| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 中英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-21页 |
| ·Calsarcins基因家族的研究概述 | 第10-11页 |
| ·猪骨骼肌肌纤维分化的调控机制 | 第11-16页 |
| ·肌纤维的组成和分类 | 第11-12页 |
| ·骨骼肌纤维类型对猪肉品质的影响 | 第12-13页 |
| ·钙调神经磷酸酶信号途径与骨骼肌纤维类型形成的关系 | 第13-14页 |
| ·Calsarcins基因家族在肌纤维类型形成中的作用 | 第14-16页 |
| ·酵母双杂交系统 | 第16-19页 |
| ·酵母双杂交的原理 | 第16-17页 |
| ·酵母双杂交系统的应用 | 第17-18页 |
| ·酵母双杂交系统的优缺点 | 第18-19页 |
| ·本课题的主要目的和技术路线 | 第19-21页 |
| 第二章 诱饵载体PGBKT7-CS1的构建及验证 | 第21-33页 |
| ·材料 | 第21-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第21-22页 |
| ·常用试剂及试剂盒 | 第22页 |
| ·常用试剂及培养基的配制 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-29页 |
| ·目的片段Calsarcins-1的制备 | 第24-26页 |
| ·诱饵载体的制备 | 第26页 |
| ·诱饵菌株转录活性及毒性的检测 | 第26-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-31页 |
| ·Calsarcin-1基因CDS区的扩增 | 第29页 |
| ·重组质粒的酶切 | 第29-30页 |
| ·pGBKT7载体酶切 | 第30页 |
| ·诱饵载体酶切 | 第30-31页 |
| ·酵母菌株AH109的表型验证 | 第31页 |
| ·DNA-BD融合蛋白毒性及转录活性的检测分析 | 第31页 |
| ·小结与讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 猪肌肉双链cDNA的制备 | 第33-39页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·猪的组织样品 | 第33页 |
| ·常用试剂及试剂盒 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-36页 |
| ·猪肌肉总RNA的提取与检测 | 第33-34页 |
| ·猪肌肉mRNA的分离 | 第34页 |
| ·肌肉文库双链cDNA的合成 | 第34-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-37页 |
| ·猪肌肉组织总RNA电泳结果 | 第36页 |
| ·猪肌肉组织mRNA电泳结果 | 第36-37页 |
| ·双链cDNA的纯化结果 | 第37页 |
| ·小结与讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 酵母双杂交筛选与Calsarcin-1互作的基因 | 第39-49页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·菌株、质粒与载体 | 第39页 |
| ·主要试剂盒 | 第39页 |
| ·培养基及配置 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40-44页 |
| ·用共转化方法筛选与Calsarcin-1互作的基因 | 第40-41页 |
| ·对照菌株的小量转化 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第42-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-45页 |
| ·共转化结果 | 第44页 |
| ·菌落PCR鉴定结果 | 第44-45页 |
| ·AD质粒酶切鉴定结果 | 第45页 |
| ·阳性克隆测序及序列比对结果 | 第45-46页 |
| ·小结与讨论 | 第46-49页 |
| 第五章 小结 | 第49-51页 |
| ·本实验获得的结果 | 第49-50页 |
| ·本实验的创新性 | 第50页 |
| ·本研究的不足之处 | 第50页 |
| ·下一步工作计划 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录1 | 第56-57页 |
| 附录2 | 第57-58页 |
| 附录3 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第59页 |
