目录 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第一部分 前言及文献综述 | 第11-25页 |
1.1 国内外香蕉生产、消费概况 | 第11页 |
1.2 香蕉成熟的分子生物学研究 | 第11-18页 |
1.2.1 成熟机理 | 第11-13页 |
1.2.2 香蕉成熟中乙烯的研究 | 第13-15页 |
1.2.3 香蕉成熟中果实软化的研究 | 第15-16页 |
1.2.4 香蕉成熟中糖类、色素和香味物质的研究 | 第16页 |
1.2.5 香蕉成熟中其他的研究 | 第16-17页 |
1.2.6 关于香蕉分子生物学研究的讨论与展望 | 第17-18页 |
1.3 定量PCR技术研究进展 | 第18-20页 |
1.3.1 概述 | 第18页 |
1.3.2 竞争性PCR | 第18-19页 |
1.3.3 关于定量PCR技术的展望 | 第19-20页 |
1.4 Pectate Lyase基因的分子生物学 | 第20-21页 |
1.5 Lectin基因的分子生物学 | 第21-22页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
1.7 本研究的技术路线 | 第24-25页 |
第二部分 香蕉凝集素(Lectin)基因、香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因cDNA片段和DNA片段的克隆与测序 | 第25-48页 |
2.1 材料与试剂 | 第25页 |
2.2 方法 | 第25-37页 |
2.2.1 香蕉果肉总RNA的提取 | 第25-27页 |
2.2.2 成熟度3香蕉果肉cDNA第一链的合成 | 第27页 |
2.2.3 香蕉基因组DNA的提取(CTAB法) | 第27-28页 |
2.2.4 PCR引物的设计与合成 | 第28-29页 |
2.2.5 目的条带的扩增 | 第29-31页 |
2.2.6 目的片段的回收 | 第31页 |
2.2.7 目的片段的克隆 | 第31-33页 |
2.2.8 重组体的筛选与鉴定 | 第33-35页 |
2.2.9 重组子阳性克隆菌的保存 | 第35页 |
2.2.10 目的片段的测序 | 第35页 |
2.2.11 序列的分析 | 第35页 |
2.2.12 GenBank基因登录 | 第35-37页 |
2.3 结果与分析 | 第37-48页 |
2.3.1 香蕉果肉总RNA的提取 | 第37页 |
2.3.2 香蕉基因组DNA的提取 | 第37页 |
2.3.3 四条目的片段的扩增 | 第37-38页 |
2.3.4 重组质粒的酶切鉴定 | 第38-39页 |
2.3.5 重组质粒PCR鉴定 | 第39-40页 |
2.3.6 序列分析 | 第40-47页 |
2.3.7 GenBank基因登录 | 第47页 |
2.3.8 四条片段克隆与测序小节 | 第47-48页 |
第三部分 香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因的表达研究 | 第48-54页 |
3.1 实验材料 | 第48-49页 |
3.1.1 果实的采集与处理 | 第48页 |
3.1.2 根、叶组织的采集与处理 | 第48页 |
3.1.3 香蕉各成熟度的划分 | 第48-49页 |
3.2 实验方法 | 第49-50页 |
3.2.1 香蕉不同组织阶段Total RNA的提取 | 第49-50页 |
3.2.2 香蕉不同组织阶段第一链cDNA的合成 | 第50页 |
3.2.3 香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因表达的定性研究 | 第50页 |
3.2.4 香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因表达的定量研究 | 第50页 |
3.3 实验结果 | 第50-54页 |
3.3.1 香蕉不同组织阶段Total RNA的提取 | 第50-52页 |
3.3.2 香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因表达的定性研究 | 第52页 |
3.3.3 香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因表达的定量研究 | 第52-54页 |
第四部分 香蕉凝集素(Lectin)基因在不同组织、发育阶段的表达研究 | 第54-55页 |
4.1 实验材料 | 第54页 |
4.2 实验方法 | 第54页 |
4.2.1 香蕉不同组织阶段Total RNA的提取及第一链cDNA的合成 | 第54页 |
4.2.2 香蕉凝集素(Lectin)基因表达的定性研究 | 第54页 |
4.3 实验结果 | 第54-55页 |
4.3.1 香蕉凝集素(Lectin)基因表达的定性研究 | 第54-55页 |
第五部分 应用竞争性PCR技术研究香蕉凝集素(Lectin)基因的表达 | 第55-74页 |
5.1 实验方法 | 第55-57页 |
5.1.1 竞争性对照的选取 | 第55页 |
5.1.2 对照质粒PCR的特异性和敏感性的测定 | 第55-56页 |
5.1.3 竞争性PCR | 第56页 |
5.1.4 竞争性PCR的结果统计 | 第56-57页 |
5.2 实验结果 | 第57-74页 |
5.2.1 对照质粒PCR的特异性和敏感性 | 第57-58页 |
5.2.2 竞争性PCR及结果的统计分析 | 第58-74页 |
第六部分 结论与讨论 | 第74-78页 |
参考文献 | 第78-85页 |
附录A 香蕉凝集素(Lectin)基因cDNA片段的测序结果 | 第85-86页 |
附录B 香蕉凝集素(Lectin)基因DNA片段的测序结果 | 第86-88页 |
附录C 香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因eDNA片段的测序结果 | 第88-90页 |
附录D 香蕉果胶裂解酶(Pectate Lyase)基因DNA片段的测序结果 | 第90-93页 |
附录E SAS 6.12程序1的运行完整结果 | 第93-95页 |
附录F SAS 6.12程序2的运行完整结果 | 第95-97页 |
附录G SAS 6.12程序3的运行完整结果 | 第97-99页 |
附录H SAS 6.12程序4的运行完整结果 | 第99-101页 |
附录I SAS 6.12程序5的运行完整结果 | 第101-103页 |
附录J SAS 6.12程序6的运行完整结果 | 第103-105页 |
附录K SAS-6.12程序7的运行完整结果 | 第105-107页 |
致谢 | 第107页 |