| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 中英文/缩写对照表 | 第8-11页 |
| 目次 | 第11-14页 |
| 1 引言 | 第14-18页 |
| 2 实验仪器与材料 | 第18-20页 |
| ·仪器 | 第18页 |
| ·药物与主要试剂 | 第18-19页 |
| ·实验动物及细胞株 | 第19-20页 |
| 3 实验方法 | 第20-29页 |
| ·小鼠胚胎干细胞常规培养 | 第20-21页 |
| ·原代小鼠胚胎成纤维细胞制备 | 第20页 |
| ·饲养层细胞制备 | 第20-21页 |
| ·ES细胞支持培养 | 第21页 |
| ·小鼠ES细胞体外定向分化为神经细胞培养 | 第21-22页 |
| ·悬滴培养 | 第21页 |
| ·悬浮培养 | 第21-22页 |
| ·贴壁分化培养 | 第22页 |
| ·药物诱导ES细胞分化为神经细胞 | 第22页 |
| ·动物交配及样本收集 | 第22页 |
| ·小鼠海马组织与ES细胞共培养 | 第22-23页 |
| ·逆转录-聚合酶链反应法检测基因表达 | 第23-26页 |
| ·样本制备 | 第23页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第23页 |
| ·RNA浓度测定 | 第23页 |
| ·逆转录 | 第23-24页 |
| ·聚合酶链反应 | 第24-25页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第25-26页 |
| ·免疫细胞化学法检测神经细胞亚型和发育相关蛋 | 第26页 |
| ·流式细胞术定量检测特定阳性细胞 | 第26页 |
| ·Western-blot检测蛋白表达 | 第26-28页 |
| ·JC-1染色线粒体膜电位检测 | 第28页 |
| ·DAPI染色细胞凋亡检测 | 第28页 |
| ·数据分析 | 第28-29页 |
| 4 第一部分:小鼠ES细胞定向分化胆碱能神经及Junctophilin 3,Junctophilin4蛋白表达评价 | 第29-46页 |
| ·实验结果 | 第30-40页 |
| ·小鼠ES细胞定向分化神经细胞表型特征 | 第30-31页 |
| ·小鼠ES细胞分化过程发育依赖性、神经特异性基因/蛋白表达 | 第31-33页 |
| ·小鼠ES细胞分化细胞亚型评价 | 第33-34页 |
| ·小鼠ES细胞分化胆碱能功能形成 | 第34-36页 |
| ·小鼠ES细胞定向分化为神经细胞表达JP-3,JP-4蛋白 | 第36-39页 |
| ·附:大鼠胚脑发育过程中JP3,JP4蛋白表达变化 | 第39页 |
| ·小鼠海马组织和ES细胞共培养 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 5 第二部分:淫羊藿素诱导小鼠ES细胞分化神经细胞的线粒体相关机制研究 | 第46-56页 |
| ·实验结果 | 第47-51页 |
| ·ICT诱导小鼠ES细胞定向分化胆碱能功能神经 | 第47-48页 |
| ·雌激素受体抑制剂对胆碱能神经分化影响 | 第48页 |
| ·ERK抑制剂对胆碱能神经分化影响 | 第48-49页 |
| ·ICT诱导ES细胞定向分化神经细胞线粒体发生膜电位维持 | 第49-50页 |
| ·小鼠ES细胞分化过程中凋亡终端事件评价 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| ·小结 | 第54-56页 |
| 6 总结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 作者简历 | 第62页 |
