剂及仪器设备 | 第17页 |
·菌株和质粒载体 | 第17页 |
·随机引物和特异引物 | 第17页 |
·方法 | 第17-23页 |
·人工接种与抗病性评价方法 | 第17-18页 |
·基因组DNA的提取和纯化 | 第18-19页 |
·DNA浓度、纯度和质量的估测 | 第19页 |
·RAPD标记分析法 | 第19页 |
·多态性DNA片段的回收 | 第19-20页 |
·感受态细胞的制备 | 第20页 |
·目的片段的连接与转化 | 第20-21页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第21-22页 |
·重组质粒的保存 | 第22页 |
·SCAR引物的设计与扩增 | 第22-23页 |
3 结果与分析 | 第23-31页 |
·供试甘蔗材料人工接种鉴定结果 | 第23-24页 |
·甘蔗基因组DNA提取和定性定量分析结果 | 第24页 |
·RAPD反应体系的建立 | 第24-25页 |
·Mg~(2+)浓度对PCR扩增的影响 | 第24-25页 |
·dNTP浓度对PCR扩增的影响 | 第25页 |
·与甘蔗抗感黑穗病基因连锁的RAPD标记的获得 | 第25-26页 |
·特异条带的回收与重扩增 | 第26-27页 |
·连接产物的转化结果 | 第27页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第27-29页 |
·PCR扩增 | 第27-28页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第28-29页 |
·多态性片段测序分析 | 第29-30页 |
·SCAR标记引物的合成及基因组DNA扩增结果 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-33页 |
·RAPD反应条件及反应体系的建立 | 第31页 |
·特异性RAPD标记S700的获得 | 第31页 |
·关于目的片段的克隆及测序 | 第31-32页 |
·RAPD标记转换为SCAR标记的必要性 | 第32页 |
·关于SCAR标记检测 | 第32-33页 |
·关于本研究的特色 | 第33页 |
·关于后续工作 | 第33页 |
5 结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-37页 |
致谢 | 第37页 |