| 缩写及代号表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-31页 |
| 一.转基因动物的制作及其技术进步 | 第13-17页 |
| (一) 受精卵显微注射 | 第13-14页 |
| (二) 逆转录病毒感染 | 第14-15页 |
| (三) 胚胎干细胞介导 | 第15-16页 |
| (四) 精子载体法 | 第16-17页 |
| 二、转基因调节序列的选择 | 第17-19页 |
| 三、GH基因及GH转基因鼠的研究 | 第19-21页 |
| 四、转基因的整合 | 第21-23页 |
| 五、转基因的表达 | 第23-24页 |
| 六、转基因动物的遗传规律 | 第24页 |
| 七、转基因动物的研究应用 | 第24-31页 |
| (一) 在基因表达与调控研究中的应用 | 第24-25页 |
| (二) 在免疫系统研究中的应用 | 第25页 |
| (三) 在癌基因及肿瘤研究中的应用 | 第25-26页 |
| (四) 在建立研究人类遗传病模型中的应用及基因治疗 | 第26-27页 |
| (五) 在研究病毒诱导疾病中的应用 | 第27-28页 |
| (六) 在改良家养动物品种中的应用 | 第28-29页 |
| (七) 转基因动物生物反应器 | 第29-31页 |
| 第二章 材料与方法 | 第31-46页 |
| 一、实验材料 | 第31-32页 |
| (一) 实验动物 | 第31页 |
| (二) 主要化学试剂、酶类、生物制品、同位素及培养基 | 第31-32页 |
| (三) 外源基因和菌种 | 第32页 |
| (四) 主要仪器及实验条件 | 第32页 |
| 二.实验方法 | 第32-46页 |
| (一) 转基因鼠制作方法 | 第32-35页 |
| (二) DNA片段的连接和转化 | 第35-36页 |
| (三) 质粒的限制酶切和片段回收 | 第36-37页 |
| (四) 质粒的提取和纯化 | 第37-38页 |
| (五) 组织DNA提取 | 第38-39页 |
| (六) 组织RNA提取 | 第39-40页 |
| (七) DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第40-41页 |
| (八) Southern印迹转移杂交 | 第41-43页 |
| (九) Northern印迹转移杂交 | 第43页 |
| (十) DNA和RNA斑点杂交 | 第43-44页 |
| (十一) CAT活性检测 | 第44页 |
| (十二) BGH基因数和BGH mRNA数测定 | 第44-45页 |
| (十三) ELISA测定转基因鼠血清中BGH | 第45页 |
| (十四) 血清中胰岛素样生长因子(LGF-I)的测定 | 第45-46页 |
| 第三章 实验结果 | 第46-67页 |
| 一、显微注射用外源基因结构的构建及制备 | 第46-48页 |
| 1、pSLB111的构建 | 第46页 |
| 2、pSV2LBGH的基因结构 | 第46页 |
| 3、pSVCATLBGH的构建 | 第46页 |
| 4、pSLB111、pSV2LBGH、pSVCATLBGH的制备 | 第46-48页 |
| 二、带pSLB111、pSV2LBGH、pSVCATLBGH等融合基因结构转基因鼠的生产 | 第48-51页 |
| 三、BGH基因在鼠染色体内的整合 | 第51-57页 |
| 1、点杂交检测F1代转BGH基因鼠 | 第51-52页 |
| 2、Southern印迹杂交检测F1代转BGH基因鼠 | 第52-56页 |
| 3、Southern印迹杂交检测F2代转BGH基因鼠 | 第56-57页 |
| 四、带BGH基因小鼠的快速生长 | 第57-60页 |
| 五、BGH基因在鼠体内的表达检测 | 第60-65页 |
| 1、BGH基因在肝脏中的表达 | 第60页 |
| 2、BGH转基因小鼠血清中生长激素水平的增加 | 第60-61页 |
| 3、MTBGH基因的组织特异性表达 | 第61-64页 |
| 4、转BGH基因鼠血清中IGF-Ⅰ含量变化 | 第64-65页 |
| 六、增强子序列与目的基因的距离对BGH基因转录效率的影响 | 第65-66页 |
| 七、调节序列活性的检测 | 第66-67页 |
| 第四章 讨论 | 第67-84页 |
| 一、BGH转基因鼠的成功建立及意义 | 第67-71页 |
| 二、关于BGH转基因鼠间生长效应的差异问题 | 第71-72页 |
| 三、关于外源基因的整合问题 | 第72-75页 |
| 四、内含子对转基因的表达调控之影响 | 第75-76页 |
| 五、小鼠体内BGH基因的表达及调控 | 第76-79页 |
| 六、关于BGH基因的组织特异性表达问题 | 第79-80页 |
| 七、转基因动物的生殖形为与遗传规律 | 第80-81页 |
| 八、启示、进一步研究的方向及GH转基因鼠可能的应用 | 第81-84页 |
| 总结 | 第84-87页 |
| 参考文献 | 第87-97页 |
| 英文摘要 | 第97-101页 |
