| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-32页 |
| ·高尿酸血症概述 | 第14-15页 |
| ·高尿酸血症的定义 | 第14页 |
| ·高尿酸血症治疗现状 | 第14-15页 |
| ·尿酸酶类药物研究进展 | 第15页 |
| ·尿酸酶概述 | 第15-23页 |
| ·尿酸酶的定义 | 第15-16页 |
| ·尿酸酶的来源 | 第16页 |
| ·人源尿酸酶简介 | 第16页 |
| ·尿酸酶结构研究 | 第16-19页 |
| ·尿酸酶活性中心研究 | 第19-21页 |
| ·尿酸酶催化机理研究 | 第21-22页 |
| ·尿酸酶蛋白性质研究 | 第22-23页 |
| ·尿酸酶应用研究 | 第23页 |
| ·PEG修饰研究进展 | 第23-29页 |
| ·PEG基本性质 | 第23-24页 |
| ·PEG修饰蛋白研究概述 | 第24-26页 |
| ·PEG修饰尿酸酶研究进展 | 第26-29页 |
| ·本课题意义、选题思路和主要研究内容 | 第29-32页 |
| ·本课题意义 | 第29-30页 |
| ·本课题选题思路 | 第30页 |
| ·本课题主要研究内容 | 第30-32页 |
| 第2章 人犬嵌合尿酸酶的构建、筛选和结构功能研究 | 第32-76页 |
| ·前言 | 第32-33页 |
| ·材料 | 第33-37页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第33-34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·基本溶液配制 | 第34-35页 |
| ·菌株和质粒 | 第35页 |
| ·引物序列 | 第35-36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-48页 |
| ·尿酸酶序列比对及进化树分析 | 第37页 |
| ·wCU基因合成 | 第37-38页 |
| ·重组质粒pET3c-wCU构建 | 第38-40页 |
| ·重组质粒pET3c-wCU表达 | 第40-41页 |
| ·重组wCU蛋白纯化 | 第41页 |
| ·重组wCU蛋白性质研究 | 第41-43页 |
| ·人犬嵌合尿酸酶筛选 | 第43-45页 |
| ·同源建模及嵌合尿酸酶结构功能研究 | 第45-46页 |
| ·人犬嵌合尿酸酶蛋白结构确认 | 第46-48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-74页 |
| ·尿酸酶序列比对及进化树分析 | 第48-49页 |
| ·重组质粒pET3c-wCU构建 | 第49-50页 |
| ·wCU蛋白重组表达 | 第50页 |
| ·重组wCU蛋白纯化 | 第50-53页 |
| ·重组wCU蛋白酶学性质研究 | 第53-54页 |
| ·人犬嵌合尿酸酶筛选 | 第54-61页 |
| ·UHC蛋白同源建模及结构功能研究 | 第61-67页 |
| ·UHC蛋白结构研究 | 第67-74页 |
| ·小结 | 第74-76页 |
| 第3章 人犬嵌合尿酸酶PEG修饰研究 | 第76-88页 |
| ·前言 | 第76-77页 |
| ·材料 | 第77-78页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第77-78页 |
| ·主要仪器 | 第78页 |
| ·方法 | 第78-80页 |
| ·修饰条件优化 | 第78-79页 |
| ·mPEG-UHC纯化及纯度检测 | 第79-80页 |
| ·mPEG-UHC结构研究 | 第80页 |
| ·结果与讨论 | 第80-87页 |
| ·修饰条件优化 | 第80-83页 |
| ·mPEG-UHC纯化及纯度检测 | 第83-85页 |
| ·mPEG-UHC结构研究 | 第85-87页 |
| ·小结 | 第87-88页 |
| 第4章 尿酸酶多聚体及PEG Diol与血液清除加快的关系研究 | 第88-107页 |
| ·前言 | 第88-89页 |
| ·材料 | 第89-90页 |
| ·实验动物 | 第89页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第89-90页 |
| ·主要仪器 | 第90页 |
| ·方法 | 第90-93页 |
| ·未修饰rCU多聚体分离及性质鉴定 | 第90-91页 |
| ·5kDa mPEG-SPA制备 | 第91页 |
| ·mPEG-rCUs制备及性质鉴定 | 第91-92页 |
| ·mPEG-rCUs初次药代动力学研究 | 第92页 |
| ·mPEG-rCUs多次药代动力学及免疫学研究 | 第92-93页 |
| ·结果 | 第93-105页 |
| ·未修饰rCU多聚体分离及性质鉴定 | 第93-94页 |
| ·5kDa mPEG-SPA制备 | 第94-95页 |
| ·mPEG-rCUs制备及性质鉴定 | 第95-100页 |
| ·mPEG-rCUs初次药代动力学研究 | 第100页 |
| ·mPEG-rCUs多次药代动力学及免疫学研究 | 第100-105页 |
| ·小结 | 第105-107页 |
| 第5章 mPEG-UHC临床前药理学和安全性研究 | 第107-128页 |
| ·前言 | 第107-108页 |
| ·材料 | 第108-110页 |
| ·实验药物 | 第108页 |
| ·实验动物 | 第108-109页 |
| ·试剂及仪器 | 第109-110页 |
| ·方法 | 第110-117页 |
| ·药效学实验 | 第110-114页 |
| ·药代动力学实验 | 第114-115页 |
| ·大鼠亚长毒实验 | 第115-117页 |
| ·结果与讨论 | 第117-126页 |
| ·药效学实验 | 第117-120页 |
| ·药代动力学实验 | 第120-122页 |
| ·大鼠亚长毒实验 | 第122-126页 |
| ·小结 | 第126-128页 |
| 第6章 结论与展望 | 第128-131页 |
| 参考文献 | 第131-146页 |
| 攻读博士学位期间取得的成果 | 第146-147页 |
| 致谢 | 第147页 |