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Fe3O4-葡聚糖—抗βHCG抗体磁性纳米载体介导的乙酰肝素酶反义寡核苷酸对绒毛膜癌抑制作用研究

一、中文摘要第1-7页
二、英文摘要第7-16页
三、英文缩略语说明第16-19页
四、论文正文第19-134页
 引言第19-30页
  一.乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)与绒癌第19-20页
  二.Fe_3O_4-葡聚糖-抗β HCG抗体磁性纳米复合物与绒癌第20-23页
  三.Fe_3O_4-葡聚糖-抗β HCG抗体磁性纳米载体介导的Hpa AS-ODN对绒癌的治疗作用第23-24页
  参考文献第24-30页
 第一章 乙酰肝素酶与绒毛膜癌侵袭转移关系的实验研究第30-64页
   ·前言第30-31页
   ·实验材料第31-36页
     ·实验对象第31-32页
     ·主要仪器及设备第32-33页
     ·主要试剂及原料第33-36页
   ·实验方法第36-49页
     ·细胞培养第36-37页
     ·噻唑盐比色实验(即MTT法)检测绒癌JEG-3细胞和JAR细胞之间增殖能力的差异第37页
     ·Matrigel体外侵袭试验(Matrigel Invasion Assay)检测绒癌JEG-3细胞和JAR细胞之间侵袭能力的差异第37-40页
     ·RT-PCR方法检测绒癌-3细胞、JAR细胞和正常早孕绒毛组织之间Hpa mRNJEGA表达的差异第40-43页
     ·western-blot方法检测绒癌JEG-3细胞、JAR细胞和正常早孕绒毛组织之间Hpa蛋白表达的差异第43-47页
     ·免疫化学方法检测Hpa蛋白在绒癌JEG-3细胞、JAR细胞和正常早孕绒毛组织内的定位情况第47-49页
   ·统计学处理第49页
   ·结果第49-55页
     ·MTT法检测绒癌JEG-3细胞和JAR细胞增殖能力的差异第49-50页
     ·Matrigel体外侵袭试验检测绒癌JEG-3细胞和JAR细胞之间侵袭能力的差异第50-51页
     ·RT-PCR方法检测绒癌JEG-3细胞、JAR细胞和正常早孕绒毛组织之间Hpa mRNA表达的差异第51-52页
     ·Western-blot检测绒癌JEG-3细胞、JAR细胞和正常早孕绒毛组织之间Hpa蛋白表达的差异第52-53页
     ·免疫化学技术检测Hpa在绒癌JEG-3细胞、JAR细胞和正常早孕绒毛组织内的定位情况第53-54页
     ·Hpa mRNA和蛋白表达与绒癌细胞侵袭力相关性分析第54-55页
   ·讨论第55-59页
     ·Hpa结构和功能第55页
     ·滋养层细胞的侵袭第55-57页
     ·绒癌细胞侵袭力的鉴定第57-58页
     ·Hpa的表达与绒癌侵袭力之间的关系第58-59页
   ·小结第59页
  参考文献第59-64页
 第二章 Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的制备及其相关性质的研究第64-100页
   ·前言第64-66页
   ·实验材料第66-69页
     ·细胞株第66页
     ·动物第66页
     ·主要仪器及设备第66-67页
     ·主要试剂及原料第67-69页
     ·寡核苷酸序列第69页
   ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的制备及其特性的测定第69-70页
     ·Fe3O4-葡聚糖磁性纳米颗粒的制备及其醛基化第69页
     ·Fe3O4-葡聚糖磁性纳米颗粒与鼠抗人βHCG单克隆抗体的生物偶联第69页
     ·透射电镜观察Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的形态第69-70页
     ·激光粒度检测仪测定粒径第70页
     ·原子吸收光谱分析仪检测Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物中铁的含量第70页
   ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的体外实验第70-77页
     ·细胞培养第70-71页
     ·噻唑盐比色实验(即MTT法)检测Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的细胞毒性第71页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物免疫特性鉴定第71-74页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物与基因的结合分析第74-75页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的DNase I消化实验第75页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物介导的基因转染效率的鉴定第75-77页
     ·不同细胞对Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体-Hpa AS-ODN复合物摄入情况的鉴定第77页
   ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的体内实验第77-78页
     ·绒毛膜癌裸鼠移植瘤的建立第77页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物在裸鼠体内分布的研究第77-78页
   ·统计学处理第78-79页
   ·结果第79-88页
     ·Fe_3O_4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物粒径及形态第79-80页
     ·Fe_3O_4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物中铁的含量第80页
     ·Fe_3O_4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的细胞毒性第80-81页
     ·Fe_3O_4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的免疫特性第81-83页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物与基因的结合分析第83-84页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的基因保护实验第84-85页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物介导的基因转染效率第85-86页
     ·不同细胞对Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体-Hpa AS-ODN复合物的摄入情况第86-87页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物在裸鼠体内的分布第87-88页
   ·讨论第88-94页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的制备原理及其物理特性第89-91页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的生物相容性第91页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的免疫特性第91-92页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物介导的基因转染第92-93页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体磁性纳米复合物的靶向性第93-94页
   ·小结第94-95页
  参考文献第95-100页
 第三章 Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体介导的乙酰肝素酶反义寡核苷酸对绒癌抑制作用的研究第100-134页
   ·前言第100-102页
   ·实验材料第102-107页
     ·细胞株第102页
     ·动物第102页
     ·主要仪器及设备第102-103页
     ·主要试剂及原料第103-107页
   ·实验方法第107-119页
     ·细胞培养第107-108页
     ·Fe3O4-葡聚糖-抗βHCG抗体-Hpa AS-ODN或NS-ODN复合物的制备及细胞转染第108页
     ·噻唑盐比色实验(即MTT法)检测绒癌JEG-3细胞转染前后增殖能力的变化第108-109页
     ·Matrigel体外侵袭试验(Matrigel Invasion Assay)检测绒癌JEG-3细胞转染前后侵袭能力的变化第109-111页
     ·RT-PCR方法检测绒癌JEG-3细胞转染前后Hpa mRNA表达的变化第111-115页
     ·western-blot方法检测绒癌JEG-3细胞转染前后Hpa蛋白表达的变化第115-118页
     ·Hpa AS-ODN对绒癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用第118-119页
   ·统计学处理第119页
   ·结果第119-126页
     ·MTT法检测绒癌JEG-3细胞转染前后增殖能力的变化第119-120页
     ·Matrigel体外侵袭试验检测绒癌JEG-3细胞转染前后侵袭能力的变化第120-122页
     ·RT-PCR方法检测绒癌JEG-3细胞转染前后Hpa mRNA表达的变化第122-123页
     ·Western-blot检测绒癌JEG-3细胞转染前后Hpa蛋白表达的变化第123-125页
     ·Hpa AS-ODN对绒癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响第125-126页
   ·讨论第126-129页
   ·小论第129页
  参考文献第129-134页
五、综述第134-153页
六、致谢第153-154页
七、攻读学位期间已发表论文及参加的课题第154-156页

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