| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-23页 |
| ·内脂素 | 第10-14页 |
| ·内脂素(Visfatin)的发现 | 第10页 |
| ·内脂素的分子结构 | 第10-12页 |
| ·内脂素的功能 | 第12-14页 |
| ·前脂肪细胞和成脂分化 | 第14-20页 |
| ·前脂肪细胞 | 第14-15页 |
| ·前脂肪细胞的分化 | 第15-17页 |
| ·前脂肪细胞分化重要转录因子 | 第17-18页 |
| ·前脂肪细胞的信号通路 | 第18-19页 |
| ·脂肪细胞分化与肥胖、炎症反应、脂代谢紊乱、胰岛素抵抗和糖尿病 | 第19-20页 |
| ·内脂素对糖脂代谢调节的可能机理 | 第20-22页 |
| ·旁分泌、自分泌途径 | 第20页 |
| ·内分泌途径 | 第20-21页 |
| ·内脂素对成脂分化可能作用机制 | 第21-22页 |
| ·本项研究的目的、意义 | 第22-23页 |
| 第2章 鼠源内脂素的原核表达、纯化及初步功能研究 | 第23-39页 |
| ·材料与试剂 | 第23-26页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·主要溶液配制 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-33页 |
| ·鼠内脂素全长编码序列的获取 | 第26-28页 |
| ·内脂素原核表达质粒的构建 | 第28-30页 |
| ·内脂素原核表达、蛋白纯化、浓度测定 | 第30-32页 |
| ·油红 O 染色 | 第32-33页 |
| ·实验结果 | 第33-37页 |
| ·鼠内脂素全长编码序列的获取 | 第33页 |
| ·构建原核表达质粒pRSETa-visfatin, pET28a-visfatin | 第33-35页 |
| ·内脂素原核表达、蛋白纯化、浓度测定 | 第35-37页 |
| ·内脂素的原核表达及纯化 | 第35-36页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第36页 |
| ·内脂素原核表达蛋白对3T3-L1 细胞的作用 | 第36-37页 |
| ·结果讨论 | 第37-38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 第3章 鼠源内脂素抗体制备及效价测定 | 第39-45页 |
| ·材料与试剂 | 第39-41页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| ·主要溶液配制 | 第40-41页 |
| ·其它材料 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·抗体制备 | 第41页 |
| ·抗体效价测定 | 第41-42页 |
| ·小鼠组织样本处理 | 第42页 |
| ·实验结果 | 第42-44页 |
| ·抗体效价测定 | 第42-43页 |
| ·正常小鼠组织中的 Visfatin 表达 | 第43-44页 |
| ·结果讨论 | 第44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 第4章 内脂素真核表达及功能研究 | 第45-57页 |
| ·材料和试剂 | 第45-47页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·主要溶液配制 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-52页 |
| ·内脂素真核表达载体的构建及表达 | 第47-48页 |
| ·内脂素在3T3-L1 细胞中基因沉默 | 第48-49页 |
| ·3T3-L1 细胞培养及诱导分化 | 第49页 |
| ·MTT 法检测内脂素对3T3-L1 增殖的影响 | 第49-50页 |
| ·半定量 RT-PCR 检测mRNA 表达变化 | 第50-51页 |
| ·Western Blot 检测蛋白表达 | 第51-52页 |
| ·统计学分析 | 第52页 |
| ·实验结果 | 第52-55页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第52页 |
| ·内脂素在 cos7 中的过表达 | 第52-53页 |
| ·内脂素在3T3-L1 细胞中的基因沉默 | 第53-54页 |
| ·内脂素促进3T3-L1 细胞增殖 | 第54页 |
| ·内脂素促进3T3-L1 前脂肪细胞向脂肪细胞分化 | 第54-55页 |
| ·结果讨论 | 第55页 |
| ·本章小结 | 第55-57页 |
| 第5章 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第64页 |
