首页--农业科学论文--植物保护论文--病虫害及其防治论文--植物病害及其防治论文--侵(传)染性病害论文

芜菁花叶病毒山东分离物外壳蛋白基因的克隆和序列分析

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-11页
1. 引言第11-33页
 1.1 芜菁花叶病毒的株系划分及分子生物学研究进展第11-19页
  1.1.1 芜菁花叶病毒的株系分化研究第11-16页
  1.1.2 芜菁花叶病毒(TuMV)的分子生物学第16-19页
 1.2 植物抗病毒基因工程研究进展第19-27页
  1.2.1 利用病毒来源的基因获得抗病毒转基因植株第20-25页
  1.2.2 利用非病毒来源的基因获得病毒抗性第25-27页
 1.3 转基因植物中RNA介导的病毒抗性第27-30页
  1.3.1 RNA介导的病毒抗性的特点第27-28页
  1.3.2 RNA介导抗性的分子基础第28-30页
 1.4 本研究的立论依据和主要研究内容第30-33页
2. 材料与方法第33-49页
 2.1 材料第33-34页
  2.1.1 供试植物病毒第33页
  2.1.2 供试植物第33页
  2.1.3 供试传毒介体第33页
  2.1.4 实验菌株及克隆载体质粒第33-34页
  2.1.5 PCR引物第34页
  2.1.6 酶、试剂及仪器第34页
  2.1.7 培养基第34页
 2.2 方法第34-49页
  2.2.1 芜菁花叶病毒山东分离物生物学特性的研究及其归属地位的确立第34-36页
  2.2.2 芜菁花叶病毒(TuMV)的提纯第36-37页
  2.2.3 病毒粒体组织超薄切片观察第37页
  2.2.4 芜菁花叶病毒RNA的提取第37页
  2.2.5 在含有甲醛的凝胶上进行的RNA电泳第37-39页
  2.2.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定病毒外壳蛋白亚基的分子量第39-40页
  2.2.7 芜菁花叶病毒抗血清的制备第40-42页
  2.2.8 免疫球蛋白(IgG)的纯化第42页
  2.2.9 ELISA检测第42-43页
  2.2.10 芜菁花叶病毒山东分离物外壳蛋白基因的克隆第43-49页
3. 结果与分析第49-84页
 3.1 芜菁花叶病毒山东分离物生物学特性的研究第49-52页
  3.1.1 病毒分离物的获得第49-50页
  3.1.2 寄主范围的测定第50-52页
  3.1.3 病毒分离物体外抗性的测定第52页
  3.1.4 蚜虫传毒特性第52页
 3.2 病毒的提纯和粒体大小第52页
 3.3 病毒粒体组织超薄切片观察第52-53页
 3.4 病毒RNA的提取第53页
 3.5 RNA甲醛变性凝胶电泳第53-54页
 3.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定病毒外壳蛋白亚基的分子量第54页
 3.7 TuMV抗血清纯化的免疫球蛋白(IgG)工作浓度的选择第54-55页
 3.8 TuMV抗血清对油菜病汁液灵敏度测定第55-56页
 3.9 RT-PCR扩增TuMV外壳蛋白基因第56-58页
 3.10 质粒pUC19与RT-PCR扩增的CP基因片段的酶切电泳第58-64页
 3.11 外源DNA与质粒载体的连接及重组质粒向大肠杆菌的转化第64-66页
 3.12 重组质粒的酶切鉴定第66-69页
 3.13 cDNA的序列测定第69-76页
 3.14 TuMVCP基因序列同源性比较第76-78页
  3.14.1 TuMV山东分离物核苷酸序列同源性比较第76页
  3.14.2 TuMV山东分离物CP基因核苷酸序列与GenBank中的部分序列的同源性比较第76-78页
 3.15 系统树的绘制第78-84页
4. 讨论第84-88页
 4.1 芜菁花叶病毒山东分离物(TuMV-SD1~6)的株系鉴定第84-85页
 4.2 关于芜菁花叶病毒的提纯问题第85页
 4.3 芜菁花叶病毒及其检测技术第85-86页
 4.4 TuMV的遗传变异第86页
 4.5 TuMVCP基因的克隆与抗病毒育种第86-88页
5. 结论第88-89页
 5.1 芜菁花叶病毒山东分离物(TuMV-SD1~6)的获得及其生物学特性第88页
 5.2 TuMV-SD1~6外壳蛋白基因的克隆和序列分析第88页
 5.3 TuMV-SD1~6CP基因同源性与寄主及地理起源的关系第88-89页
参考文献第89-102页
附录第102-111页

论文共111页,点击 下载论文
上一篇:当代青年思想政治教育创新研究
下一篇:山东地区对流天气的地闪演变和分布特征研究