中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
前言 | 第8-9页 |
第一章 文献综述蛋白质转导结构域的研究进展 | 第9-18页 |
·蛋白质转导机构域简介 | 第9-10页 |
·PTD 转导机制的研究现状 | 第10-12页 |
·PTD 在研究领域的应用 | 第12-14页 |
·PTD 在开发治疗性蛋白质药物方面的应用 | 第12-13页 |
·PTD 在基础科学研究领域的应用 | 第13-14页 |
·PTD 应用存在的问题 | 第14-15页 |
·展望 | 第15-18页 |
第二章 PTD-GFP 蛋白质转导模型的建立 | 第18-38页 |
概述 | 第18-19页 |
·材料与方法 | 第19-25页 |
·材料 | 第19页 |
·方法 | 第19-25页 |
·构建重组质粒 | 第19-21页 |
·融合蛋白质的诱导表达条件优化 | 第21-22页 |
·融合蛋白质的纯化 | 第22-25页 |
·TTG 蛋白质质谱鉴定 | 第25页 |
·细胞培养 | 第25页 |
·结果与讨论 | 第25-35页 |
·VP22-GFP 蛋白质的表达及纯化 | 第25-31页 |
·VP22-GFP 质粒载体的构建 | 第25-26页 |
·VP22-GFP 融合蛋白质的表达与纯化 | 第26-29页 |
·VP22-GFP 蛋白质浓度测定 | 第29-30页 |
·VP22-GFP 蛋白质细胞转导能力验证 | 第30-31页 |
·Tat-GFP 蛋白质转导模型的建立 | 第31-35页 |
·融合蛋白质的诱导纯化 | 第31-32页 |
·TTG 蛋白质质谱鉴定 | 第32-33页 |
·融合蛋白质浓度测定 | 第33-34页 |
·融合蛋白质细胞转导能力验证 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
·本章小结 | 第37-38页 |
第三章 PTD-EDAG 融合蛋白质的表达纯化 | 第38-46页 |
·材料与方法 | 第38-40页 |
·材料 | 第38页 |
·方法 | 第38-40页 |
·VP22-EDAG 载体的构建 | 第38-39页 |
·VP22-EDAG 蛋白质的表达纯化 | 第39页 |
·TTE 蛋白质的表达纯化 | 第39-40页 |
·EDAG、TTE 蛋白质的验证 | 第40页 |
·结果与讨论 | 第40-44页 |
·VP22-EDAG 的表达纯化 | 第40-41页 |
·VP22-EDAG 载体的构建 | 第40-41页 |
·VP22-EDAG 融合蛋白质的表达与纯化 | 第41页 |
·Tat-EDAGD 融合蛋白质的表达纯化 | 第41-44页 |
·TTE 诱导条件的优化 | 第41-42页 |
·EDAG 蛋白质的纯化 | 第42页 |
·TTE 蛋白质的纯化 | 第42-43页 |
·Western-Blot 验证EDAG、TTE 蛋白质 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
·本章小结 | 第45-46页 |
第四章 总结与展望 | 第46-47页 |
·主要结论 | 第46页 |
·展望 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
附录Ⅰ 英文缩略语表 | 第54-55页 |
附录Ⅱ 主要实验仪器 | 第55-56页 |
附录Ⅲ 主要溶液的配置 | 第56-58页 |