中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-21页 |
·乙型肝炎简介 | 第7-8页 |
·乙型肝炎病毒 | 第8-10页 |
·HBV研究进展历程 | 第8页 |
·乙型肝炎病毒 | 第8-10页 |
·乙型肝炎疫苗 | 第10-13页 |
·乙型肝炎疫苗的发展 | 第10-11页 |
·新型乙肝疫苗 | 第11-13页 |
·基因工程药物表达系统 | 第13-16页 |
·原核表达系统 | 第13-14页 |
·真核表达系统 | 第14-16页 |
·基因转移系统 | 第16-21页 |
·病毒载体转移体系 | 第17页 |
·非病毒转移体系 | 第17-21页 |
第二章 材料和方法 | 第21-34页 |
·实验材料 | 第21-25页 |
·细胞和菌株 | 第21页 |
·分子生物学常用溶液 | 第21-22页 |
·细胞培养常用溶液及相关试剂溶液 | 第22-23页 |
·主要生化试剂 | 第23-24页 |
·主要实验仪器 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-34页 |
·SDS碱裂解法小量制备质粒实验 | 第25页 |
·大提质粒实验 | 第25页 |
·细胞培养实验 | 第25-27页 |
·HBsAg pAb(IgG)的生物素化 | 第27-28页 |
·表达上清中HBsAg ELISA检测实验 | 第28页 |
·磷酸钙介导的基因转染实验 | 第28-29页 |
·PEI介导的基因转染预实验(24 孔板) | 第29-30页 |
·PEI介导的基因转染实验(6 孔板) | 第30-31页 |
·MTT法检测细胞存活率实验 | 第31页 |
·PEI对CHO-K1 细胞毒性测定实验 | 第31-32页 |
·G418 筛选预实验-确定最佳筛选浓度实验 | 第32页 |
·基因转染后的 CHO-K1-S1 高表达筛选实验 | 第32-34页 |
第三章 实验结果和讨论 | 第34-62页 |
·质粒的提取 | 第34-37页 |
·pS-1 质粒的提取 | 第34-35页 |
·pcDNA-S-1 质粒的提取 | 第35-37页 |
·细胞培养 | 第37-38页 |
·COS-1 细胞的培养 | 第37页 |
·CHO-K1 细胞的培养 | 第37-38页 |
·HBsAg pAb(IgG)的生物素化 | 第38-39页 |
·质粒转染细胞预实验 | 第39-47页 |
·磷酸钙介导的基因转染 | 第39-44页 |
·PEI介导的基因转染 | 第44-47页 |
·PEI对CHO-K1 细胞毒性测定 | 第47-51页 |
·PEI对CHO-K1 细胞毒性测定实验一 | 第48-49页 |
·PEI对CHO-K1 细胞毒性测定实验二 | 第49-50页 |
·PEI对CHO-K1 细胞毒性测定实验三 | 第50-51页 |
·G418 筛选预实验-确定抗生素最佳筛选浓度 | 第51-53页 |
·PEI/pcDNA-S-1 转染CHO-K1 细胞及高表达克隆细胞筛选 | 第53-62页 |
·转染细胞上清的ELISA检测 | 第53-55页 |
·筛选细胞的扩大培养 | 第55-56页 |
·稳定表达的ELISA检测 | 第56-60页 |
·透射电子显微镜检测 | 第60-62页 |
第四章 实验总结 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-67页 |
发表论文和科研情况说明 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
附录 | 第69-70页 |