| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-44页 |
| ·层孔菌的研究现状 | 第14-28页 |
| ·天然产物抗肿瘤研究进展 | 第28-31页 |
| ·药用真菌产品开发的研究现状 | 第31-33页 |
| ·本文的立项依据、研究内容和意义 | 第33-35页 |
| ·参考文献 | 第35-44页 |
| 第2章 层孔菌发酵菌粉的新药材研制 | 第44-68页 |
| ·引言 | 第44-45页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·菌株与质粒 | 第45页 |
| ·实验动物 | 第45页 |
| ·瘤株 | 第45页 |
| ·药品和试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-52页 |
| ·层孔菌L8的鉴定 | 第46-48页 |
| ·菌种培养 | 第46-47页 |
| ·基因组的提取 | 第47页 |
| ·PCR扩增IS1、IS2和5.8s rDNA | 第47-48页 |
| ·层孔菌L8的发酵工艺优化 | 第48页 |
| ·动物药效学实验 | 第48-49页 |
| ·层孔菌L8的药效成分初步分析 | 第49-51页 |
| ·胞内多糖的提取和测定 | 第49页 |
| ·发酵液中还原糖的测定 | 第49-50页 |
| ·总多酚的提取和测定 | 第50页 |
| ·甘露醇的提取和测定 | 第50-51页 |
| ·蛋白质的提取和测定 | 第51页 |
| ·腺苷的提取和测定 | 第51页 |
| ·数据统计分析 | 第51-52页 |
| ·实验结果 | 第52-63页 |
| ·层孔菌L8的鉴定 | 第52-54页 |
| ·形态鉴定 | 第52页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第52-54页 |
| ·发酵工艺的优化结果 | 第54-62页 |
| ·摇瓶工艺优化 | 第54-60页 |
| ·15L发酵罐的工艺优化 | 第60-62页 |
| ·动物药效学实验的结果 | 第62-63页 |
| ·层孔菌L8的药效成分的初步分析 | 第63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| ·参考文献 | 第65-68页 |
| 第3章 层孔菌抗肿瘤活性评价 | 第68-80页 |
| ·引言 | 第68-69页 |
| ·材料 | 第69-71页 |
| ·药材 | 第69页 |
| ·细胞系 | 第69页 |
| ·药品和试剂 | 第69页 |
| ·主要实验设备 | 第69-71页 |
| ·方法 | 第71-72页 |
| ·提取物的制备 | 第71页 |
| ·细胞培养 | 第71页 |
| ·体外抗肿瘤活性测定 | 第71-72页 |
| ·活性成分的分离纯化 | 第72页 |
| ·化合物的结构鉴定 | 第72页 |
| ·数据统计分析 | 第72页 |
| ·实验结果 | 第72-77页 |
| ·层孔菌的体外抗肿瘤活性评价 | 第72-74页 |
| ·活性成分Hispolon的分离鉴定 | 第74-76页 |
| ·Hispolon的抗肿瘤活性评价 | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| ·参考文献 | 第78-80页 |
| 第4章 Hispolon抗肿瘤的分子机制研究 | 第80-138页 |
| ·Hispolon诱导胃癌细胞死亡的分子机理研究 | 第80-118页 |
| ·引言 | 第80-81页 |
| ·材料 | 第81-83页 |
| ·细胞系 | 第81页 |
| ·药品和试剂 | 第81-83页 |
| ·主要实验设备 | 第83页 |
| ·方法 | 第83-89页 |
| ·细胞培养 | 第83-84页 |
| ·Hispolon对细胞的生长抑制试验 | 第84页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第84-85页 |
| ·Caspase活性的检测 | 第85-86页 |
| ·线粒体膜电位的检测 | 第86页 |
| ·线粒体膜脂质过氧化的检测 | 第86页 |
| ·线粒体膜完整性的检测 | 第86-87页 |
| ·活性氧自由基(ROS)的检测 | 第87页 |
| ·还原型谷胱甘肽(GSH)含量的检测 | 第87页 |
| ·谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性的检测 | 第87-88页 |
| ·蛋白免疫印迹(Western blot)检测目的蛋白的表达 | 第88-89页 |
| ·数据统计分析 | 第89页 |
| ·实验结果 | 第89-117页 |
| ·Hispolon对肿瘤细胞生长的抑制 | 第89-91页 |
| ·Hispolon引发了胃癌细胞SGC-7901发生凋亡 | 第91-95页 |
| ·Hispolon诱导了Caspase依赖性的凋亡 | 第95-98页 |
| ·Hispolon诱导的凋亡是通过线粒体途径介导的 | 第98-102页 |
| ·活性氧自由基(ROS)引发了Hispolon诱导的凋亡 | 第102-110页 |
| ·Hispolon对GSH抗氧化系统的影响 | 第110-115页 |
| ·Hispolon对其它胃癌细胞的影响 | 第115-117页 |
| ·讨论 | 第117-118页 |
| ·Hispolon对化疗药物的增敏作用 | 第118-134页 |
| ·引言 | 第118页 |
| ·材料 | 第118-121页 |
| ·细胞系 | 第118页 |
| ·药品和试剂 | 第118-120页 |
| ·主要实验设备 | 第120-121页 |
| ·方法 | 第121-123页 |
| ·细胞培养 | 第121页 |
| ·药物处理 | 第121页 |
| ·体外细胞生长抑制试验 | 第121-122页 |
| ·活性氧自由基(ROS)的检测 | 第122页 |
| ·还原型谷胱甘肽(GSH)含量的检测 | 第122页 |
| ·数据统计分析 | 第122-123页 |
| ·实验结果 | 第123-132页 |
| ·Hispolon对化疗药物的增敏作用 | 第123-127页 |
| ·Hispolon对化疗药物的增敏机制 | 第127-132页 |
| ·讨论 | 第132-134页 |
| ·参考文献 | 第134-138页 |
| 第5章 结论与展望 | 第138-142页 |
| 本文的创新点 | 第140-141页 |
| 本文的不足及对后续工作的建议 | 第141-142页 |
| 攻读博士学位期间主要的研究成果 | 第142-144页 |
| 致谢 | 第144页 |
