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重组乙肝表面S抗原在CHO-K1细胞中的表达、克隆筛选

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-7页
第一章 文献综述第7-21页
   ·乙型肝炎简介第7-8页
   ·乙型肝炎病毒第8-10页
     ·HBV研究进展历程第8页
     ·乙型肝炎病毒第8-10页
   ·乙型肝炎疫苗第10-13页
     ·乙型肝炎疫苗的发展第10-11页
     ·新型乙肝疫苗第11-13页
   ·基因工程药物表达系统第13-16页
     ·原核表达系统第13-14页
     ·真核表达系统第14-16页
   ·基因转移系统第16-21页
     ·病毒载体转移体系第17页
     ·非病毒转移体系第17-21页
第二章 材料和方法第21-34页
   ·实验材料第21-25页
     ·细胞和菌株第21页
     ·分子生物学常用溶液第21-22页
     ·细胞培养常用溶液及相关试剂溶液第22-23页
     ·主要生化试剂第23-24页
     ·主要实验仪器第24-25页
   ·实验方法第25-34页
     ·SDS碱裂解法小量制备质粒实验第25页
     ·大提质粒实验第25页
     ·细胞培养实验第25-27页
     ·HBsAg pAb(IgG)的生物素化第27-28页
     ·表达上清中HBsAg ELISA检测实验第28页
     ·磷酸钙介导的基因转染实验第28-29页
     ·PEI介导的基因转染预实验(24 孔板)第29-30页
     ·PEI介导的基因转染实验(6 孔板)第30-31页
     ·MTT法检测细胞存活率实验第31页
     ·PEI对CHO-K1 细胞毒性测定实验第31-32页
     ·G418 筛选预实验-确定最佳筛选浓度实验第32页
     ·基因转染后的 CHO-K1-S1 高表达筛选实验第32-34页
第三章 实验结果和讨论第34-62页
   ·质粒的提取第34-37页
     ·pS-1 质粒的提取第34-35页
     ·pcDNA-S-1 质粒的提取第35-37页
   ·细胞培养第37-38页
     ·COS-1 细胞的培养第37页
     ·CHO-K1 细胞的培养第37-38页
   ·HBsAg pAb(IgG)的生物素化第38-39页
   ·质粒转染细胞预实验第39-47页
     ·磷酸钙介导的基因转染第39-44页
     ·PEI介导的基因转染第44-47页
   ·PEI对CHO-K1 细胞毒性测定第47-51页
     ·PEI对CHO-K1 细胞毒性测定实验一第48-49页
     ·PEI对CHO-K1 细胞毒性测定实验二第49-50页
     ·PEI对CHO-K1 细胞毒性测定实验三第50-51页
   ·G418 筛选预实验-确定抗生素最佳筛选浓度第51-53页
   ·PEI/pcDNA-S-1 转染CHO-K1 细胞及高表达克隆细胞筛选第53-62页
     ·转染细胞上清的ELISA检测第53-55页
     ·筛选细胞的扩大培养第55-56页
     ·稳定表达的ELISA检测第56-60页
     ·透射电子显微镜检测第60-62页
第四章 实验总结第62-64页
参考文献第64-67页
发表论文和科研情况说明第67-68页
致谢第68-69页
附录第69-70页

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