摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 犬瘟热研究进展 | 第11-24页 |
·犬瘟热概述 | 第11-17页 |
·犬瘟热的发现与流行病学特点 | 第11-12页 |
·致病机理 | 第12页 |
·临床症状与病理变化 | 第12-13页 |
·检测与诊断 | 第13-17页 |
·犬瘟热病毒概述 | 第17-24页 |
·CDV 的形态 | 第17页 |
·CDV 的理化特征 | 第17-18页 |
·CDV 的细胞受体 | 第18页 |
·CDV 的分离 | 第18-19页 |
·CDV 的基因组结构 | 第19-24页 |
第二章 犬瘟热病毒反转录-套式PCR 检测方法的建立 | 第24-35页 |
·材料 | 第24-27页 |
·病料 | 第24-26页 |
·工具酶和主要试剂 | 第26-27页 |
·主要仪器与设备 | 第27页 |
·方法与步骤 | 第27-31页 |
·引物设计 | 第27页 |
·病毒总RNA 的提取 | 第27页 |
·反转录 | 第27-28页 |
·RT-PCR 检测 | 第28页 |
·套式PCR 检测 | 第28-29页 |
·套式PCR 检测CDV 核酸方法的特异性 | 第29页 |
·扩增产物的纯化 | 第29-30页 |
·TA 克隆 | 第30-31页 |
·序列测定 | 第31页 |
·结果 | 第31-33页 |
·临床症状与病理变化 | 第31页 |
·RT-PCR 产物的电泳结果 | 第31页 |
·目的片段的克隆与鉴定 | 第31-33页 |
·反转录-套式PCR 检测方法的特异性 | 第33页 |
·RT-PCR 与反转录-套式PCR 的检测结果与比较 | 第33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
·CDV N 基因 | 第33页 |
·检测方法的特异性 | 第33页 |
·反转录-套式PCR 检测CDV 方法的建立 | 第33-34页 |
·小结 | 第34-35页 |
第三章 基于H 基因的杭州地区CDV 分子流行病学调查 | 第35-51页 |
·材料 | 第35-36页 |
·菌株、工具酶和主要试剂 | 第35页 |
·主要仪器与设备 | 第35页 |
·病料来源 | 第35-36页 |
·方法与步骤 | 第36-38页 |
·不同CDV 毒株H 基因的扩增和测序 | 第36-37页 |
·H 基因全长的序列分析 | 第37-38页 |
·结果 | 第38-48页 |
·RT-PCR 产物的电泳结果 | 第38页 |
·目的片段的克隆与鉴定 | 第38-39页 |
·H 基因的序列分析 | 第39-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·H 基因的遗传进化分析 | 第48-49页 |
·H 基因的变异分析 | 第49页 |
·小结 | 第49-51页 |
第四章 犬瘟热病毒HZ026 株的分离及其H 基因的克隆表达 | 第51-64页 |
·材料 | 第51-52页 |
·病料、质粒与菌株 | 第51页 |
·主要试剂和仪器设备 | 第51页 |
·细胞及培养液 | 第51-52页 |
·方法与步骤 | 第52-58页 |
·病例的处理 | 第52页 |
·细胞的预处理和病毒的分离 | 第52页 |
·病毒的鉴定和CDV 传代后H 基因的变异分析 | 第52页 |
·引物设计 | 第52-53页 |
·目的基因片段的RT-PCR 扩增 | 第53页 |
·目的基因的克隆、鉴定及表达载体的构建 | 第53-54页 |
·重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第54-57页 |
·重组蛋白的纯化 | 第57页 |
·Western blot 分析 | 第57-58页 |
·结果 | 第58-60页 |
·病毒的分离鉴定 | 第58-59页 |
·CDV 传代后H 基因的变异 | 第59页 |
·目的片段的PCR 扩增 | 第59页 |
·重组质粒的鉴定 | 第59页 |
·重组蛋白的表达 | 第59-60页 |
·纯化蛋白的免疫反应原性分析 | 第60页 |
·讨论 | 第60-63页 |
·CDV 的分离鉴定 | 第60-61页 |
·CDV 传代后H 基因变异情况 | 第61页 |
·影响目的蛋白表达的因素 | 第61-62页 |
·病毒的来源分析 | 第62页 |
·表达蛋白的免疫反应原性分析 | 第62-63页 |
·小结 | 第63-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
个人简介 | 第75页 |