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犬瘟热病毒H基因的克隆表达与分子流行病学研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 犬瘟热研究进展第11-24页
   ·犬瘟热概述第11-17页
     ·犬瘟热的发现与流行病学特点第11-12页
     ·致病机理第12页
     ·临床症状与病理变化第12-13页
     ·检测与诊断第13-17页
   ·犬瘟热病毒概述第17-24页
     ·CDV 的形态第17页
     ·CDV 的理化特征第17-18页
     ·CDV 的细胞受体第18页
     ·CDV 的分离第18-19页
     ·CDV 的基因组结构第19-24页
第二章 犬瘟热病毒反转录-套式PCR 检测方法的建立第24-35页
   ·材料第24-27页
     ·病料第24-26页
     ·工具酶和主要试剂第26-27页
     ·主要仪器与设备第27页
   ·方法与步骤第27-31页
     ·引物设计第27页
     ·病毒总RNA 的提取第27页
     ·反转录第27-28页
     ·RT-PCR 检测第28页
     ·套式PCR 检测第28-29页
     ·套式PCR 检测CDV 核酸方法的特异性第29页
     ·扩增产物的纯化第29-30页
     ·TA 克隆第30-31页
     ·序列测定第31页
   ·结果第31-33页
     ·临床症状与病理变化第31页
     ·RT-PCR 产物的电泳结果第31页
     ·目的片段的克隆与鉴定第31-33页
     ·反转录-套式PCR 检测方法的特异性第33页
     ·RT-PCR 与反转录-套式PCR 的检测结果与比较第33页
   ·讨论第33-34页
     ·CDV N 基因第33页
     ·检测方法的特异性第33页
     ·反转录-套式PCR 检测CDV 方法的建立第33-34页
   ·小结第34-35页
第三章 基于H 基因的杭州地区CDV 分子流行病学调查第35-51页
   ·材料第35-36页
     ·菌株、工具酶和主要试剂第35页
     ·主要仪器与设备第35页
     ·病料来源第35-36页
   ·方法与步骤第36-38页
     ·不同CDV 毒株H 基因的扩增和测序第36-37页
     ·H 基因全长的序列分析第37-38页
   ·结果第38-48页
     ·RT-PCR 产物的电泳结果第38页
     ·目的片段的克隆与鉴定第38-39页
     ·H 基因的序列分析第39-48页
   ·讨论第48-49页
     ·H 基因的遗传进化分析第48-49页
     ·H 基因的变异分析第49页
   ·小结第49-51页
第四章 犬瘟热病毒HZ026 株的分离及其H 基因的克隆表达第51-64页
   ·材料第51-52页
     ·病料、质粒与菌株第51页
     ·主要试剂和仪器设备第51页
     ·细胞及培养液第51-52页
   ·方法与步骤第52-58页
     ·病例的处理第52页
     ·细胞的预处理和病毒的分离第52页
     ·病毒的鉴定和CDV 传代后H 基因的变异分析第52页
     ·引物设计第52-53页
     ·目的基因片段的RT-PCR 扩增第53页
     ·目的基因的克隆、鉴定及表达载体的构建第53-54页
     ·重组质粒在大肠杆菌中的表达第54-57页
     ·重组蛋白的纯化第57页
     ·Western blot 分析第57-58页
   ·结果第58-60页
     ·病毒的分离鉴定第58-59页
     ·CDV 传代后H 基因的变异第59页
     ·目的片段的PCR 扩增第59页
     ·重组质粒的鉴定第59页
     ·重组蛋白的表达第59-60页
     ·纯化蛋白的免疫反应原性分析第60页
   ·讨论第60-63页
     ·CDV 的分离鉴定第60-61页
     ·CDV 传代后H 基因变异情况第61页
     ·影响目的蛋白表达的因素第61-62页
     ·病毒的来源分析第62页
     ·表达蛋白的免疫反应原性分析第62-63页
   ·小结第63-64页
结论第64-65页
参考文献第65-74页
致谢第74-75页
个人简介第75页

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